초록 ▼

본 연구의 최종목표는 암억제유전자인 LATS kinase의 새로운 기능을 규명하고 LATS kinase를 중심으로 하는 단백질 네트워크를 발굴하여 그 신호전달체계를 규명하고자 함에 있다. LATS kinase의 기능 연구를 위하여 C. elegans 모델에서의 LATS kinase의 시공간적 발현 양상 분석, RNAi 및 돌연변이의 표현형질 분석을 하였다. 이를 통하여 LATS kinase의 분자적 작용점 규명 및 암억제 모델과 세포막 작용 모델을 확립하였다. 또한 LATS kinase 단백질 네트워크 규명 연구를 위하여 LATS

본 연구의 최종목표는 암억제유전자인 LATS kinase의 새로운 기능을 규명하고 LATS kinase를 중심으로 하는 단백질 네트워크를 발굴하여 그 신호전달체계를 규명하고자 함에 있다. LATS kinase의 기능 연구를 위하여 C. elegans 모델에서의 LATS kinase의 시공간적 발현 양상 분석, RNAi 및 돌연변이의 표현형질 분석을 하였다. 이를 통하여 LATS kinase의 분자적 작용점 규명 및 암억제 모델과 세포막 작용 모델을 확립하였다. 또한 LATS kinase 단백질 네트워크 규명 연구를 위하여 LATS kinase와 결합하는 단백질 및 유전자를 규명하고자 하였으며 이들간의 생화학적 확인 실험을 하였다. 또한 검증된 candidate에 대한 human homolog 탐색을 하였다. 이를 통하여 LATS kinase와 그 결합 단백질간의 기능적 연관성 규명 및 신호전달회로를 규명하였다.

Abstract ▼

- To elucidate new molecular and cellular functions of LATS kinase by using the mammalian cells and a model organism C. elegans
- Examination of C. elegans LATS kinase in time and space
- Examination of phenotypes of LATS kinase RNAi
- Characterization of C. elegans LATS kinase mutant
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- To elucidate new molecular and cellular functions of LATS kinase by using the mammalian cells and a model organism C. elegans
- Examination of C. elegans LATS kinase in time and space
- Examination of phenotypes of LATS kinase RNAi
- Characterization of C. elegans LATS kinase mutant
- Elucidation of the action focus of LATS kinase in C. elegans
- Identification of proteins that interact with LATS kinase
- Establishment of a tumor model using the LATS kinase system

목차 Contents

• 제출서 ...1
• 목차 ...2
• I. 연구계획 요약문 ...3
• 1. 국문요약문 ...3
• II. 연구결과 요약문 ...4
• 1. 국문요약문 ...4
• 2. 영문요약문 ...5
• III. 연구내용 및 결과 ...6
• 1. 연구개발과제의개요 ...6
• 가. 연구개발의 목적 ...6
• 나. 연구개발의 필요성 ...7
• 2. 국내외 기술개발 현황 ...9
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ...10
• 1. C. elegans의 LATS kinase의 시, 공간적 발현 양상 ...10
• 2. C. elegans에서의 LATS kinase의 subcellular localization ...10
• 3. wts-1 mutant 표현형질 분석 ...11
• 4. C. elegans LATS kinase의 cell proliferation 역할에 대한 실험 ...12
• 5. C. elegans LATS kinase의 apoptosis 역할에 대한 실험 ...12
• 6. C. elegans LATS kinase의 cellular polarity 역할에 대한 실험 ...13
• 7. wts-1 mutant 표현형질을 suppression 하는 mutant 찾기 위한 mutagenesis ...14
• 8. wts-1 suppressor로써 yap homolog 발견 ...14
• 9. C. elegans LATS와 결합하는 단백질의 human homolog인 T10H10.3의 발현양상 ...15
• 10. FLAG-hWW45가 발현된 다량의 세포를 이용한 Immunoaffinity Purification ...15
• 11. Mass Spectrometric Analysis를 이용한 hWW45 상호결합 단백질 동정 ...16
• 12. Anti-hWW45 polyclonal antibody 제작 ...16
• 13. hWW45와 hNEDD4 사이의 상호작용 확인 ...17
• 14. hNEDD4에 의한 hWW45의 stability 변화 측정 ...18
• 15. hNEDD4에 의한 hWW45의 half-life 변화 측정 ...19
• 16. in vivo, in vitro ubiquitination assay를 통한 hNEDD4의 생화학적 기능 규명 ...20
• 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ...21
• 5. 연구결과의 활용계획 ...22
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ...23
• 7. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ...24
• 8. 참고문헌 ...25
• 9. 연구성과 ...26
• 10. 기타사항 ...26
• [별첨1] 대표연구성과 ...27