초록 ▼

배큘로 바이러스 발현 시스템과 곤충 세포 대량 배양 공정을 개발, 이용하여 영유아의 주요 설사병 유발 원인인 로타바이러스에 대한 백신을 개발하고자 하였다. 불활화 백신과 약독화 백신의 단점을 보완하고자 로타바이러스를 구성하는 VP2, VP6,VP7 유전자를 재조합 배큘로스바이러스에 도입, 동시에 곤충 세포에서 발현하여 바이러스 양입자를 생산하고 이를 정제하였다. 곤충세포의 배양은 T flask 와 spinner flask의 소형 배양방법과 bioreactor를 이용하여 5L,10L, 50L의 배양법을 확립하고 바이러스 양입자 발현

배큘로 바이러스 발현 시스템과 곤충 세포 대량 배양 공정을 개발, 이용하여 영유아의 주요 설사병 유발 원인인 로타바이러스에 대한 백신을 개발하고자 하였다. 불활화 백신과 약독화 백신의 단점을 보완하고자 로타바이러스를 구성하는 VP2, VP6,VP7 유전자를 재조합 배큘로스바이러스에 도입, 동시에 곤충 세포에서 발현하여 바이러스 양입자를 생산하고 이를 정제하였다. 곤충세포의 배양은 T flask 와 spinner flask의 소형 배양방법과 bioreactor를 이용하여 5L,10L, 50L의 배양법을 확립하고 바이러스 양입자 발현 조건을 최적화 하였다. 생산에 사용되는 곤충세포인 Sf9 Cell과 4 종류의 재조합 배큘로스바이러스는 GMP 기준을 준수하여 제조되었으며 이는 qualification 되었다. 정제 공정은 원심법과 이온교환수지법, 침전법이 사용되었으며 이를 쥐에 면역하여 면역원성을 확인하였다. 전임상 실시를 위하여 국외 허가등록을 목표로 전임상 컨설팅을 수행하였고 이를 바탕으로 전임상 실시 준비 중이다. 또한 국내의 로타바이러스에 의한 영유아 설사병의 발생과 그 혈청형을 조사하여 국내 실정에 맞는 백신을 제조하고자 1992-2000년까지 임상시료로부터 로타바이러스를 분리 검사하였고 이를 통하여 확립된 검사법을 향 후 임상 시험에 응용하고자 하였다. 또한 국내에서 전임상과 임상, 그리고 국내 로타바이러스의 분포를 저렴하고 손쉽게 조사하고자 로타바이러스 항원 진단 시약을 개발하여 그 유용성을 입증하엿다. 백신의 동물 실험을 위하여 모델 시스템을 확립하여 마우스에서의 분변 및 혈청 분석법을 확립하였으며 이를 인간의 혈청과 분변에도 적용할 수 있음을 확인하였다.

Abstract ▼

The subject of this project is to produce preclinical sample based in the effectively developed production system, and initiate preclinical test. Animal test model and basic test method used for clinical trial shoule be developed. Animal model system should be developed to use in preclinical and cli

The subject of this project is to produce preclinical sample based in the effectively developed production system, and initiate preclinical test. Animal test model and basic test method used for clinical trial shoule be developed. Animal model system should be developed to use in preclinical and clicical trail and surveillance of rotavirus desease distribution and its serotype in Korea that will be used for base of vaccine development.

목차 Contents

• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 10
• 제1절 연구개발의 배경 및 필요성 ... 11
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 13
• 제1절 국외 연구 개발현황 ... 14
• 제2절 국내 연구 개발현황 ... 17
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 19
• 제1절 연구추진 전략 및 방법 ... 20
• 제2절 연구 내용 및 성과 ... 24
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 36
• 제1절 연구목표 달성도 ... 37
• 제2절 연구내용 및 결과의 기여도 ... 38
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 39
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 42
• 제7장 참고문헌 ... 48