초록 ▼

O 단백질아세틸화조절에의해 조절되는 전사조절인자 분석
단백질 탈아세틸화효소 저해제(Apicidin, trichostatin A 등) 처치 후 전사조절 인자에 특이적인 결합부위을 가진 repoerter gene (p53-Luc, Ap1-Luc, NF-$\kappa$B-Luc, Sp1-Luc 등)을 이용하여 전사조절인자의 활성도을 분석함.
O 전사조절인자의 DNA 결합력 분석
단백질 탈아세틸화효소 저해제 처치 후 활성화된 전사조절인자의 DNA 결합력을 EMSA 또는 DNA pull-down을 이용

O 단백질아세틸화조절에의해 조절되는 전사조절인자 분석
단백질 탈아세틸화효소 저해제(Apicidin, trichostatin A 등) 처치 후 전사조절 인자에 특이적인 결합부위을 가진 repoerter gene (p53-Luc, Ap1-Luc, NF-$\kappa$B-Luc, Sp1-Luc 등)을 이용하여 전사조절인자의 활성도을 분석함.
O 전사조절인자의 DNA 결합력 분석
단백질 탈아세틸화효소 저해제 처치 후 활성화된 전사조절인자의 DNA 결합력을 EMSA 또는 DNA pull-down을 이용하여 분석.
O 내인성유전자 발현 측정
전사조절인자에 의존적인 내인성유전자의 발현 측정 (immunoblot, RT-PCR)
O Chromatin Remodeling 분석
히스톤아세틸화에 의한 chromatin remodeling 에 관한 연구를 Chromatin Immunoprecipitation 법을 이용하여 분석함.
O Promoter부위에 전사조절인자의 결합정도를 chromatin immunoprecipitation 법을 응용하여 분석함.
O 신호전달체계 연구
단백질 탈아세틸화효소 저해제(Apicidin, trichostatin A 등) 처치 후 활성화되는 신호전달분자 (protein kinase 등) 등을 특이적 저해제 또는 dominant negative expression plasmids을 이용하여 연구함.
-> 단백질아세틸화조절에의해 활성화되는 전사조절인자의 규명 및 활성화기전 연구를 통하여 유전자의 발현조절기작을 규명하고 생명현상에서의 단백질아세틸화의 역할을 규명함.

Abstract ▼

O Identification of transcription factors regulated by protein acetylation
- analysing the transcriptional activities of reporter genes harboring the binding sites for various transcription factors (NF-kB, Ap1, Sp1, p53 etc) after induction of protein acetylation by inhibiting histone deacetylas

O Identification of transcription factors regulated by protein acetylation
- analysing the transcriptional activities of reporter genes harboring the binding sites for various transcription factors (NF-kB, Ap1, Sp1, p53 etc) after induction of protein acetylation by inhibiting histone deacetylase activities using HDAC inhibitors (apicidin, trichostatin A etc).
O Measurement of DNA binding activities
- analysing the DNA binding activities of transcription factors activated by protein acetylation using EMSA or DNA pull-down assay.
O Measurement of endogenous gene expression
- Measurement of endogenous gene expression induced by transcription factors activated by protein acetylation using immunoblot and RT-PCR.
O Analysis of Chromatin Remodeling
- Analysing the chromatin remodeling by histone hyperacetylation using chromatin immunoprecipitation.
O Analysis of the binding of transcription factors to specific promoter region using chromatin immunoprecipitation.
O Signal Transduction
- elucidating the signaling molecules mediated by protein acetylation using specific pharmacological inhibitors or dominant negative expression plasmids for varoius protein kinases.

-> To elucidate the role of protein acetylation in transcriptional regulation through identifying transcription factors regulated by protein acetylation and clarifying their activation mechanism

목차 Contents

• I. 연구계획 요약문 ... 3
• 1. 국문요약문 ... 3
• II. 연구결과 요약문 ... 4
• 1. 국문요약문 ... 4
• 2. 영문요약문 ... 5
• III. 연구내용 ... 6
• 1. 서론 ... 6
• 2. 연구방법 및 이론 ... 12
• 3. 결과 및 고찰 ... 16
• 4. 결론 ... 49
• 5. 인용문헌 ... 50