초록

본 연구는 3년간 참조기를 대상으로 인공종묘생산 기술을 개발하는데 그 목적을 두었으며, 이를 수행하기 위해 기초 생태자료 분석, 자연산 참조기 채포 및 실내사육 기술, 산란유도에 의한 종묘생산과 양성기술, 양식생물학적 특성, 특정 유전자 분리 동정과 다양성 분석에 대한 일련의 연구를 수행함으로서 양식생태학적 특성 이해와 새로운 양식대상 가능성에 대한 연구결과를 종합하여 보고하고자 한다.

Abstract ▼

Small yellow croaker, Larimichthy polyactis a species specific to korean coasts of the Yellow Sea is traditionally favored by korean society. Because of the recent decrease of wild stocks, the landing has failed to meet the demand by the society. The economic value of the species is extremely high w

Small yellow croaker, Larimichthy polyactis a species specific to korean coasts of the Yellow Sea is traditionally favored by korean society. Because of the recent decrease of wild stocks, the landing has failed to meet the demand by the society. The economic value of the species is extremely high when it is specially processed. for instance, Younggwang, Jeollanam-do annually creates about 100 billions Won from Gulbi, a salted small yellow croaker, L. polyactis, Therefore, technology development for the seed production and aquaculture of the species is strongly suggested. Once the technology is established, a great number of economic values is expected in terms of general activation of depressed aquaculture business and wild stocks enhancement via seed releasing into the coasts.
Annual reproductive cycle of small yellow croaker were histologically investigated based on samples captured from the coast of Mokpo, Young twang and Kanghwa, South Korea. Gonadosomatic index (GSI) of female began to increase from December and reached the maximum at May. GSI of male reached the maximum at February. Investigation of GSI change and gonadal tissue showed that the annual reproductive cycle was classified into the following successive 4 stages: the degenerative and resting stage from lune to September, the growing stage from October to December, the mature stage from January to February, the ripe and spawning stage from March to June.
We described the isolation and characterization of eight microsatellite loci from small yellow croaker. All loci were found to be polymorphic, and had between three and 27 alleles with expected heterozygosity ranging from 0.48 to 0.98 in 30 individuals examined. Genetic diversity between hatchery population and wild population of small yellow croaker was assessed by means of microsatellite DNA. Marked reductions of genetic diversity in hatchery population compared with the wild population were observed in terms of number of micosatellite alleles and expected heterozygosity.
The wild spawners caught in the knotless-net set in the fisheries grounds were individually transferred into a specially designed culture tank (1 ton) set in the hatchery. The biometry of the experiment fish were 18.7 cm on average total length and 68.8 g. Among 7,206 fish, 1,534 fish survived, representing 21.3% of survival rate.

목차 Contents

• 제 1 장 연구개발과제의 개요...57
• 제 1 절 연구개발의 목적...57
• 제 2 절 연구개발의 필요성...57
• 1. 기술적인 측면...57
• 2. 경제.산업적 측면...57
• 3. 사회.문화적 측면...58
• 제 3 절 연구개발의 범위...59
• 1. 1차년도...59
• 2. 2차년도...59
• 3. 3차년도...60
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...61
• 제 1 절 기술개발 현황...61
• 제 2 절 문제점...62
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과...63
• 제 1 절 연구방법...63
• 1. 번식생물학적 특성...63
• 가. 실험시료 채집...63
• 나. 측정항목...63
• 다. 조직학적 분석...66
• 2. 참조기 확인 및 GnRH 유전자 동정...68
• 가. 시료 및 뇌 수집...68
• 나. Total RNA 분리...68
• 다. c-DNA 합성...68
• 라. 중합효소연쇄반응(Polymerase Chain Reaction)...68
• 마. Ligation, transformation, plasmid DNA 분리 및 염기서열 분석...69
• 3. 유전적 다양성 분석...69
• 가. 실험어...69
• 나. Genomic DNA 분리...69
• 다. Microsatellite DNA 분리...69
• (1) 제한효소에 의한 DNA 절단 및 adapter의 ligation...69
• (2) Hybridization에 의한 microsatellite DNA의 enrichment...70
• (3) Adapter 배열을 이용한 PCR...70
• (4) Adapter의 Nhe I 영역의 절단과 vector의 Xba I 절단...71
• (5) 형질전환(Transformation)...71
• (6) Colony hybridization에 의한 양성 colony 확인...71
• (7) 양성 colony의 DNA 염기서열 분석...71
• 라. Microsatellite DNA에 의한 다양성 분석...71
• (1) Primer 설계 및 표지...71
• (2) Microsatellite 유전자형 분석...72
• (3) 통계처리 및 분석방법...72
• 4. 종묘생산...72
• 가. 어미개체군 확보...72
• 나. 어미 사육, 성성숙 및 산란유도...73
• (1) 실내 어미 월동사육 관리...73
• (2) 성성숙에 의한 자연산란 유도...73
• 다. 인공종묘 생산...74
• (1) 수정란 관리...74
• (2) 참조기 치어 사육관리...79
• (가) 로티퍼 공급...79
• (나) 알테미아 공급...79
• (다) 배합사료 공급...79
• (라) 치어 사육...79
• 5. 양식생물학적 특성...81
• 가. 난 발생...81
• 나. 수정란 크기...81
• 다. 부화율...81
• (1) 수온별...81
• (2) 염분농도별...81
• 라. 생존율...81
• (1) 수온별...81
• (2) 염분농도별...81
• 마. 적정 산란시기 판정...82
• 바. 행동특성...82
• 사. 밀도별 생존율...82
• 아. 수온 충격 실험...82
• 제 2 절 연구결과 및 고찰...83
• 1. 번식생물학적 특성...83
• 가. 채포 어장의 수온변화...84
• 나. 번식생물학적 정보...87
• (1) 월별 생체지수 변화...87
• (2) 월별 생식소 발달...94
• (가) 난소...94
• (나) 정소...96
• (3) 생식년주기 분석...102
• (가) 성장기...102
• (나) 성숙기...102
• (다) 완숙 및 산란기...102
• (라) 퇴화 및 휴지기...102
• 2. 유전학적 분석...105
• 가. 참조기의 유전학적 확인...105
• (1) Microsatellite DNA 분리...105
• (2) 유전학적 확인...106
• (3) 염기서열 분석에 의한 16S ribosomal RNA 유전자 확인...106
• 나. 참조기 특이적인 GnRH 유전자의 동정...112
• (1) GnRH 역할...112
• (2) 염기서열 비교...116
• 다. 유전적 다양성 분석...119
• (1) Microsatellite 분리...119
• (2) 유전적 다양성 분석...119
• 3. 종묘생산...126
• 가. 채포, 수송 및 실내사육지 수용방법 개발...126
• (1) 채포어법...126
• (2) 수송방법...129
• (3) 채포, 수송 및 수용방법의 표준화...129
• (가) 갯벌 운반용 개조콤바인...130
• (나) 채포방법...130
• (다) 운반 및 수송...130
• (라) 실내사육지 수용...130
• (마) 실내사육...131
• 나. 자연산 참조기 어미 확보와 생존율...137
• (1) 참조기 채포현장, 수송 및 사육수온...137
• (2) 어미개체 확보 및 생존율...137
• 다. 인공번식 유도...140
• (1) 성숙유도...140
• (2) 자연산란 유도...140
• (3) 성성숙 유도에 의한 산란...143
• 라. 수정란 부화 사육...143
• (1) 수정란 부화...143
• (2) 수정란 관리...143
• (3) 난 발생...143
• 마. 자치어 성장...150
• 4. 대량 종묘생산 표준화...155
• 가. 산란유도 시기 판정...155
• 나. 부화관리 기술...160
• (1) 수정란 수집...160
• (2) 부화조건...160
• (3) 부화자어 사육환경...160
• 다. 초기먹이 전환시기 구명 먹이공급 방법 및 시기...165
• (1) 로티퍼(Rotifer) 영양강화...165
• (2) 로티퍼 공급...165
• (3) 알테미아(Artemia) 영양강화...165
• (4) 알테미아 공급...165
• (5) 배합사료 공급...166
• 5. 양식생물학적 특성...169
• 가. 수정란 크기...169
• 나. 부화자어의 성장에 따른 변화...169
• 다. 부화율...169
• (1) 수온별...169
• (2) 염분농도별...169
• 라. 생존율...175
• (1) 수온별...175
• (2) 염분농도별...175
• 마. 자치어의 적정밀도...175
• 바. 자치어의 초기성장 관계...175
• 사. 초기 성장행동 특성...182
• 아. 수온충격 반응 및 생존율...183
• 6. 종묘방류 및 분양...186
• 가. 방류 치어 수송...186
• 나. 방류...186
• 다. 분양...186
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...191
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...194
• 제 1 절 핵심기술 또는 연구결과...194
• 1. 핵심기술...194
• 2. 핵심 연구결과...194
• 제 2 절 논문발표 실적...195
• 제 3 절 핵심기술(연구내용) 수준 및 활용유형...196
• 제 4 절 각 연구결과별 구체적 활용계획...197
• 제 5 절 연구결과의 기술이전 조건...198
• 제 6 절 기대효과...199
• 제 6 장 참고문헌...200