초록 ▼

피부주름 개선에는 콜라겐 (collagen) 뿐만 아니라 탄력섬유인 엘라스틴 (elastin)등도 기여하는 것으로 보고되고 있다. 자외선 조사 후 엘라스타제(elastase)의 활성이 증가하고 이에 따라 피부탄성섬유의 3차원적 뒤틀림이 형성되며 이것이 주름살을 발생시키는 주요 원인으로 생각되어진다. 따라서 본 연구에서는 피부주름 개선 효능평가방법을 연구하기 위하여 우선 엘라스타제의 활성을 측정하였다. 엘라스타제 활성측정을 위해 적절한 효소를 선택하기 위하여 pocine pancreatic elastase, human neutrop

피부주름 개선에는 콜라겐 (collagen) 뿐만 아니라 탄력섬유인 엘라스틴 (elastin)등도 기여하는 것으로 보고되고 있다. 자외선 조사 후 엘라스타제(elastase)의 활성이 증가하고 이에 따라 피부탄성섬유의 3차원적 뒤틀림이 형성되며 이것이 주름살을 발생시키는 주요 원인으로 생각되어진다. 따라서 본 연구에서는 피부주름 개선 효능평가방법을 연구하기 위하여 우선 엘라스타제의 활성을 측정하였다. 엘라스타제 활성측정을 위해 적절한 효소를 선택하기 위하여 pocine pancreatic elastase, human neutrophil elastase 및 normal human fibroblasts, 3T3 mouse fibroblasts, CCD-25sk human fibroblasts를 사용하여 효소의 농도, 기질의 농도 및 배양시간에 따르는 효소의 활성을 비교 평가하였다. 양성대조군으로 사용한 phosphoramidon이 normal human fibroblast elastase와 CCD-25sk fibroblast elastase의 활성을 유의성 있게 억제한 반면에 pocine pancreatic elastase에는 별다른 영향을 미치지 못하였다. 더 나아가 최근 섬유아세포에서 뿐만 아니라 피부 표피의 각질형성세포에서도 엘라스틴이 발현된다는 연구보고에 따라 각질형성 세포에서의 엘라스타제의 효과를 검증하는 것이 필요하였다. 실험결과 HaCaT과 Human keratinocyte elastase에서 모두 phosphoramidon은 엘라스타제의 활성에는 영향을 미치지 못하였다. 따라서 human 유래 fibroblast elastase 만이 엘라스타제 활성측정에 적절하리라 생각된다. 한편, 엘라스틴의 발현에 영향을 미쳐 피부주름을 개선할 수 있는 후보물질의 평가기준을 마련하기 위하여 Western bolt이나 RT-PCR을 실시하였으나, tropoelastin의 발현에 차이로 주름개선 물질을 평가하는 방법은 후보물질의 처리에 따르는 tropoelastin의 수준의 변화가 적은 관계로 인하여 유의성 있는 결과를 도출하기에 어려운 방법으로 사료되었다. 시험에 사용한 여러 가지 후보 물질 중 탄닌산 (tannic acid)는 CCD-25sk fibroblast elastase의 활성을 감소시키는 경향을 보였다. 따라서 탄닌산은 가능성있는 피부주름 개선 물질로 생각된다.

Abstract ▼

It has been reported that not only collagen but also elastin contribute to inhibit skin wrinkle formation. Ultraviolet (UV) radiation increases elastase activity. This induces the changes of three dimensional structure of elastic fiber, leading to skin elasticity reduction and wrinkle formation. In

It has been reported that not only collagen but also elastin contribute to inhibit skin wrinkle formation. Ultraviolet (UV) radiation increases elastase activity. This induces the changes of three dimensional structure of elastic fiber, leading to skin elasticity reduction and wrinkle formation. In the present study, we measured elastase activity to evaluate the improvement of skin wrinkle. To select adaquate enzyme for elastase activity, pocine pancreatic elastase, human neutrophil elastase, normal human fibroblasts, 3T3 mouse fibroblasts, and CCD-25Sk human fibroblasts were used as various enzyme sources. Furthermore, elastase activities were compared according to enzyme concentration, substrate concentration, and incubation time. Phosphoramidon was used as a positive control, and it inhibited normal human fibroblast elastase and CCD-25sk fibroblast elastase activities significantly. However, it had no influence on pocine pancreatic elastase. On the other hand, it was necessary to measure keratinocyte elastase activity, because it is reported that elastin is produced in human keratinocytes. Our results showed that phosphoramidon had no influence on HaCaT and keratinocyte elastase activity. Thus, only elastase from human fibroblasts is adequate to evaluate elastase activity. To evaluate substances which increase elastin expression and so improve skin wrinkle, we performed Western blotting and RT-PCR for tropoelastin. However, these methods are not appropriate, because tropoelastin levels were not dramatically changed after the treatment of candidate substances. Tannic acid among candidate substances decreased CCD-25sk fibroblast elastase activity. Therefore, tannic acid might be developed for possible agents for skin ageing.

목차 Contents

• 용역연구사업 연구결과보고서 ...1
• 제출문 ...2
• 목차 ...3
• I. 연구개발결과 요약문 ...4
• 연구결과보고서 요약문 ...4
• Summary ...6
• II. 총괄연구개발과제 연구결과 ...8
• 제1장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...8
• 제2장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 내용 및 방법 ...13
• 제3장 총괄연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...20
• 제4장 총괄연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...45
• 제5장 총괄연구개발과제의 연구성과 ...49
• 제6장 기타 중요변경사항 ...50
• 제7장 참고문헌 ...51
• 제8장 첨부서류 ...53
• III. 제1세부연구개발과제 연구결과 (세부과제별로 작성) ...56
• 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...57
• 제2장 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ...62
• 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...68
• 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...86
• 제5장 세부연구개발과제의 연구성과 ...90
• 제6장 기타 중요변경사항 ...91
• 제7장 참고문헌 ...92
• 제8장 첨부서류 ...94
• IV. 제2세부연구개발과제 연구결과 (세부과제별로 작성) ...95
• 제1장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ...96
• 제2장 세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ...97
• 제3장 세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ...98
• 제4장 세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ...114
• 제5장 세부연구개발과제의 연구성과...115
• 제6장 기타 중요변경사항 ...116
• 제7장 참고문헌 ...117
• 제8장 첨부서류 ...118