초록 ▼

본 연구과제는 미성숙 난포 체외배양 원천기술을 이용한 배아줄기세포 확립을 목표로, 총 3차년도
에 걸쳐 관련 연구를 수행함.
1차년도
목표 : 미성숙 난포 체외배양 시스템 및 동결보존기술 개발, 배아줄기세포 확보기술 개발을 목표
로 함.
주요연구결과
- 미성숙 난포 최적 분리법 개발, 체외 배양 기술 확보와 함께 단성생식 및 배아발생 시스템 개발
을 통한 미성숙 난포유래 배아줄기세포 확립에 성공함. (1개 배아줄기세포주 확립)
2차년도
목표 : 원시난포 체외배양시스템 개발, 동결 미성

본 연구과제는 미성숙 난포 체외배양 원천기술을 이용한 배아줄기세포 확립을 목표로, 총 3차년도
에 걸쳐 관련 연구를 수행함.
1차년도
목표 : 미성숙 난포 체외배양 시스템 및 동결보존기술 개발, 배아줄기세포 확보기술 개발을 목표
로 함.
주요연구결과
- 미성숙 난포 최적 분리법 개발, 체외 배양 기술 확보와 함께 단성생식 및 배아발생 시스템 개발
을 통한 미성숙 난포유래 배아줄기세포 확립에 성공함. (1개 배아줄기세포주 확립)
2차년도
목표 : 원시난포 체외배양시스템 개발, 동결 미성숙난포 유래 난자의 체세포핵이식 및 배아줄기세
포 기술 개발을 목표로 함.
주요연구결과
- 원시난포 분리 및 일차 난포 체외배양 시스템을 개발하고 (난자 성숙률: 30%, 배반포 형성률:
10%), 동결 미성숙 난포로부터 성숙난자 확보에 성공함 (54%).
- 미성숙 난포유래 배아줄기세포 확립의 효율 증진을 위한 추가 연구를 토해 총 11개주의 미성숙
난포 유래 배아줄기세포 확립에 성공함.
3차년도
목표 : 미성숙 난포유래 난자를 이용한 면역 특이적 배아줄기세포 확립 기반 조성을 목표로 함.
주요연구결과
- 1차 난포의 성숙 및 발생 효율을 증진시킴 (난자 성숙률: 59%, 배반포 형성률: 45%).
- 미성숙 난포 유래 배아줄기세포의 단독세포 배양시스템으로부터 단독세포 유래 8개 배아줄기세
포주를 확립함.
- 추가성과로서 역분화기술을 이용한 면역특이적 배아줄기세포 개발 기반을 구축함.
2단계 연구를 통해, SCI 논문 총 12편 게재, 국제특허출원 2건 및 13회 국내/외 학술 발표의 업적
을 달성하였으며, 본 연구과제에서 개발된 미성숙 난포유래 단성생식 배아줄기세포는 면역특이적
전능성 세포의 기존 한계를 극복할 수 있는 모델로서, 임상활용 및 기술이전/국제공동연구를 위한
기반을 제공함.

Abstract ▼

This study was proposed to develop a novel biotechnology for establishing embryonic stem (ES) cells by in vitro culture of mouse preantral follicles, which would contribute to developing a basic technology for immune-specific cell replacement therapy. This study consisted of three parts of research

This study was proposed to develop a novel biotechnology for establishing embryonic stem (ES) cells by in vitro culture of mouse preantral follicles, which would contribute to developing a basic technology for immune-specific cell replacement therapy. This study consisted of three parts of research and first series of study was conducted to develop a technique for effective retrieval and optimized culture condition of preantral follicles. In next series of study, preantral follicle-derived mature oocytes were activated to form the parthenogenetic blastocysts, from which ES cells were established. The established ES cells were subsequently characterized with various markers. In final set of study, we conducted large-scale gene expression analysis using microarray for overcoming low efficiency to establish ES cells derived from preantral follicles. Total 11 preantral follicle-derived parthenogenetic ES cell lines were established and all exhibited typical characteristics as ES cells, which included positive response for ES cell-specific markers, and differentiation in vitro and in vivo. Total 12 papers have been either published or accepted in the SCI journal and 13 abstracts have been introduced in international and domestic conferences. All of this research outcomes have highly original and exceed the original aim of this proposal. All cell lines established in this study are autologous and immune-specific pluripotent stem cells for hosts and this concept can be applied to human cell replacement therapy in future.

목차 Contents

• 제출문...1
• 보고서 초록...2
• 요약문...3
• SUMMARY...6
• CONTENTS...7
• 목차...8
• 제1장 연구개발과제의 개요...9
• 제1절 연구개발의 목적...9
• 제2절 필요성 및 범위...10
• 제2장 국내외 기술개발 현황...15
• 제1절 국내?외 연구개발 현황...15
• 제2절 당해기관의 연구개발 실적...16
• 제3절 국내?외 기술개발현황에서 차지하는 위치...19
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과...20
• 제1절 미성숙난포 분리 및 최적 배양 조건 확립...20
• 제2절 미성숙난포 유래 난자의 활성화 기술 및 줄기세포 확립 기술 개발...29
• 제3절 미성숙난포 유래 배아줄기세포의 확립 효율 증진...35
• 제4 절 배아줄기세포 단독세포 배양...48
• 제5절 1차 난포의 성숙/발생 및 미성숙난포의 동결 보존...52
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...61
• 제1절 연도별 연구목표 및 평가 착안점...61
• 제2절 평가의 착안점에 따른 목표달성도...62
• 제3절 관련분야에의 기여도...64
• 제5장 연구개발결과의 활용계획...65
• 제1절 추가연구의 필요성...65
• 제2절 타 연구에의 응용...65
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...66
• 제7장 참고문헌...67