초록 ▼

병원성세균인 Vibrio vulnificus의 독성생성인자 (세포분해 독성인자 및 숙주유도 독성인자)와 독성생성조절자 (정족수인식기작 조절인자)를 포괄적으로 동정하고 그 특성을 규명하여, 독성생성을 최소화하는 방안을 제시함.
- 독성생성인자와 독성생성조절자의 유전자의 탐색 및 동정
- 독성생성인자 및 독성생성조절자의 특성 규명
- 해당 인자 코딩 유전자의 발현 조절 기작 규명 및 조절체계 확립
가. V. vulnificus의 독성생성 인자
A. 세포분해 독성인자 및 숙주유도 독성인자의 탐색 및 동정: Hu

병원성세균인 Vibrio vulnificus의 독성생성인자 (세포분해 독성인자 및 숙주유도 독성인자)와 독성생성조절자 (정족수인식기작 조절인자)를 포괄적으로 동정하고 그 특성을 규명하여, 독성생성을 최소화하는 방안을 제시함.
- 독성생성인자와 독성생성조절자의 유전자의 탐색 및 동정
- 독성생성인자 및 독성생성조절자의 특성 규명
- 해당 인자 코딩 유전자의 발현 조절 기작 규명 및 조절체계 확립
가. V. vulnificus의 독성생성 인자
A. 세포분해 독성인자 및 숙주유도 독성인자의 탐색 및 동정: HupA
B. hupA 유전자 full gene의 cloning
C. HupA의 in vitro 특성 분석
E. hupA 유전자 발현 분석
F. hupA mutant의 cytolytic toxicity 분석
G. HupA의 in vivo virulence 특성 분석
나. V. vulnificus의 독성생성 조절인자
A. 정족수인식기작 관련 독성생성 조절인자 탐색 및 동정: LuxT
B. luxT knockout mutant 건조
C. luxT 유전자의 발현의 특징 규명
D. luxT knockout mutant의 특징 규명
E. LuxT 조절자의 조절기작 규명
F. 독성생성과 조절인자의 관계 확립
본 연구로부터 동정된 다양한 독성인자들 중, 숙주의 heme으로부터 iron을 uptake하는데 필수적인 heme uptake protein인 HupA가 in vitro와 in vivo에서 모두 중요한 독성인자이며 V. vulnificus의 감염기전에 있어서 중요함을 규명. V. vulnificus의 elastase 발현조절은 quorum sensing 조절체계의 상위조절자인 LuxO를 시작으로 하여 LuxT를 거쳐 SmcR이 조절되는 cascade pathway를 통해 이루어짐을 규명함. 따라서 본 연구에서 얻은 독성인자 및 조절자의 발현 및 특징에 대한 지식은 V.vulnificus의 독성을 효과적으로 제어할 수 있는 기초를 마련함.

Abstract ▼

The aim of this research is to identify and characterize the genes at the genome-scale levels, which are involved in biosynthesis of food-poisoning factors, in order to suggest novel control practices against toxins in foods.
- Identification of genes encoding toxins and their regulators at genom

The aim of this research is to identify and characterize the genes at the genome-scale levels, which are involved in biosynthesis of food-poisoning factors, in order to suggest novel control practices against toxins in foods.
- Identification of genes encoding toxins and their regulators at genome-scale levels
- Cloning of the genes and characterization of their gene products
- Establishment of the regulatory mechanisms for toxin expressions by specific regulators
- Characterization of the effects of toxins and global regulators on survival and virulence
I. Virulence factor of V. vulnificus
A. Screening and identification of virulence factors (cytotoxic factors and host-inducing toxins): 'HupA'
B. Cloning of the hupA gene
C. in vitro characterization of HupA
E. Analysis of hupA gene expression
F. Construction of hupA mutant and estimation of its cytotoxicity
G. in vivo characterization of virulence by HupA
II. Regulator for the virulence factor of V. vulnificus
A. Screening and identification of quorum-sensing regulator for virulence factor: 'LuxT'
B. Construction of luxT mutant
C. Regulatory characteristics of luxT gene expression
D. Characterization of luxT knockout mutant in quorum-sensing regulation
E. Identification of regulatory mechanism of LuxT
F. Establishment of quorum-sensing regulatory cascade in expression of V.vulnificus virulence factor
This research would point out important new areas for bacteriology concerning food-poisoning microorganisms.
- Provision of valuable informations for biosyntheses of toxins and their regulatory hierachy
- Control practices of toxin syntheses
i) Development of processes for maximizing food safety
ii) Development of agents for minimizing toxin contamination
- Establishment of V. vulnificus system as a model for studying food-poisoning bacteria

목차 Contents

• Ⅰ. 연구계획 요약문...3
• 1. 국문요약문...3
• Ⅱ. 연구결과 요약문...4
• 1. 국문요약문...4
• 2. 영문요약문...5
• Ⅲ. 연구내용...6
• 1. 서론...6
• 2. 연구방법 및 이론...12
• 3. 결과 및 고찰...19
• 4. 결론...50
• 5. 인용문헌...52