초록 ▼

줄기세포 연구의 핵심은 줄기세포의 특성과 분화의 기전을 이해하여 이를 세포치료에 활용하는 것이다. 본 연구개발의 최종목표는 미분화 배아줄기세포 특이적 유전자 및 단백질의 활성을 집중적으로 연구하고, 미분화세포의 특성에 기반하여 배양중인 미분화세포의 효율적인 선별법을 확립하여 줄기세포 배양 및 유지의 효율화와 나아가 줄기세포 활용의 기초를 제공하고자 함에 있다. 인간배아줄기세포를 효율적으로 분리 배양하는 방법을 확립하여 정리 하였고 HDAC inhibitor와 NF-kB 중심으로 배아줄기세포의 활성을 연구하였다.
1. 인간배아줄

줄기세포 연구의 핵심은 줄기세포의 특성과 분화의 기전을 이해하여 이를 세포치료에 활용하는 것이다. 본 연구개발의 최종목표는 미분화 배아줄기세포 특이적 유전자 및 단백질의 활성을 집중적으로 연구하고, 미분화세포의 특성에 기반하여 배양중인 미분화세포의 효율적인 선별법을 확립하여 줄기세포 배양 및 유지의 효율화와 나아가 줄기세포 활용의 기초를 제공하고자 함에 있다. 인간배아줄기세포를 효율적으로 분리 배양하는 방법을 확립하여 정리 하였고 HDAC inhibitor와 NF-kB 중심으로 배아줄기세포의 활성을 연구하였다.
1. 인간배아줄기세포의 단일세포 배양 후 활성 연구
1) 단일세포 배양 protocol 확립
2) single cell dissociation 과정에서 분자적 변화 확인
3) 단일세포 배양 후 stem cell marker 발현 확인
2. 줄기세포의 특성에 기반한 미분화 세포의 선별법 연구
1) 마우스 및 인간 배아줄기세포에서 HDAC inhibitor의 영향 분석
2) ES cell의 NF-kB 발현 및 분화 관련 특성분석
3) 마우스 줄기세포에서 proteasome inhibitor의 영향 분석
4) 마우스 배아줄기세포에서 유전자 전달 효율 개선
5) human Asb9 발현 특성 및 작용 기전연구

Abstract ▼

This study aims to investigate specific properties of embryonic stem cells and understand related mechanisms. We ultimately aim to improve the efficiency of ES cell cultivation method and increase the differentiation efficacy on the basis of the information.
Here, we confirmed that human ES cells

This study aims to investigate specific properties of embryonic stem cells and understand related mechanisms. We ultimately aim to improve the efficiency of ES cell cultivation method and increase the differentiation efficacy on the basis of the information.
Here, we confirmed that human ES cells can be passaged and maintained under feeder-free culture condition on Matrigel coated plates after dissociation using enzymes such as accutase and trypLE. Based on the expression patterns of stem cell marker genes, human ES cells passaged using single cell dissociation maintain stemness for short period. However, when we analysed karyotypes after long passages, we found mutation(s) in chromosome 7. Therefore, culture method of single cell-dissociated human ES cells is useful for obtaining large number of cells in short period (~5 passages) even though it can’t be used for long term maintenance. When the single cell-dissociated human ES cells were used for transfection, the efficiency was significantly increased.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 요약서 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 8
• CONTENTS ... 9
• 목차 ... 10
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 11
• 제 1절. 연구목적 및 범위 ... 11
• 제 2절. 연구의 필요성 ... 12
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 15
• 제 1절. 줄기세포 자가재생/분화 기전 및 줄기세포 배양에 관한 국외 타 연구기관의 연구결과 ... 15
• 제 2절. 줄기세포 자가재생/분화 기전 및 줄기세포 배양에 관한 국내 연구현황 ... 18
• 제 3절. 연구결과가 국내·외 기술개발현황에서 차지하는 위치 ... 20
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 21
• 제 1절. ES cell 배양 및 실험방법 ... 21
• 제 2절. 인간 배아줄기세포의 단일세포 배양법 개발 ... 27
• 제 3절. 줄기세포 특이 유전자/단백질 발현 조절의 이해 및 활용연구 ... 36
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 90
• 제 1절. 연구개발목표의 달성도 ... 90
• 제 2절. 관련분야의 기술발전에의 기여도 ... 92
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 93
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 94
• 제 7 장 연구시설·장비 현황 ... 96
• 제 8 장 참고문헌 ... 97