초록 ▼

1차년도$\circ$
체세포 핵치환 후 활성화 조건에 따른 소 복제수정란의 체외 발달율을 조사한 결과, 각 처리구에 따른 발달율의 차이는 없었으며 어떠한 활성화 방법을 사용하더라도$20\%$ 이상의 배반포기 발달율을 얻을 수 있었음$\circ$ 공배양 등의 체외배양 체계를 통해 $30\%$ 이상의 복제 배반포를 생산할 수 있었음.
$\circ$ 체외 및 복제수정란에서의 발생단계별 Oct4의 발현 양을 real-time PC

1차년도$\circ$
체세포 핵치환 후 활성화 조건에 따른 소 복제수정란의 체외 발달율을 조사한 결과, 각 처리구에 따른 발달율의 차이는 없었으며 어떠한 활성화 방법을 사용하더라도$20\%$ 이상의 배반포기 발달율을 얻을 수 있었음$\circ$ 공배양 등의 체외배양 체계를 통해 $30\%$ 이상의 복제 배반포를 생산할 수 있었음.
$\circ$ 체외 및 복제수정란에서의 발생단계별 Oct4의 발현 양을 real-time PCR법으로 비교 분석한 결과, 전반적인 발현양상은 유사하나 Oct4의 발현 양에는 다소 차이가 있었음.
$\circ$ 체외, 복제수정란 및 TSA 처리된 공여핵으로는 재구성된 난자의 histone acetylation 정도를 측정한 결과, 체외수정란의 histone acetylation 정도는 핵이식란 및 TSA 처리구보다 높은 histone acetylation을 보여주었음.
2, 3 차년도
$\circ$ 인간배아줄기세포 연구의 인프라 구축: 인간배야줄기세포의 배양을 위한 인프라로 15평 규모의 항습/항은 배양실을 당 연구원에서 전액 지원하여 완공함으로써 인간배아줄기세포연구의 인프라를 구축하였음.
$\circ$ 인간배아줄기세포의 배양체계 확립 및 특성 검증.
$\circ$ 생쥐배아줄기세포에서 신호전달 유전자들의 발현성 검증.
$\circ$ 인간배아줄기세포에서 신호전달 유전자들의 발현성 검증: 인간배아줄기세포의 자가재생산 조절 기전을 규명하기 위해서 진화적으로 잘 보존된 신호전달인 TGF-beta, Wnt, Hedgehog, Receptor Tyrosine Kinase-RTK, Jak/Stat, Notch signal pathway를 대상으로 분화된 세포와 미분화된 인간배아줄기세포에서 추출한 mRNA를 이용하여 RT-PCR 방법으로 다양한 신호전달 유전자들의 발현 정도를 확인하였음.
$\circ$ 신호전달체계의 조절을 통한 인간배아줄기세포의 분화연구: Inhibitor를 이용하여 신호전달의 발현을 억제시킨 후 인간배아줄기세포에서 자가재생산에 관련된 전사인자들의 발현이 줄어드는 것을 확인하였으며 목표 유전자들의 발현을 확인하였음.

Abstract ▼

1. Establishment of cloned embryos from the somatic cell nucleus transfer.
a. Improving the efficiency of the cloned embryo development
b. Examination of Oct4 and FGF4 gene expression during the development of cloned embryos.
c. Examination of histone acetylation during the development of c

1. Establishment of cloned embryos from the somatic cell nucleus transfer.
a. Improving the efficiency of the cloned embryo development
b. Examination of Oct4 and FGF4 gene expression during the development of cloned embryos.
c. Examination of histone acetylation during the development of cloned embryos.
d. Production of cloned embryos using mouse somatic cell nuclei.
2. Establishment of the human embryonic stem cell culture system and study of gene expression of the signal transduction pathways in mouse embryonic stem cells.
a. Establishment of the human embryonic stem cell culture system.
b. Study of gene expression of the signal transduction pathways in mouse embryonic stem cells.
3. Study of gene expression of the signal transduction pathways regulating self-renewal in human embryonic stem cells.
a. Study of gene expression in the TGF-beta, Wnt, Hh, RTK, Jak/Stat, Notch signal transduction pathways in human embryonic stem cells.
b. Study of transcription factor gene expression in the signaling specific inhibitor treated human embryonic stem cells.
c. Study of target gene expression in the signaling specific inhibitor treated human embryonic stem cells.

목차 Contents

• 표지 ...1
• 제출문 ...3
• 보고서 초록 ...4
• 요약문 ...5
• SUMMARY ...8
• CONTENTS ...11
• 목차 ...12
• 제1장 연구개발과제의 개요 ...13
• 제1절 연구개발의 목적 ...13
• 제2절 연구개발의 필요성 및 범위 ...13
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ...18
• 제1절 국내 기술개발 현황 ...18
• 제2절 국외 기술개발 현황 ...19
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ...21
• 제1절 이론적, 실험적 접근방법 ...21
• 제2절 연구내용 및 결과 ...31
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ...61
• 제1절 체세포 복제 수정란의 체외 생산체계 확립 ...61
• 제2절 인간배아줄기세포의 자가재생산 기전 조사 ...61
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ...63
• 제1절 기술적 효과 ...63
• 제2절 경제적 효과 ...63
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ...64
• 제7장 참고문헌 ...65