자생약용식물인 인삼으로부터 유용유전자원 확보를 위하여 13개의 cDNA library를 제작하였고 이들 중 꽃봉오리, 잎과 배발생 캘러스의 경우에는 full lengthc DNA library를 제작하였고 EST 분석결과 60%이상이 full lengthc DNA인 것이 확인되었다. 인삼으로부터 유용유전자를 대량으로 분석하기 위하여 모상근(3, 000), 천풍(4년근, 4, 000), 14년근(3, 000), 꽃봉오리(3, 000), 잎(3, 000), 배발생 캘러스(embryogenic callus, 3, 400)로부터 2만개의
자생약용식물인 인삼으로부터 유용유전자원 확보를 위하여 13개의 cDNA library를 제작하였고 이들 중 꽃봉오리, 잎과 배발생 캘러스의 경우에는 full lengthc DNA library를 제작하였고 EST 분석결과 60%이상이 full lengthc DNA인 것이 확인되었다. 인삼으로부터 유용유전자를 대량으로 분석하기 위하여 모상근(3, 000), 천풍(4년근, 4, 000), 14년근(3, 000), 꽃봉오리(3, 000), 잎(3, 000), 배발생 캘러스(embryogenic callus, 3, 400)로부터 2만개의 EST 분석이 실시되었다. 염기서열이 분석된 EST clone들은 사업단의 지원하에 분석이 진행되어 되어 database(http: //www. pdrc. re. kr/ new_korea/ genepool / DC/ i ndex. ht ml )로 구축이 되었다. EST clone중에서 단백질의 온전한 유전정보를 포함하고 있는 full length EST clone을 110개 선발하여 full sequencing을 하여 data base (http:// www.ibiopia.com/ zboard/ bbs/ zboard. php?i d=f ul l _l engt h)와 i soprenoid pathway 관련 유전자의 data base(http://www. i biopia. com/ zboard/ bbs/ zboard. php?i d=I soprenoi d _Pat hway)를 구축하였고 모상근 EST 중에서 parent alclone 1, 000개를 선발하여 cDNA chip을 제작하였다. 인삼의 게놈 BAC library(106, 368개의 clone을 확보)가 확보되었고 BAC clone 3, 000개에 대한 BAC-end sequenci ng이 분석되어 현재 data base가 구축되어 있으며 BAC clone을 이용한 physical mapping이 수행되어 졌다. 유용유전자를 이용한 고기능성 인삼형질전환체의 개발을 위하여 우선적으로 재분화가 극히 어려운 인삼의 고빈도 형질전환시스템이 개발되었고 형질전환체의 토양순화 시스템 개발완료하여 재분화 인삼의 성공적인 토양순화가 진행 중에 있다. 또한 인삼의 EST 분석을 통하여 확보된 유용유전자(SOD, squalene synthase 등)를 인삼에 재도입하여 형질전환식물체를 만들었고 사포닌 생합성의 key enzyme인 squalene synthase의 경우에는 형질전환체로부터 부정근을 유도하여 사포닌 합성의 변화여부를 검토한 결과 정상식물체로부터 유도된 부정근 보다 약 25%정도의 사포닌 함량이 증가된 것을 확인하였다.
Abstract▼
1. Confirmation of ginseng EST and DB Construction of the ten cDNA libraries with the varioustissues, species and treatments. 20, 000 EST analysis toisolate the useful genes of ginseng Establishment of EST data base, full length cDNA DB and I soprenoid pathway-related gene DB Constructio
1. Confirmation of ginseng EST and DB Construction of the ten cDNA libraries with the varioustissues, species and treatments. 20, 000 EST analysis toisolate the useful genes of ginseng Establishment of EST data base, full length cDNA DB and I soprenoid pathway-related gene DB Construction of EST cDNA chip from ginseng Screening of useful genes and vector construction Transformation into tobacco and expressional alysis 2. Construction of BAC library of ginseng Construction of BAC library from ginseng, Chunpoong BAC-end sequencing and Construction of Database BAC cl one physical mapping 3. Development of the high-functional ginseng transformant Set up the optimal re-differentiation condition of ginseng Production of more than 6 ginseng transformants Examination of soilacclimatization system
목차 Contents
제출문...1
보고서 초록...2
요약문...3
SUMMARY...6
CONTENTS...8
목차...9
제1장 연구개발과제의 개요...10
제1절 연구개발의 목적...10
제2절 연구개발의 필요성...10
제3절 연구개발의 범위...11
1. 인삼 EST의 대량발굴 및 D/ B화...11
2. 인삼의 BAC library 작성...11
3. 유용유전자를 이용한 고기능성 인삼형질전환체개발...11
제2장 국내?외 기술개발 현황...12
제3장 연구개발수행 내용 및 결과...13
제1절 인삼 EST의 대량발굴 및 Data base 구축...13
1. 인삼 cDNA library 제작...13
2. EST 대량분석...13
3. 인삼 EST의 D/ B화...19
4. 인삼 cDNA 유전자의 Full length sequencing 및 data base 구축...20
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