보고서 정보
주관연구기관 |
충남대학교 Chungnam National University |
연구책임자 |
배기환
|
참여연구자 |
신종헌
,
권병목
|
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2006-11 |
과제시작연도 |
2006 |
주관부처 |
식품의약품안전청 |
사업 관리 기관 |
식품의약품안전청 Korea Food & Drug Administration |
등록번호 |
TRKO200700007647 |
과제고유번호 |
1470001571 |
사업명 |
독성연구개발 |
DB 구축일자 |
2013-04-18
|
키워드 |
활성 성분분리.정성 & 정량 분석법.효능유전자.오미자.후박.Isolation of bioactive components.Schizandra chinensis.Magnolia obovata.Gene expression profile.qualitative & quantitative analyses.
|
초록
▼
오미자의 hexane 분획물로부터 gomisin J, gomisin N, gomisin B, wuweizisu C, wuweizisu B, schizantherin C, gomisin C, gomisin G, schisandrin A, schisandrin C, schisandrol A, schisandrol B, schizandrin, gomisin A등의 총 14종의 화합물과, 후박의 hexane 및 ethyl acetate 분획물들로부터 4-methoxyhonokiol, magnolol, honokiol, obovatol, s
오미자의 hexane 분획물로부터 gomisin J, gomisin N, gomisin B, wuweizisu C, wuweizisu B, schizantherin C, gomisin C, gomisin G, schisandrin A, schisandrin C, schisandrol A, schisandrol B, schizandrin, gomisin A등의 총 14종의 화합물과, 후박의 hexane 및 ethyl acetate 분획물들로부터 4-methoxyhonokiol, magnolol, honokiol, obovatol, syringin, magnolignan C, $\beta$-sitosterol, daucosterol, $\beta$-eudesmol, eudeshonokiol, magnoflorine등의 총 11종의 화합물들을 크로마토그래피법으로 분리하여 생리활성검색 시료로 제공하였다.
오미자와 후박 시료들을 HPLC, LC/MS, LC/MS/MS를 사용하여 동시 정량 및 정성 표준분석법을 개발하였고, 분석법에 대한 validation을 입증하였다. 그리고 시중에 유통되고 있는 오미자와 후박 시료들에 대하여 정성 및 정량분석을 수행하여 개발된 방법의 실효성을 입증하였다.
후박 및 오미자 추출물과 이들로부터 분리한 3-5종의 화합물을 대상으로 먼저 세포독성을 평가하고, glutamate에 의해서 손상된 신경세포의 보호효과 및 쥐에서 분리한 간세포의 보호 효과 등을 확인하였다. 세포내 독성작용을 분석한 결과, 오미자 유래물질은 일반적으로 세포독성이 매우 경미한 것으로 나타났으나, 후박유래물질들은 항암효과가 나타났다. 신경 세포주 HT22에 오미자 및 후박 유래물질(50 ${\mu}M$ 및 50 ${\mu}g/ml$)을 1시간 전처리하고, glutamate (5 mM)를 가하여 9시간 동안 배양한 다음, glutamate 독성에 의한 신경세포의 형태변화 및 회복정도를 현미경으로 관찰하였고, Gomisin N, Schisandrin A, Schisandrol B, honokiol, magnolol, obovatol 등은 glutamate에 의한 신경 독성으로부터 보호효과가 있는 것으로 나타났으며, Primary rat hepatocytes에 오미자 유래물질 (50 ${\mu}g/ml$ 및 이하 농도)을 5분간 전처리하고, tBH(1.5 mM)를 가하여 1시간 동안 배양한 다음, 배양액에 방출된 LDH(lactate dehydrogenase)를 측정하였다. Gomisin C, Gomisin N, Schisandrin A, Schisandrol A는 tBH에 의한 간세포 손상으로부터 보호효과가 있는 것으로 나타나 간세포를 대상으로 한 유전체 발현분석 결과, 간세포 보호효과가 우수한 단일물질 중의 하나인 Schisandrin A에서 가장 많은 발현 조절이 확인 (2 배 기준, induction: 273; reduction: 440, 총 713 유전자) 되었으며, 간세포 손상을 유도하는 tBH를 처리한 군보다 처리하지 않은 군이 더 많은 조절 작용이 있는 것으로 나타났다 오미자 유래물질은 세포내 현상 가운데 1) amine, amino acid, steroid, sterol, cholesterol, lipid의 metabolism 및 biosynthesis, 2) enzyme 및 protease inhibitor activity, 3) immune 및 defense response 등의 작용에 관여한 것으로 나타났고, 신경세포보호 활성물질들은 apoptosis, cell cycle, nucleotide metabolism, transport steroid metabolism에 관련된 유전자들의 발현을 조절함을 확인하였다.
Abstract
▼
The fourteen compounds, gomisin J, gomisin N, gomisin B, wuweizisu C, wuweizisu B, schizantherin C, gomisin C, gomisin G, schisandrin A, schisandrin C, schisandrol A, schisandrol B, schizandrin, and gomisin A, were isolated and identified from the hexane fraction of the fruits of Schizandra chinensi
The fourteen compounds, gomisin J, gomisin N, gomisin B, wuweizisu C, wuweizisu B, schizantherin C, gomisin C, gomisin G, schisandrin A, schisandrin C, schisandrol A, schisandrol B, schizandrin, and gomisin A, were isolated and identified from the hexane fraction of the fruits of Schizandra chinensis and the eleven compounds, 4-methoxyhonokiol, magnolol, honokiol, obovatol, syringin, magnolignan C, $\beta$-sitosterol, daucosterol, $\beta$-eudesmol, eudeshonokiol B, and magnoflorine, were isolated and identified from the hexane and ethyl acetate fractions of the stem bark of Magnolia obovata.
The standard analytical methods for lignans derived from Schisandra chinensis, and Magnolia obovata using HPLC, LC/MS, LC/MS/MS were developed. Validation of lignans from Schisandra chienesis and Magnolia obovata were extensively peformed. In addition, qualitative analysis and quantitative analysis of lignans from S. chienesis and M. obovata, were peformed for commercial specimens of folk medicine.
The aim of this work was to investigate the bioactive effect of lignan components isolated from Schisandra fruit (Schisandra chinenis) and Magnolia bark (Magnolia obovata) using gene expression profiles. The lignans and extract from the herbal medicines had mildly effect on growth inhibition and cytotoxicity, as measured by cell proliferation assay in several cultured cells including human RPMI 8226 myeloma and human colon tumor cells (SW620). However, the protective effects against 1) glutamate-induced neurotoxicity and 2) tBH (tertiary-butyl hydroperoxide)-induced hepatocyte intoxication were revealed by the lignans in the mouse HT22 hippocampal cells and primary rat hepatocytes, respectively. Based on the DNA microarray expression analysis of lignan actions in the 1) RPMI 8226, 2) HFF-1 cells, and 3) primary rat hepatocytes, the greater parts of the regulated genes were related to 1) metabolism and biosynthesis of amino acid and nucleic acid, 2) metabolism and biosynthesis of steroid, sterol, cholesterol, lipid, and alcohol, 3) cell growth and maintenance, 4) protein phosphorylation, and 5) catalytic activity and immune/defense response. These data may lead to a better understanding of the bioactive effect of lignan components, and provides basic information for standardization of herbal medicines.
목차 Contents
- II. 총괄연구개발과제 연구결과...9
- 제 1 장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표...9
- 제 2 장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법...11
- 제 3 장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과...12
- 제 4 장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...15
- 제 5 장 총괄연구개발과제의 연구성과...17
- 제 6 장 기타 중요변경사항...19
- 제 7 장 참고문헌...19
- 제 8 장 첨부서류(별첨)...21
- III. 제 1 세부연구개발과제 연구결과...22
- 제 1 장 제 1 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...23
- 제 2 장 제 1 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...25
- 제 3 장 제 1 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과...49
- 제 4 장 제 1 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...49
- 제 5 장 제 1 세부연구개발과제의 연구성과...50
- 제 6 장 기타 중요변경사항...52
- 제 7 장 참고문헌...52
- 제 8 장 첨부서류(별첨)...53
- III. 제 2 세부연구개발과제 연구결과...54
- 제 1 장 제 2 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...55
- 제 2 장 제 2 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...56
- 제 3 장 제 2 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과...57
- 제 4 장 제 2 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...90
- 제 5 장 제 2 세부연구개발과제의 연구성과...91
- 제 6 장 기타 중요변경사항...92
- 제 7 장 참고문헌...92
- 제 8 장 첨부서류(별첨)...92
- III. 제 3 세부연구개발과제 연구결과...93
- 제 1 장 제 3 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표...94
- 제 2 장 제 3 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법...98
- 제 3 장 제 3 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과...106
- 제 4 장 제 3 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론...132
- 제 5 장 제 3 세부연구개발과제의 연구성과...141
- 제 6 장 기타 중요변경사항...142
- 제 7 장 참고문헌...143
- 제 8 장 첨부서류(별첨)...144
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.