초록 ▼

- c-myc si-RNA를 이용하여 MBT-2 세포의 c-myc 발현 억제와 세포 증식 억제 효과를 Western blot과 MTT assay를 이용하여 확인한다.
- c-myc si-RNA MBT-2 세포를 이용한 정위성 방광암 동물 모델을 확립 후, 방광종양의 증가 속도의 감소를 Luminescence imaging과 MRI를 이용하여 측정하고, 실험동물의 생존기간 연장을 확인
- c-myc shRNA와 green fluorescence protein (GFP)를 탑재한 렌티바이러스를 제작하고 MBT-2 세포에 감염

- c-myc si-RNA를 이용하여 MBT-2 세포의 c-myc 발현 억제와 세포 증식 억제 효과를 Western blot과 MTT assay를 이용하여 확인한다.
- c-myc si-RNA MBT-2 세포를 이용한 정위성 방광암 동물 모델을 확립 후, 방광종양의 증가 속도의 감소를 Luminescence imaging과 MRI를 이용하여 측정하고, 실험동물의 생존기간 연장을 확인
- c-myc shRNA와 green fluorescence protein (GFP)를 탑재한 렌티바이러스를 제작하고 MBT-2 세포에 감염하여 GFP를 이용하여 c-myc의 발현이 저하된 MBT-2.c-myc shRNA 세포주 확립
- 증식 (proliferation)이 저하된 MBT-2 세포주를 이용하여 동물에서 정위성 방광암 동물 모델 확립
- MBT-2.Luc 세포주 혹은 MBT-2.c-myc shRNA.Luc 세포주를 방광에 이식하고 luminescence의 in vivo imaging 기기를 이용하여 동물 모델 확립을 검증하고, 방광종양의 증가 속도의 감소 및 생존기간 연장을 확인

Abstract ▼

To properly evaluate the biology and effects of therapy, it is critical to utilize animal camcer model which mimic the behavior of human disease. In bladder tumor models, there is a general consensus that MBT-2 orthotopic tumor model simulates the local cancer environment and resemble the behavior o

To properly evaluate the biology and effects of therapy, it is critical to utilize animal camcer model which mimic the behavior of human disease. In bladder tumor models, there is a general consensus that MBT-2 orthotopic tumor model simulates the local cancer environment and resemble the behavior of human disease. However, after tumors are detected in vivo imaging such as MRI or bioluminescence imaging in MBT-2 orthotopic bladder cancer model, mouse expires in just two to three weeks due to azotemia. It makes difficult to observe the effects of intravesical treatment thereafter.
We tested whether down-regulation of c-Myc expression in MBT-2 cell by using si-RNA can cause decreasing its proliferation and tumor growth in orthotopic bladder cancer model. We constructed lentivirus mediating shRNA for c-Myc and established growth-retarded stable cell line of MBT-2. c-Myc shRNA induced the down-regulation of MBT-2 cell as designed. We confirmed the growth retardation implanted inside bladder of C3H/He mice. Accordingly, such results suggested that this new orthotopic bladder cancer model could be utilized to evaluate the effects of intravesical instillation treatments.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 4
• 목차 ... 5
• 요약문 ... 6
• Project Summary ... 8
• 1. 연구의 최종목표 ... 9
• 2. 연구의 내용 및 결과 ... 9
• ▶ 생쥐 방광암 세포주에서 c-Myc 발현 분석 ... 9
• ▶ MBT-2 세포에서 1388 bp c-Myc si-RNA를 이용한 c-Myc 의 발현 변화 ... 9
• ▶ MBT-2 세포에서 1388bp c-Myc si-RNA를 이용 세포의 증식 변화 ... 10
• ▶ 정위성 방광 종양모델 형성 ... 10
• ▶ 정위성 방광암 모델에서 1388bp c-Myc si-RNA를 이용한 종양의 증식의 변화 ... 11
• ▶ c-myc shRNA와 green fluorescence protein (GFP)를 탑재한 렌티바이러스를 제작하고 MBT-2 세포에 감염하여 GFP를 이용하여 c-myc의 발현이 저하된 MBT-2.c-myc shRNA 세포주 확립 ... 11
• ▶ MBT-2. c-Myc shRNA 세포주의 증식 변화 ... 13
• ▶ MBT-2 세포주 혹은 MBT-2.c-myc shRNA 세포주를 방광에 이식하여 동물모델 확립을 검증 ... 13
• 3. 연구결과 고찰 및 결론 ... 14
• 4. 연구성과 및 목표달성도 ... 15
• (1) 연구성과 ... 15
• (2) 목표달성도 ... 16
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 17
• (1) 연구종료 2년후 예상 연구성과 ... 17
• (2) 연구성과의 활용계획 ... 17
• 6. 참고문헌 ... 18
• 7. 첨부서류 ... 18