초록 ▼

신약개발 분야에서 가장 중요한 타겟인 GPCR과 신경이온채널을 대상으로 ligand-based HTS system 구축 및 검색을 통한 신약개발 후보 리간드 도출과 신경질환에 관련된 신약개발 관련기술을 제공을 최종목표로,
형광 이미징법 리간드 고효율 검색법 구축, Cross-reactivity 검색용 고효율 검색법 구축, GPCR bradykinin 리간드 고효율검색법 구축, Ligand-based HTS system 심화검색으로 6종이상의 chemical scaffolds 검색을 통한 5-HT_{6} Rc 및 Ca^{2+}

신약개발 분야에서 가장 중요한 타겟인 GPCR과 신경이온채널을 대상으로 ligand-based HTS system 구축 및 검색을 통한 신약개발 후보 리간드 도출과 신경질환에 관련된 신약개발 관련기술을 제공을 최종목표로,
형광 이미징법 리간드 고효율 검색법 구축, Cross-reactivity 검색용 고효율 검색법 구축, GPCR bradykinin 리간드 고효율검색법 구축, Ligand-based HTS system 심화검색으로 6종이상의 chemical scaffolds 검색을 통한 5-HT_{6} Rc 및 Ca^{2+} 채널 선택적 리간드도출, 5-HT_{6} Rc 결합단백질 상호결합 및 기능적 상호 신호전달기전 연구, GPR92 리간드의 통증관련 신경세포에서 action mechanism 연구하여
주요연구결과로 최적화 연구를 통한 모든 GPCR 검색 가능 ligand-based HTS system 구축 및 화합물뿐만 아니라 결합단백질 검색용으로 적용, IC50 1 \mu M 미만의 GPCR (5-HT_{6} Rc) 및 신경이온채널 억제제 확보, 5-HT_{6} Rc 결합 뇌특이적 조절단백질 3 종의 신기능 규명, 고아 PC92 리간드 규명 및 통증관련 DRG 신경세포에서 작용기전 규명했음.

Abstract ▼

The present study was undertakem in order to establish cell-based high-throughput screening (HTS) system for orphan GPCRs (oGPCR) and neurotransmitter GPCRs and finally mine novel GPCR ligands related with human neuronal diseases through this HTS screening approach.
After introducing oGPCR and r

The present study was undertakem in order to establish cell-based high-throughput screening (HTS) system for orphan GPCRs (oGPCR) and neurotransmitter GPCRs and finally mine novel GPCR ligands related with human neuronal diseases through this HTS screening approach.
After introducing oGPCR and reporter genes into adenovirus, we optimized this adenovirus-based cell-based assay system, screened them with tissue extracts, and found a novel ligand for oGPCR92.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...3
• 보고서초록...4
• 요약...5
• Summary...9
• contents...13
• 목차...14
• 제1장 서론: 연구개발과제의 개요 ...15
• 제1절 기술적 측면 ...15
• 제2절 경제.산업적 측면 ...15
• 제3절 사회.문화적 측면 ...15
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ...17
• 제1절 국내 기술개발 현황 ...17
• 제2철 국외 기술개발 현황 ...17
• 제3장 연구개발 수행내용 및 결과 ...19
• 제1절 실험방법 ...19
• 1. 세포 배양법 및 transfectiona 방법 ...19
• 2. 전기생리학 패치크램프 측정법 ...19
• 3. imaging 분석법을 이용한 세포내 칼슘측정법 ...19
• 4. HTS assay ...20
• 5. Yeast two-hybrid screen ...20
• 6. In vitro GST-Pull down assay ...20
• 7. Western Blotting ...20
• 제2절 실험결과 ...21
• 1. 1차년도 실험결과 ...21
• 2. 2차년도 실험결과 ...22
• 3. 3차년도 실험결과 ...23
• 제4장 목표달성도 및 관련분양에의 기여도 ...26
• 제1절 연차별 연구개발 목표 및 내용 ...26
• 제2절 연구개발목표의 달성도 및 기여도 ...28
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ...30
• 제6장 참고문헌 ...31