초록 ▼

실험동물에서 병원성 세균을 분리 동정하기 위해서는 비용이 많이 들고 최소한 일주일의 시간이 소요되므로, 국내 실험동물 생산기관 및 동물실험 수행기관이 신속하게 미생물 검사를 수행하기 어려운 실정에 있다. 이에 따라 실험동물의 배설물 또는 장기로부터 특정 병원성 세균의 감염여부를 저비용으로 간편하고 신속하게 검사하는 진단기술을 개발할 필요가있다. 이를 위해 실험동물의 병원성 미생물 진단에서 PCR을 활용한 미생물 검사 기술관련 국내외 현황을 조사하고, 10종의 병원성 미생물 신속검사를 위한 후보 염기서열을 선정한 후 PCR 조건을

실험동물에서 병원성 세균을 분리 동정하기 위해서는 비용이 많이 들고 최소한 일주일의 시간이 소요되므로, 국내 실험동물 생산기관 및 동물실험 수행기관이 신속하게 미생물 검사를 수행하기 어려운 실정에 있다. 이에 따라 실험동물의 배설물 또는 장기로부터 특정 병원성 세균의 감염여부를 저비용으로 간편하고 신속하게 검사하는 진단기술을 개발할 필요가있다. 이를 위해 실험동물의 병원성 미생물 진단에서 PCR을 활용한 미생물 검사 기술관련 국내외 현황을 조사하고, 10종의 병원성 미생물 신속검사를 위한 후보 염기서열을 선정한 후 PCR 조건을 최적화한다. 최적화한 PCR 조건의 정확성을 양성 대조군과 실제 감염된 동물에서 비교하여 검증한다.
본 연구 결과 마우스와 랫드에서 병원성을 나태내는 10종(Helicobacter hepaticus, Salmonella typhimurium, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Mycoplasma pulmonis, CAR bacillus, Klebsilla pneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Pasteurella aeruginosa, Corynebacterium kutscheri)의 세균을 간편하고 신속하게 검사할 수 있는 PCR 방법과 multiplex-PCR방법을 확립하였다. 인위적으로 감염시킨 마우스와 병원체가 자연 감염된 마우스를 대상으로 확립된 PCR방법과 multiplex-PCR 방법의 정확성을 검증한 결과 동물의 장기와 분변에서 감염된 세균을 동정할 수 있었다. 확립된 기술을 실험동물 생산판매기관 및 사용기관의 연구자들에게 3번의 워크숍을 통해 전수하여 신속하게 병원성 세균을 동정할 수 있게 기여하였다.

Abstract ▼

The accurate and economical diagnosis of pathogenic bacteria is necessary for microbiological control of laboratory animals. To fulfill the aims we examined bacterial detection methods used in several diagnostic laboratories and searched specific primer sequences of ten bacteria (CAR bacillus, Coryn

The accurate and economical diagnosis of pathogenic bacteria is necessary for microbiological control of laboratory animals. To fulfill the aims we examined bacterial detection methods used in several diagnostic laboratories and searched specific primer sequences of ten bacteria (CAR bacillus, Corynebacterium kutscheri, klebsilla pneumoniae, Mycoplasma pulmonis, Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, Streptococcus pneumoniae, Helicobacter hepaticus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhimurium) using Pubmed. The target nucleic acid fragments were specifically amplified by consensus PCR analysis with 16S ribosomal RNA or complete genome or specific gene of each bacterium. In this study, polymerase chain reaction (PCR) methods were developed for direct detection of ten bacteria in rodents using bacterial colonies, and tissues of experimentally and naturally infected mice. And multiplex PCR method was developed for simultaneous detection of three common gastroenteric bacteria in rodent. This present PCR and multiplex PCR assays are useful and convenient methods for the rapid identification f bacterial pathogens m laboratory animal. And our methods will be used to radiate pathogenic bacterial infection in laboratory animal facilities and for quality control of laboratory animals.

목차 Contents

• 용역연구개발과제 최종보고서...1
• 표지...3
• 제출문...5
• 목차...6
• I. 총괄연구개발과제 요약문...8
• 국문 요약문...8
• Summary...10
• II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...12
• 제1장 총괄연구개발과제의 목적 및 필요성 ...12
• 제2장 총괄연구개발과제의 내용 및 방법 ...18
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종결과 및 고찰 ...21
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구성과 ...56
• 제5장 총괄주요연구 변경사항...58
• 제6장 총괄참고문헌 ...59
• 제7장 총괄첨부서류 ...60