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실시간 중합효소 연쇄반응(Real-time QPCR)을 이용한 하수슬러지 혐기소화 미생물 정량체계 구축
Development of quantification system for anaerobes in anaerobic sludge treatment a using real-time QPCR 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 포항공과대학교 산학협력단
연구책임자 황석환
참여연구자 김자애 , 신승구 , 도효진 , 이창수 , 김영백 , 최정화
보고서유형최종보고서
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월2007-03
과제시작연도 2006
주관부처 환경부
사업 관리 기관 한국환경기술진흥원
등록번호 TRKO200800000139
과제고유번호 1480000794
사업명 차세대핵심환경기술개발
DB 구축일자 2013-04-18
키워드 하수슬러지.실시간 중합효소 연쇄반응.혐기소화.산생성균.메탄생성균.미생물 정성분석.생장역학.municipal sludge.real-time QPCR.anaerobic digestion.acidogen.methanogen.fingerprinting.PCR-DGGE.biokinetics.

초록

[슬러지 혐기소화 QPCR 응용 기술 개발 및 검증]
- 혐기소화 산생성균, 메탄생성균 대상 QPCR primer-probe set 16종 개발
- QPCR 응용 기술 확립(specificity test, 검량곡선 작성, 11종류의 반응기에 적용)
- 산생성균 2종의 최적생장조건 도출
- 아세트산이용 메탄생성균의 저해물질 반응도 산출
- 실험실규모 슬러지 반응기 운전을 통한 슬러지 혐기소화 우점미생물 분석(PCR-DGGE)
- 실험실규모 슬러지 반응기 운전을 통한 population dynamics

Abstract

This research was performed as the following logical procedure.
1. The development of primer-probe sets to detect anaerobic microorganisms specific to 16S rRNA gene or functional genes
2. Population dynamics and biokinetic evaluation of anaerobic microorganisms involved in anaerobic sludge dig

목차 Contents

  • 표지...1
  • 제출문...3
  • 보고서 초록...4
  • 요약문...5
  • SUMMARY...10
  • CONTENTS...15
  • 목차...18
  • 그림목차...21
  • 표목차...25
  • 제1장 연구개발과제의 개요...27
  • 제1절 연구개발의 필요성...27
  • 제2절 연구개발의 목적...33
  • 제3절 연구개발의 범위...37
  • 제4절 문헌조사...37
  • 1. 생물환경과 분자생물학의 접목...38
  • 가. 분자생물학 응용의 필요성...38
  • 나. 16S rRNA gene library 제작을 통한 미생물 군집의 정성분석...39
  • 다. PCR-DGGE 기술을 이용한 미생물 군집의 정성분석...42
  • 라. QPCR을 이용한 미생물 군집의 정량분석...42
  • 2. 혐기소화 각 단계의 주요 미생물...45
  • 가. 산생성단계...45
  • 나. 메탄생성단계...49
  • 제2장 국내외기술개발 현황...51
  • 제1절 국외의 기술개발 현황...51
  • 제2절 국내의 기술개발 현황...52
  • 제3절 국내.외 유사기술과의 차별성...53
  • 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...55
  • 제1절 QPCR을 이용한 혐기소화 미생물 정량법 개발...55
  • 1. 메탄생성균...55
  • 가. 메탄생성균의 primer-probe set 제작...55
  • 나. 표준균주 DNA의 확보...59
  • 다. Specificity 평가...59
  • 라. QPCR 응용조건의 최적화 및 검량곡선 작성...69
  • 2. 산생성균 및 functional gene...69
  • 가. 산생성균의 primer-probe set 제작...69
  • 나. 표준균주 DNA의 확보...75
  • 다. Specificity 평가...76
  • 라. QPCR 응용조건의 최적화 및 검량곡선 작성...79
  • 제2절 여러 가지 유기성 기질을 이용한 반응기에서 QPCR 응용 연구...86
  • 1. 개요...86
  • 2. 산생성균 연구를 위한 3가지 회분식 반응기...87
  • 가. Glucose 기질의 회분식 반응기...87
  • 나. Whey permeate 기질의 회분식 반응기...89
  • 다. Sludge fluid 기질의 회분식 반응기...96
  • 라. PCR-DGGE 기술을 통한 산생성균 군집의 정성분석...101
  • 3. 메탄생성균 QPCR 기술 적용을 위한 7가지 혐기 반응기...111
  • 가. 3가지 서로 다른 기질의 회분식 반응기...111
  • 나. 4가지 서로 다른 기질의 연속식 반응기...114
  • 제3절 산생성균 단배양 최적화 및 메탄생성균 저해물질 반응도 연구...131
  • 1. 개요...131
  • 2. 산생성균 단배양 최적화 연구...131
  • 가. Bioscreen-C를 이용한 산생성균의 단배양...131
  • 나. RSA를 이용한 단배양 최적화...133
  • 3. 메탄생성균 저해물질 반응도 연구...142
  • 가. 아세트산 이용 메탄생성균의 주요 저해물질 선정...142
  • 나. RSA를 이용한 저해물질 반응도 연구...145
  • 제4절 슬러지 기질을 이용한 반응기에서 QPCR 응용 연구...150
  • 1. 개요...150
  • 2. 슬러지 회분식 반응기의 운전 결과...155
  • 가. 반응기 운전 및 공정 parameters...155
  • 나. PCR-DGGE를 이용한 혐기미생물 군집의 정성분석...161
  • 다. QPCR을 응용한 population dynamics...174
  • 라. Biokinetic study...179
  • 3. 슬러지 연속식 반응기의 운전 결과...184
  • 가. 4가지 서로 다른 HRT 운전 결과...184
  • 나. QPCR을 응용한 population dynamics...190
  • 다. Biokinetic study...196
  • 제5절 실규모 슬러지 혐기소화조에서 QPCR 응용 연구...200
  • 1. 개요...200
  • 2. 실규모 혐기소화조 월별 모니터링...200
  • 가. 월별 모니터링...200
  • 나. Environmental DNA의 확보...202
  • 3. 실규모 혐기소화조 혐기미생물의 정성분석...202
  • 가. 산생성균의 16S rRNA gene library 제작...202
  • 나. 메탄생성균의 16S rRNA gene library 제작...213
  • 다. PCR-DGGE를 이용한 메탄생성균 군집의 정성분석...214
  • 4. QPCR을 응용한 실규모 혐기소화조 혐기미생물의 정량분석...221
  • 5. 공정 parameter와 미생물 군집 구조의 다변량 통계 분석...224
  • 가. 다변량 통계 분석법(CCA)...224
  • 나. 실규모 혐기소화조의 다변량 통계 분석...225
  • 다. 결론...228
  • 제6절 슬러지 혐기소화조 운전조건 guideline 제시...229
  • 제4장 목표 달성도 및 관련분야에의 기여도...231
  • 제1절 목표 달성도...231
  • 제2절 관련분야에의 기여도...234
  • 제5장 연구개발결과의 활용계획...235
  • 제1절 추가연구의 필요성...235
  • 제2절 연구개발 성과의 사업화 가능성...235
  • 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...237
  • 제7장 참고문헌...239

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참고문헌 (25)

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