초록 ▼

◆ 연구목표
-흡연, 과음이 주된 발암원인으로 알려져 왔던 두경부 편평상피세포암의 새로운 발암원인으로 점차 부각, 증가하고 있는 인간유두종바이러스 (HPV)의 관련에 대한 분자역학적 현황을 한국에서 발생한 두경부암 조직을 대상으로 규명하고 임상적 의미를 분석함.
-HPV에 의한 두경부암의 발암기전을 흡연 등, HPV 비관련 두경부암과 비교, 특이성을 규명하고, 두경부암의 잠재적 진단 및 치료 표적자를 개발하기 위한 선행연구로서 whole genome-wide copy number variation study와 microa

◆ 연구목표
-흡연, 과음이 주된 발암원인으로 알려져 왔던 두경부 편평상피세포암의 새로운 발암원인으로 점차 부각, 증가하고 있는 인간유두종바이러스 (HPV)의 관련에 대한 분자역학적 현황을 한국에서 발생한 두경부암 조직을 대상으로 규명하고 임상적 의미를 분석함.
-HPV에 의한 두경부암의 발암기전을 흡연 등, HPV 비관련 두경부암과 비교, 특이성을 규명하고, 두경부암의 잠재적 진단 및 치료 표적자를 개발하기 위한 선행연구로서 whole genome-wide copy number variation study와 microarray-based immunochemistry를 시행하고, 분자생물학, 임상적 의미를 분석함.
-규명된 genome-wide CNV profile, immunohistochemical profile등 바이오마커에 대한 validation을 시행, 궁극적으로 novel marker를 개발함.
◆ 연구내용 및 방법
다음과 같은 연구방법을 이용한다.
대상환자
국립암센터의 두경부종양클리닉의 환자중 환자 또는 보호자의 동의를 얻은 경우 본 연구를 시행 함. 생검 또는 절제술로 진단되고 24개월 이상 추적관찰된 두경부암 263례를 대상으로 함. (구인 두암, 후두암, 하인두암, 원발불명암, 구강암 등의 검체를 대상으로 함) HPV detection and typing Paraffin embedded tissue, oral mucosal swab, saliva, oral linsing, peripharal blood에서 DNA를 추출, 정제함. 각 검체에서 DNA를 정제하는 기법 개발, 조건화, 대상검체에 대한 시행. HPV-PCR을 이용하여 HPV genome의 유무를 규명하고 필요시 typing(type 16,18) 시행.
Immunohistochemistry
HPV의 발암과정에서 최종적으로 작용하는 cell cycle modulator (p53, pRb, p16, cyclin D1, EGFR 등)에 대한 IHC 후 발현 양상을 확인.
SCCHN에서 HPV의 관련성에 대한 역학적, 임상적 의미 연구
두경부암의 각 원발병소에서 HPV의 관련 양상과 임상상과의 관계에 대한 통계분석, 여러 임상정보와의 연관성, 인과성 분석.
Array comparative genomic hybridization (aCGH)
일차연도에 규명된 HPV 관련 두경부암의 특이 발암기전을 genomic study를 이용하여 규명함. 역시 일차연도에 규명된 HPV 비관련 두경부암과 비교하여 특이 chromosomal aberration을 보고, specific signature를 파악하기 위해 시행함. possible novel target을 발굴, 임상적 의미를 분석함. 약 150례에서 시행할 예정임.
Validation of possible specific target elucidated on chromosomal level
mRNA, protein 수준에서 실제 세포내 발현, 작용 여부를 확인함. 임상적 의미를 분석.
환자의 database구축
국립암센터에서 지금껏 수술한 환자의 각종 임상적 자료를 database화하여 이 database와 상기 유전체분석 결과의 연관성을 분석함.
통계적 분석
- 우리나라의 두경부 편평상피세포암에서 HPV 관련 빈도 및 양상을 규명, 분석, 이에 대한 지식 습득.
- 두경부암 환자의 원발병소, TNM 병기, 치료반응성, 생존율 등의 임상정보와 HPV와의 관련성 분석
- HPV 관련 두경부 편평상피세포암의 특이 임상양상을 규명하고 분석함.
- HPV 관련암의 특이 염색체 변이 양상 분석.
- 염색체 변이 양상의 실제 작용 여부를 확인하고, 이러한 target의 정보와 임상정보와의 관련성에 대한 분석을 통하여, 두경부암의 발생기전이나 예후에 관련된 novel target이 될 수 있는지를 규명함.
◆ 연구성과
-정량적 성과

Abstract ▼

Human papillomavirus (HPV) related oropharyngeal squamous cell carcinoma (OSCC) has been reported to be distinct from smoking-related OSCCs in many subsets of races worldwide. The presence of HPV DNA predicts improved survival, yet E7 oncogene mediated abnormal cell cycle control and its clinical me

Human papillomavirus (HPV) related oropharyngeal squamous cell carcinoma (OSCC) has been reported to be distinct from smoking-related OSCCs in many subsets of races worldwide. The presence of HPV DNA predicts improved survival, yet E7 oncogene mediated abnormal cell cycle control and its clinical meaning remain undescribed for HPV related OSCCs. However little has been known about the related situations in Korea.
In a Korean cohort of head and neck squamous cell carcinomas, including OSCC, mainly treated with surgery based modalities in National Cancer Center, we investigated epidemiological indicators, HPV status, immunohistochemical markers, like G1 cycle markers, stemness markers using semi-quantitative measurement. Moreover, we evaluated the pattern of copy number variations (CNVs) using genome-wide array comparative genomic hybridization (aCGH) and analyzed its clinical relations and role for prognostication.
Among 93 previously untreated patients with surgically-resectable OSCCs, 46 (49.5%) were HPV+ (HPV PCR+/p16+). HPV+ cases were significantly younger, predominantly non- smoking and non-drinking. These patients demonstrated better survival than their HPV- counterparts (3 year overall survival: 94% HPV+ vs 60% HPV-). Moreover, HPV+ OSCCs expressed higher p16, cdk4 and lower CCND1 and pRb as compared to HPV- OSCCs. Single markers like p16 (HR 2.39, p=0.016), pRb (HR 2.13, p=0.032) and CCND1 (HR 2.09, p=0.038) correlated with survival. Notably, combined markers like p16/cdk4 ratio (HR 2.47, p=0.011) and cdk4+CCND1 sum (HR 2.65, p=0.009) showed even more significant correlations.
CNV study revealed less gain (88.3 vs.77.1 probes on average) and loss spot (74.3 vs. 58.2) in the HPV(+) group. Patterns like multiple large CNV segments and deep CNV gain or loss were detected significantly less in HPV(+) group. Our data suggest HPV(+) OSCCs exhibits more stable genomic integrity compared to exclusively smoking-related HPV(-) group.
HPV presence in Korean OSCCs correlated with improved survival. Expression ratios of G1 cell cycle markers may predic tsurvival of HPV+ as well as HPV- cancers better than expression of each marker alone. For CNV, Locus-targetted profile analyses would be followed afterwards.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 3
• 목 차 ... 4
• 요 약 문 ... 5
• Project Summary ... 8
• 1. 연구의 최종목표 ... 10
• 2. 연구의 내용 및 결과 ... 10
• 연구의 내용 ... 10
• 연구의 결과 ... 11
• 3. 연구결과 고찰 및 결론 ... 12
• 4. 연구성과 및 목표달성도 ... 14
• (1) 연구성과 ... 14
• (2) 목표달성도 ... 16
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 18
• (1) 연구종료 2년후 예상 연구성과 ... 18
• (2) 연구성과의 활용계획 ... 19
• 6. 참고문헌 ... 19
• 7. 첨부서류 ... 21