초록

□ 바이오장기 시장은 국내 연 1조원 규모, 국외 7조2천억 규모이고, 장기이식 대기 기간 단축으로 이어져 국내외시장 선점하여야함
□ 바이오장기 생산을 위한 체세포 복제기법에 있어 복제돼지 생산효율이 극히 낮으므로(2~5%) 수태율 개선이 요구됨.

Abstract ▼

Cloned animals developed from somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos are useful resources for agricultural and medical applications. However, the birth rate in the cloned animals is very low, and the cloned animals that have survived show various developmental defects. In this report, we prese

Cloned animals developed from somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos are useful resources for agricultural and medical applications. However, the birth rate in the cloned animals is very low, and the cloned animals that have survived show various developmental defects. In this report, we present the morphology and differentially regulated proteins in the extraembryonic tissue from SCNT embryos to understand the molecular nature of the tissue. We examined 30-day-old SCNT porcine embryos at which the sonogram can first detect pregnancy. The extraembryonic tissue, fetus and amniotic fluid from SCNT embryos was abnormally small size and shape compared with the control. In the Realtime RT-PCR analysis, apoptotic related genes were up-regulated and oxygen homeostasis related genes were down-regulated. Also, several cytokines, NF-α, INF-γ and IL-1rI were aberrantly expressed. These results demonstrate that a major reason for the low birth rate of cloned animals is due to abnormal gene expression in the cloned extraembryonic tissue and fetus during early pregnancy.
Since the cloned sheep ‘Dolly' several kinds of cloned animals has been produced from bovine to feline. Of them α-1,3-galactosyltransferase null pig took the limelight as a source of bio-organ. The pig was produced by somatic cell nuclear transfer(SCNT), however SCNT efficiency is still low. The present study was carried out to determine the optimal condition in order to increase the pregnancy rate of SCNT embryos. Estradiol-17β treatment, estrus synchronization, helper embryo co-transfer and caffeine treatment were tried to get a better pregnancy rate. The recipient pig treated with estradiol-17β on Day 12 showed higher pregnancy rate(42.9% vs. 25%). When the early passage somatic cells were used as donor cells, the pregnancy rate was higer(33.3% vs. 18.2%). The SCNT embryos treated with 5 mM caffeine showed higher pregnancy rate(40.0% vs. 33.3%). The present study indicates that the pregnancy rate can be better when caffein treated SCNT embryos are transferred and the recipient pigs are treated with estradiol-17β on Day 12 after embryo transfer.

목차 Contents

• 제출문 ... 1
• 요약문 ... 2
• SUMMARY ... 7
• 제 1장 서론 ... 8
• 제 2장 국내외 기술개발 현황 ... 9
• 제 3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 11
• 1절: 연구 방법 ... 11
• 2절: 복제란의 체외발달율 검정 ... 12
• 3절 : 이식 후 초음파를 통한 임신 및 유산시기 모니터링 ... 12
• 4절 : 임신 30일령의 정상태아와 비정상태아의 태반, 자궁 분석 ... 13
• 5절 : 복제태아 자궁내막 그리고 태반에서의 세포 사멸 유전자 발현 검정 ... 14
• 6절 : 복제태아, 자궁 그리고 태반에서의 Proinflammatory cytokines 발현 검정 ... 15
• 7절 : 복제태아, 자궁내막 그리고 태반에서의 Hypoxia 관련 유전자 발현 검정 ... 15
• 8절 : 임신초기의 혈액과 양수에서의 cytokines의 분석 ... 16
• 9절 : 임신 말기의 복제돼지 장기별 상태 검정 ... 16
• 10절 : 형질전환복제태아 임신기간 동안 자궁내 유산시기 모니터링 조사 ... 17
• 11절 : 발정주기 중 일반돼지 호르몬분석 ... 17
• 12절 : 임신인지인자 인위적 주입에 따른 착상율 향상기술 개발 ... 18
• 13절 : 세포의 종류가 형질전환 복제 돼지의 수태율에 미치는 영향 ... 19
• 제 4장 연구개발 목표 달성도 및 대외 기여도 ... 22
• 제 5장 연구개발 결과의 활용계획 ... 23
• 제 6장 기타 중요 변동사항 ... 24
• 제 7 장 참고문헌 ... 25
• SUMMARY ... 27
• 제 1장 서론 ... 28
• 제 2장 국내외 기술개발 현황 ... 28
• 제 3장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 29
• 1절: 연구내용 ... 29
• 2절: 연구 방법 ... 30
• 3절: 연구결과 ... 31
• 4절 적요 ... 39
• 제 4장 연구개발 목표 달성도 및 대외 기여도 ... 40
• 제 5장 연구개발 결과의 활용계획 ... 40
• 제 6장 기타 중요 변동사항 ... 41
• 제 7장 참고문헌 ... 41
• SUMMARY ... 43
• 제 1 장 서 론 ... 44
• 제 2 장 연구개발 대상기술의 국내ㆍ외 현황 ... 44
• 가. 세계적 수준 ... 44
• 나. 국내수준 ... 44
• 다. 국내외의 연구현황 ... 45
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 46
• 1절 : 2D기법을 이용한 착상전,후 발현차이 유전자 및 단백질 탐색 ... 46
• 2절 : 착상전후 초기배발달단계의 중요유전자 분석 ... 52
• 3절 : 태반영양막세포 분리 및 유사줄기세포주(TS cell) 구축 ... 58
• 4절 : Histone deacethylase(HDAC) inhibitor 처리가 돼지 체세포 복제란의 발달에 미치는 영향 ... 61
• 5절 : 첨가제 처리가 복제란 발달에 미치는 영향 ... 63
• 4절. 적요 ... 64
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 65
• 1절 : 목표대비 대외달성도 ... 65
• 2절 : 정량적 성과(논문게재, 특허출원, 기타)를 기술 ... 65
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 66
• 제 6 장 기타 중요 변동사항 ... 66
• 제 7 장 참고문헌 ... 67
• SUMMARY ... 69
• 제 1 장 서 론 ... 70
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 71
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 72
• 1절 : 복제동물 및 후대의 혈액 및 조직으로부터 mtDNA 채취 및 분석 ... 72
• 2절 : 복제 미니돼지에서 mtDNA의 다형성 분석 ... 76
• 3절 : 복제동물 및 후대의 생리적 특성 및 기능 모니터링 ... 78
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 82
• 1절 : 목표대비 대외달성도 ... 82
• 2절 : 정량적 성과(논문게재, 특허출원, 기타)를 기술 ... 82
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 83
• 제 6 장 기타 중요 변동사항 ... 84
• 제 7 장 참고문헌 ... 85