초록 ▼

-DDR2가 암을 직접적으로 유발 할 수 있는지 또한 c-Src와의 공조을 통하여 전이성 말기암을 유발하는지를 세포 모델 및 동물 모델에서 확인하고자 하였다.
-DDR2가 항암 표적임을 검증하기 위하여 chemical genomics approach를 이용한 표적검증 방법을 통한 연구를 진행하였다. 즉 DDR2 에 대한 특이적 저분자 화합물을 발굴한 후 이를 암세포 및 동물 모델에 처리하여 항암 효능을 규명하면서 그 작용 기전을 검증하여 DDR2가 저분자 화합물 저해를 통한 항암제 표적이 됨을 증명하고자 하였으며 동시에 DDR

-DDR2가 암을 직접적으로 유발 할 수 있는지 또한 c-Src와의 공조을 통하여 전이성 말기암을 유발하는지를 세포 모델 및 동물 모델에서 확인하고자 하였다.
-DDR2가 항암 표적임을 검증하기 위하여 chemical genomics approach를 이용한 표적검증 방법을 통한 연구를 진행하였다. 즉 DDR2 에 대한 특이적 저분자 화합물을 발굴한 후 이를 암세포 및 동물 모델에 처리하여 항암 효능을 규명하면서 그 작용 기전을 검증하여 DDR2가 저분자 화합물 저해를 통한 항암제 표적이 됨을 증명하고자 하였으며 동시에 DDR2 활성 특이적으로 저해하는 저분자 화합물을 발굴하고자 하였다.
-DDR2를 특이적으로 저해하는 저분자 물질은 세포내 cytosolic domain의 타이로신카이네이즈를 저해하는 물질과 세포외 extracellular domain과 콜라겐과의 결합을 저해하는 물질의 발굴을 수행하였다. 이를 위하여 먼저 HTS 검색 체계를 확립하고 화합물 라이브러리를 대량검색 후 선도화합물을 발굴하고 이의 최적화 연구를 통하여 potent하고 특이적 저해능을 가지는 저분자 화합물을 발굴한 후 characterization 하였다.
-DDR2 활성의 세포내 조절 기전이나 신호전달 기전을 확인하고자 하였다. 먼저 DDR2가 extracellular domain의 특정 부위의 N-glycosylation과 관련한 리간드에 의한 활성화 조절 기전을 연구하고자 하였다.
-DDR2가 동맥경화증이나 피부 상흔 형성 등의 fibroinflammation으로 인한 조직 섬유화 질환의 표적임을 DDR2 특이적 저해제를 vascular smooth muscle cell이나 dermal fibroblast 배양과 피부상처 후 상흔 형성 동물 모델에 적용하여 검증하였다.
-DDR2의 FAK와 p38 MAPK를 포함하는 세포내 신호전달 기전과 cytoskeleton의 변화와의 연관성을 검증하였다.

Abstract ▼

This research project was conducted to examine DDR2 as the new drug target for anticancer and anti-fibroinflammatory diseases. We found that simultaneous overexpression of DDR2 and c-Src occurs frequently in various metastatic cancer cells. Enforced co-overexpression of the both in NIH3T3 cells caus

This research project was conducted to examine DDR2 as the new drug target for anticancer and anti-fibroinflammatory diseases. We found that simultaneous overexpression of DDR2 and c-Src occurs frequently in various metastatic cancer cells. Enforced co-overexpression of the both in NIH3T3 cells caused enhanced foci-formation and the tumor development in nude mouse to conform that DDR2 mediates the oncogenic activity of c-Src. We developed LCB30110, a potent and specific small molecule inhibitor against DDR2 tyrosine kinase with Ki=9nM. LCB30110 suppressed the expression of MMPs, migration and invasive activity of MDA-MB-231 metastatic breast cancer cells. Intratumoral injection of this compound inhibited MDA-MB-231 tumor growth in xenografted mice. LCB30110 inhibited tyrosine 861 phosphorylation of FAK which was induced by collagen and the formation of focal adhesion complex and actin stress fiber. DDR2 activity was regulated by N-glycosylation at arg 213 of extracellular domain. Screening for chemicals to inhibit the association between DDR2 and collagen identified the known anticancer drug actinomycin D as such an inhibitor. LCB30110 treatment to VSMC suppressed its migration and expression of MMP2. DDR2 inhibition also led to the suppression of dermal fibroblast activity and dermal scar formation in rabbit skin would healing model. Taken together, these results
confirmed that DDR2 is the therapeutic target for cancer and fibroinflammatory diseases.

목차 Contents

• 제출문...1
• 보고서 요약서...2
• 요약문...3
• SUMMARY...7
• 제 1 장 연구개발과제의 개요...10
• 제 1 절 연구 개발의 목적...10
• 제 2 절 연구 개발의 필요성...10
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...13
• 제 1 절 국내 현황...13
• 제 2 절 국외 관련 연구 동향...13
• 제 3 절 DDR2 특이적 저해 저분자 물질 발굴 관련 특허 현황...14
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과...15
• 제 1 절 DDR 패밀리 단백질의 악성 암 세포주 발현 분석...15
• 제 2 절 전이성 악성암에서 DDR2와 c-Src 공조 기작 규명...16
• 제 3 절 DDR2 카이네이즈 특이적 저해 화합물 발굴...28
• 제 4 절 DDR2 저해 화합물의 세포 및 질환 동물 특성 분석 및 평가...37
• 제 5 절 N-glycosylation에 의한 DDR2 활성의 조절...55
• 제 6 절 DDR2와 콜라겐 결합 저해제 발굴 연구...62
• 제 7 절 DDR2 저해제의 Fibroinflammation 억제를 통한 피부 상처 상흔 형성 억제 연구...73
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도...89
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...91
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보...93
• 제 7 장 참고문헌...94