초록 ▼

단백질 측정표준 체계구축 사업은 4개의 세부과제로 구성되어 있으며 각 세부별 연구개발의 범위는 다음과 같다.

가. 단백질 표준물질 생산기반 구축
- 단백질 시료확보를 위한 외부협력 및 자제 생산기술 확보
- 단백질 정밀분석용 상용 분석법의 평가기술 개발
- 단백질 시료조작의 유효성 및 안정성 평가기술 개발
나. 단백질 정량표준 확립 분야
- HPLC-ID/MS 아미노산 (Val, Phe, Pro) 분석기술
- 아미노산 인증표준물질 개발
- 펩타이드 HPLC-

단백질 측정표준 체계구축 사업은 4개의 세부과제로 구성되어 있으며 각 세부별 연구개발의 범위는 다음과 같다.

가. 단백질 표준물질 생산기반 구축
- 단백질 시료확보를 위한 외부협력 및 자제 생산기술 확보
- 단백질 정밀분석용 상용 분석법의 평가기술 개발
- 단백질 시료조작의 유효성 및 안정성 평가기술 개발
나. 단백질 정량표준 확립 분야
- HPLC-ID/MS 아미노산 (Val, Phe, Pro) 분석기술
- 아미노산 인증표준물질 개발
- 펩타이드 HPLC-ID/MS 분석기술 개발 착수
- 단백질 측정 관련 기술 개발 (CE-MS 분석기술 등)
다. 단백질 특성 분석기술 확립
- 상향식 단백질 서열 및 PTM 분석기술 확립
- Disulfide 결합 구조 분석기술 확립
- PRLC를 이용한 단백질 불순물 분리분석 기술 확립
- hGH의 특성 분석
라. 단백질 품질관리 기반 구축
- 단백질 중 숙주세포 유래 핵산 불순물 정량 분석 기술 개발
- 효소형 단백질의 활성 측정 기술 개발
- 효소형 단백질의 분광학적 특성 측정

Abstract ▼

Development of protein measurement standards project consists of 4 sub projects and the contents and scope of each project were as follows.

A. Establishment of production platform for protein reference materials
(1) Establishment of own production technology and external collaboration for

Development of protein measurement standards project consists of 4 sub projects and the contents and scope of each project were as follows.

A. Establishment of production platform for protein reference materials
(1) Establishment of own production technology and external collaboration for large amount of protein samples
(2) Evaluation of protein analysis technologies for commercial methods
(3) Evaluation of efficacy and stability of protein sample manipulation
B. Establishment of Measurement standards for protein quantitation
(1) HPLC-ID/MS method for amino acids from hydrolyzed proteins
(2) Development of CRMs of high purity amino acids
(3) ID-MS method for analysis of peptide
(4) Development of protein measurement methods (e.g., CE-MS)
C. Development of protein characterization technologies
(1) Development of bottom-up protein analysis method for ammo acid sequence and PTM analysis
(2) Development of disulfide linkage analysis method
(3) Protein impurity analysis method using RPLC
(4) Characterization of hGH
D. Establishment of standards for quality assessment of proteins
(1) Development of a method for quantitation of host cell DNA impurity in protein products
(2) Establishment of a protocol for activity measurement of an enzyme protein
(3) Spectroscopic analysis of an enzyme protein

목차 Contents

• 제출문 ... 4
• 보고서 요약서 ... 6
• 요약문 ... 8
• SUMMARY ... 12
• CONTENTS ... 16
• 목 차 ... 18
• 제 1 장 연구개발 과제의 개요 ... 20
• 제 1 절 연구개발의 필요성 ... 20
• 제 2 절 국내외 연구 및 기술개발 동향 ... 24
• 제 3 절 연구개발의 범위 ... 28
• 제 2 장 단백질 표준물질 생산기반 구축 ... 31
• 제 1 절 서 론 ... 31
• 제 2 절 보관조건에 따른 생화학적 분석 연구 ... 33
• 제 3 절 펩타이드 수준의 hGH 분석 ... 45
• 제 4 절 단백질 상용 정량법 비교분석 연구 ... 53
• 제 5 절 단백질 내 염기성 아미노산을 이용한 Bradford assay 재해석 ... 61
• 제 3 장 단백질 정량측정 표준기술의 개발 ... 70
• 제 1 절 서 론 ... 70
• 제 2 절 인-성장호르몬 단백질 정량 연구 ... 72
• 제 3 절 Peptide 정량 국제비교 수행 (CCQM-P55.1) ... 91
• 제 4 절 펩타이드 기반 단백질 정량기술 개발 ... 99
• 제 5 절 아미노산 표준물질의 개발 ... 102
• 제 6 절 단백질 측정기술의 개발 ... 122
• 제 4 장 단백질 특성 분석 기술의 개발 ... 125
• 제 1 절 서 론 ... 125
• 제 2 절 상향식 단백질 분석에 의한 단백질 서열, disulfide 결합 및 modification 분석 ... 127
• 제 3 절 RPLC에 의한 단백질 불순물 분리 분석 ... 150
• 제 4 절 하향식 단백질 분석에 의한 단백질 서열, disulfide 결합 및 modification 분석 ... 152
• 제 5 장 단백질 품질관리 기반 구축 ... 162
• 제 1 절 단백질 내 숙주세포 유래 핵산 불순물 정량 분석 ... 162
• 제 2 절 효소형 단백질의 활성 측정 기술 개발 ... 174
• 제 3 절 효소 단백질의 생물학적 활성에 따른 분광학적 특성평가 ... 188
• 제 4 절 다중 면역 분석법을 통한 단백질 특성 평가 기술 개발 ... 201
• 제 6 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 204
• 제 7 장 연구개발결과의 활용계획 ... 208
• 제 8 장 참고문헌 ... 212
• 끝페이지 ... 216