초록 ▼

1. 말라라아와 탱기열의 신속， 정확한 현장에서의 진단을 위하여 rapid strip kit를 개발하였다.
2. 말라리아 원충과 탱기열 바이러스의 표면 항원단백질들의 유전자를 식물에서의 발현이 최대가 되도록 최적화하여 합성한 유전자를 식물에 도입, 발현
3. 형질전환식물조직에 생산된 말라리아 원충과 뎅기열 바이러스의 표면 항원 단백질들을 Ni-agarose column을 사용하여 분리, 정제법 확립
4. 정제된 항원 단백질들과 말라리아와 뎅기열 환자 혈청 내에 생성된 각각의 항체의 면역 반응성을 조사하여 진단키트용

1. 말라라아와 탱기열의 신속， 정확한 현장에서의 진단을 위하여 rapid strip kit를 개발하였다.
2. 말라리아 원충과 탱기열 바이러스의 표면 항원단백질들의 유전자를 식물에서의 발현이 최대가 되도록 최적화하여 합성한 유전자를 식물에 도입, 발현
3. 형질전환식물조직에 생산된 말라리아 원충과 뎅기열 바이러스의 표면 항원 단백질들을 Ni-agarose column을 사용하여 분리, 정제법 확립
4. 정제된 항원 단백질들과 말라리아와 뎅기열 환자 혈청 내에 생성된 각각의 항체의 면역 반응성을 조사하여 진단키트용 항원으로의 사용 가능성 확인
5. 정제된 재조합항원 단백질들을 원료로 사용하여 말라리아와 뎅기열 환자 혈 신속하고 정확한 rapid strip kit를 제작하였다.
6. 이 과제 수행 중 확보한 기술은 최근 세계적으로 급증하고 있는 선·변종 질병들의 진단키트 개발과 치료를 위한 백신 개발에 활용될 수 있습니다.

Abstract ▼

1. We have developed rapid diagnostic kits for 'Dengue Fever' and 'Malaria', which allow rapid confirmation of 'Dengue Fever' and 'malaria' infection as well as identify the specific serotypes of Dengue causing the infection.
2. Nucleotide sequences encoding surface antigens of 'Dengue Fever' and

1. We have developed rapid diagnostic kits for 'Dengue Fever' and 'Malaria', which allow rapid confirmation of 'Dengue Fever' and 'malaria' infection as well as identify the specific serotypes of Dengue causing the infection.
2. Nucleotide sequences encoding surface antigens of 'Dengue Fever' and 'Malaria' were optimized for plant codon in order to obtain higher levels of expression in plant system then artificially synthesized.
3. Recombinant antigens were produced and purified from transgenic plants.
4. We found that the antigenic proteips purified from transgenic plants retained immunogenic properties.
5. Diagnostic kits for antibody screemng of serum from patients who were infected by 'Dengue Fever' or 'Malaria' were successfully made by usmg appropriate recombinant antigens produced from transgenic plants.
6. These diagnostic systems using plant-made antigens showed no crossreactivity with normal serum beyond other diagnostic system using E. coli derived recombinant antigens. No false-positive reaction is the most distinctive feature of diagnostic systems using plant-made antigens.

목차 Contents

• 표지 ...1
• 제출문 ...2
• 요약문 ...3
• SUMMARY ...5
• CONTENTS ...6
• 목 차 ...7
• 제 1 장 서론 ...9
• 제 1 절 연구개발의 목적 ...9
• 제 2 절 필요성 ...9
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ...10
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과 ...11
• 제 1 절 유전자 최적화 및 합성 ...11
• 1. 말라리아와 뎅기열의 항원부위 선정 ...11
• 가. 말라리아 항원부위 ...11
• 나. 뎅기열 항원부위 ...12
• 2. 말라리아와 뎅기열의 유전자 디자인 및 합성 ...13
• 가. 말라리아 합성 유전자 서열 ...14
• 나. 뎅기바이러스 합성 유전자 서열 ...14
• 제 2 절 Transient Expression ...15
• 1. 바이너리벡터의 제작 ...15
• 2. Transient Expression을 위한 균주 배양 ...16
• 3. Transient expression 조건 및 프로세스 ...16
• 제 3 절 재조합항원의 정제 ...18
• 1. 형질전환 식물조직으로부터 재조합항원의 추출 ...18
• 가. 식물조직의 파쇄 ...18
• 나. Lysis ...18
• 다. Solubilization ...18
• 라. Stabilization ...18
• 마. Separation ...18
• 2. 식물추출액으로부터 재조합항원의 정제 ...19
• 제 4 절 재조합항원의 기능 확인 ...20
• 1. 재조합 말라리아 항원단백질의 기능 확인 ...20
• 2. 재조합 뎅기바이러스 항원단백질의 기능 확인 ...21
• 제 5 절 Rapod strip kit의 제작 ...22
• 1. Rapod strip kit의 제작 ...22
• 가. Rapod strip kit의 원리...22
• 나. Colloidal gold 제작 ...22
• 다. Gold conjugation을 위한 조건 ...23
• 라. Membrane 분주 ...24
• 마. 시험생산 : 말리리아, 뎅기열 진단키트 ...24
• 바. KFDA 품목허가용 기시법 작성 ...24
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ...25
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ...26
• 제 6 장 기타 중요 변동사항 ...26
• 제 7 장 참고문헌 ...27