초록 ▼

K/BxN 생쥐의 발병에 조절 T 세포의 생체 내 역할을 조사하기 위하여 Foxp3 유전자가 돌연변이 되어 조절 T 세포가 발생하지 않는 scurfy 생쥐를 K/BxN과 교배하여 조절 T세포가 결핍된 K/BxN 생쥐 (K/BxNsf)를 제작하였다. 이 K/BxNsf 생쥐는 K/BxN 생쥐에 비하여 관절염의 발생과 진행이 더 심하게 가속화되었으며, 소포외 보조 T (extrafollicular helper T) 세포, 소포 보조 T 세포, 종자 중심이 증가되었다. K/BxNsf 생쥐의 림프절과 비장에는 성숙한 형질세포가 비정상적으로

K/BxN 생쥐의 발병에 조절 T 세포의 생체 내 역할을 조사하기 위하여 Foxp3 유전자가 돌연변이 되어 조절 T 세포가 발생하지 않는 scurfy 생쥐를 K/BxN과 교배하여 조절 T세포가 결핍된 K/BxN 생쥐 (K/BxNsf)를 제작하였다. 이 K/BxNsf 생쥐는 K/BxN 생쥐에 비하여 관절염의 발생과 진행이 더 심하게 가속화되었으며, 소포외 보조 T (extrafollicular helper T) 세포, 소포 보조 T 세포, 종자 중심이 증가되었다. K/BxNsf 생쥐의 림프절과 비장에는 성숙한 형질세포가 비정상적으로 축적되어 있었고 이에 상응하게 골수에서 형질세포가 결핍되어 있었다. 이런 결과는 케모카인 수용체 CXCR4의 정상적인 발현에도 불구하고 골수로 이주하게 하는 케모카인인 CXCL12에 대한 무반응성 때문인 것으로 간주된다. 또한, K/BxNsf 생쥐의 비장에 축적된 형질세포는 장기간 생존하며 사이클로포스파마이드에 의해 덜 죽었다. 이들 세포에서 FcγRIIb 발현이 감소되었고, 면역 복합체와 FcγRIIb를 통한 세포 죽음 신호에 덜 민감하였다. 이런 비장 분포 비정상 장수형질세포의 특성을 분석하기 위해 K/BxN 생쥐와 K/BxNsf 생쥐의 형질세포 간의 유전자 발현 패턴을 Illumina MouseRef-8 v2 Expression BeadChip microarray로 탐색하였다. 그 중 발현도가 K/BxNsf PC에서 3배 이상 증가, 감소한 유전자는 각각 416개, 467개 였다. 따라서 K/BxN과 K/BxNsf 마우스의 PC는 동일 계통세포임에도 불구하고 발현도가 상당히 다른 세포로 분화했음을 알 수 있다. 조절 T 세포의 직접적인 세포독성 효과도 형질세포의 죽음에 관여하였다. 그러므로, 본 연구는 조절 T 세포가 보조 T 세포의 발생을 조절할 뿐만 아니라 형질 세포 내재적 (intrinsic) 기전에 영향을 줌으로써 장기간 생존하는 비장 형질세포의 발생을 억제시키고 그 결과 체액성 자가면역이 지속되지 않도록 한다는 것을 보여주었다.
K/BxNsf 생쥐는 K/BxN보다 많은 수의 Th1, Th2 세포를 가지고 있는 반면 Th17 세포는 감소되어 있었다. IL-17의 역할을 알아보기 위해 IL17-/-KBG7 관저염 모델을 제작하였다. 이 IL17-/-KBG7 마우스는 KBG7보다 관절염 발생이 지연되어 일어났다. 하지만 선천 면역 반응이서 IL-17의 역할을 알아보기 위해 K/BxN serum을 IL17-/-B6 마우스에 주사하였을 때 B6 생쥐에서 관절염이 유도된 반면 IL17-/-B6 생쥐는 관절염이 전혀 일어나지 않았다. 또한, 자가항체 의존적 관절염에서 IL17의 분비세포는 활막조직에 상주하는 Sca1+, Thy1+ 세포임을 보여주었다. 따라서 자가항체 의존적 관절염에서 IL17은 선적면역에 필수적이나 적응면역에는 필수적이지 않음을 제시하였다.
관절활막세포와 Treg 세포간의 상호작용 시 Treg 세포는 활막세포에 의해 Foxp3- non-Treg 세포로 전환이 일어나고 세포사멸의 경로에 빠지게 되었다. 또한, FLS가 Treg 세포에 변화를 초래하는 것은 접촉 의존적이었다. 한편 활막세포는 Treg과 공배양 시, IL17, IL6를 더 활발히 생성하여, Treg 세포는 반대로 활막세포의 활성을 촉진하는 것으로 생각된다. 이런 관절활막세포와 Treg 세포간의 공배양에 의한 효과는 a-GITR-Abs를 처리하여 GITR/GITRL 상호작용을 차단하였을 때 억제되었다. 따라서 관절활막세포와 Treg 세포간의 상호작용은 관절활막세포에서 발현되는 GITRL와 Treg에 발현하는 GITR 간의 결합을 통해 일어남을 보여주었다.

Abstract ▼

This study is designed to investigate novel roles and regulatory mechanisms of regulatory T (Treg) cells in rheumatoid arthritis. Specific aims include 1) Treg-dependent regulation of autoreactive B-lineage cells in an autoantibody-provoked autoimmune arthritis model and 2) mechanisms of Treg cell d

This study is designed to investigate novel roles and regulatory mechanisms of regulatory T (Treg) cells in rheumatoid arthritis. Specific aims include 1) Treg-dependent regulation of autoreactive B-lineage cells in an autoantibody-provoked autoimmune arthritis model and 2) mechanisms of Treg cell dampening in inflamed joints in the context of Treg-synoviocyte crosstalks using a Th17 cell dependent arthritis model.
The results of this study are anticipated to provide a new target to treat rheumatoid arthritis.

목차 Contents

• 중견연구자지원사업(핵심연구) 최종보고서 ... 1
• 목 차 ... 3
• 연구계획 요약문 ... 4
• 연구결과 요약문 ... 5
• SUMMARY ... 6
• 연구내용 및 결과 ... 7
• 1. 연구개발과제의개요 ... 7
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 9
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 11
• 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 40
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 41
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 41
• 7. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ... 44
• 8. 참고문헌 ... 44
• 9. 연구성과 ... 46
• 10. 기타성과 ... 48
• 별첨1. 대표연구성과 ... 49
• 자체평가의견서 ... 52
• Ⅰ. 연구개발실적 ... 53
• Ⅱ. 연구목표 달성도 ... 54
• Ⅲ. 종합의견 ... 54
• Ⅳ. 보안성 검토 ... 56