초록 ▼

1) ATF3에 의한 adiponectin receptors 발현 저해 연구
① 간과 근육세포에서 ER stress inducer인 thapsigargin을 처리하면 ATF3는 증가하면 반면 adiponectin receptor 1,2는 감소하였음 ② ATF3의 직접적인 영향을 위해 ATF3를 과발현하였을때도, adiponectin receptor 1,2의 발현이 감소하였음 ③ ATF3는 adiponectin receptor 1,2의 promoter의 활성을 감소시켰으며, ATF3가 이들 promoter내 CRE/ATF sit

1) ATF3에 의한 adiponectin receptors 발현 저해 연구
① 간과 근육세포에서 ER stress inducer인 thapsigargin을 처리하면 ATF3는 증가하면 반면 adiponectin receptor 1,2는 감소하였음 ② ATF3의 직접적인 영향을 위해 ATF3를 과발현하였을때도, adiponectin receptor 1,2의 발현이 감소하였음 ③ ATF3는 adiponectin receptor 1,2의 promoter의 활성을 감소시켰으며, ATF3가 이들 promoter내 CRE/ATF site에 binding함을 EMSA와 chromatin immunoprecipitation으로 확인하였음 ④ ATF3는 ER stress, 고혈당, TNF-α등에 의한 adiponectin receptor 2의 발현감소에 관여함을 밝힘
2) ATF3에 의한 PDX-1 저해 연구
① 췌장베타세포 MIN6N에 ATF3는 PDX-1과 PDX-1 target 유전자 insulin의 발현을 감소시킴을 western blot과 immunostaining으로 확인하였고, 이는 ATF3가 PDX-1 promoter를 저해함으로써 발현을 감소시킴을 알 수 있었음 ③ 또한 ATF3는 PDX-1의 전사활성을 감소시켰으며, 이는 ATF3가 PDX-1과 결합하여 p300 coactivator가 PDX-1 과 결합하는 것을 저해하여, p300의 coactivation을 저해함으로써 일어남을 확인하였음
3) ATF3 chip-on chip을 통한 target 유전자 발굴과 기능 유추
① ATF3 chip-on chip을 행해 ATF3 target 유전자들을 확인하였고, 이들을 기능별로 분류하였을 때 ATF3는 지방세포분화, ER stress response, immune response, apoptosis 등에 관여함을 알 수 있었고 ② 실질적으로 지방세포 3T3-L1에 ATF3를 과발현시키면 3T3-L1 분화가 억제됨을 확인하였음 ③ ATF3의 coregulator인 CREB을 확인하여 CREB이 adiponectin 발현을 증가시킴을 adiponectin promoter 분석을 통해 확인하였으며, ATF3는 CREB과 결합하여 CREB의 전사활성을 억제함으로써 adiponectin 발현을 감소시킴을 알 수 있었음
4) ATF3 과발현 동물에서 당뇨발병
① ATF3를 aP2 promoter을 이용하여, 지방조직 특이적으로 과발현시킨 tg mice을 제작하여, 백색 및 갈색지방에서 ATF3가 과발현됨을 확인하였고 ② ATF3 과발현 지방조직은 control mice에 비해 지방세포의 크기가 커졌으며, adiponectin 및 UCP-1의 발현이 감소되었음

Abstract ▼

1) Negative regulation of adiponectin receptor (AdipoR) 1,2 by ATF3
Thapsigargin, a stimulator of ATF3 expression as an inducer of ER stress, decreased AdipoR1,2 expression in insulin sensitive cells (HepG2, C2C12) and insulin secreting cells (MIN6N8). Furthermore, overexpression of lentivirus ca

1) Negative regulation of adiponectin receptor (AdipoR) 1,2 by ATF3
Thapsigargin, a stimulator of ATF3 expression as an inducer of ER stress, decreased AdipoR1,2 expression in insulin sensitive cells (HepG2, C2C12) and insulin secreting cells (MIN6N8). Furthermore, overexpression of lentivirus carrying-ATF3 decreased AdipoR1,2 expression in those cells, demonstrating that ATF3 downregulates AdipoR1 expression. Both thapsigargin treatment and ATF3 expression repressed AdipoR1,2 promoter activity. ATF3 directly binds to AdipoR1,2 promoter, which was revealed by EMSA and chromatin immunoprecipitation.
2) ATF3 represses PDX-1 activity in pancreatic beta cells
Both tunicamycin treatment and overexpression of ATF3 decreased the PDX-1 level in the pancreatic beta cells, MIN6N8. ATF3 significantly inhibited PDX-1-stimulated transactivation of reporter plasmids containing PDX-1 binding element (PBE) promoter and glucokinase, a PDX-1 target gene promoter. ATF3 interacted with PDX-1 and effectively inhibited p300-mediated transcriptional coactivation of PBE containing promoter. In conclusion, ATF3 downregulates PDX-1 expression and represses PDX-1-mediated transactivation throughinhibition of p300-stimulated coactivation, which may lead to beta cell dysfunction induced by ER stress
3) Characterization of ATF3 target genes by ATF3 chip on-chip
ATF3 target genes were characterized and functionally analyzed by vhip on-chip. The genes associated with adipocyte differentiation, ER stress response, immune response, and apoptosis were found as ATF3 target genes. In practice, overexpression of ATF3 in 3T3-L1 cells inhibited the differentiation of 3T3-L1. cAMP-responsive element binding protein (CREB) which acts as ATF3 coregulator, activated adiponectin expression. However, ATF3 interacted with CREB, and inhibited the CREB-activated adiponectin expression.
4) Construction of adipocyte-specific ATF3 overexpressed mice
To see effect of ATF3 on the development of type 2 diabetes, transgenic mouse that overexpresses ATF3 in adipose tissue specifically, was constructed. The size of adipose tissues in transgenic mice is larger than that in control mice.

목차 Contents

• 중견연구자지원사업(핵심연구) 최종보고서 ... 1
• 목차 ... 3
• Ⅰ. 연구계획 요약문 ... 4
• 1. 국문요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구결과 요약문 ... 5
• 1. 국문요약문 ... 5
• 2. 영문요약문 ... 6
• Ⅲ. 연구내용 및 결과 ... 7
• 1. 연구개발과제의개요 ... 7
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 9
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 10
• 4. 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 62
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 64
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 64
• 7. 주관연구책임자 대표적 연구실적 ... 65
• 8. 참고문헌 ... 65
• 9. 연구성과 ... 67