초록 ▼

○ [제1세부]
- 형질전환 돼지의 유즙으로부터 생리활성이 있는 시료 tgEPO의 고순도 분리정제를 통하여 tgEPO의 유효성 평가 지원용 시료 생산
- 설치류 및 영장류 이용 tgEPO의 유효성 및 혈액학적 독성 평가 실시
○ [제1협동]
- EPO 형질전환 돼지의 계대번식 및 계통유지
- 실험용 유즙 채취 및 안정적 공급
○ [제2협동]
- I n vitro 및 in vivo bioassay
- 약동학 검사 및 수용체 binding assay 시스템 구축
- 조영제의 nephrop

○ [제1세부]
- 형질전환 돼지의 유즙으로부터 생리활성이 있는 시료 tgEPO의 고순도 분리정제를 통하여 tgEPO의 유효성 평가 지원용 시료 생산
- 설치류 및 영장류 이용 tgEPO의 유효성 및 혈액학적 독성 평가 실시
○ [제1협동]
- EPO 형질전환 돼지의 계대번식 및 계통유지
- 실험용 유즙 채취 및 안정적 공급
○ [제2협동]
- I n vitro 및 in vivo bioassay
- 약동학 검사 및 수용체 binding assay 시스템 구축
- 조영제의 nephropathy 방지 효과 검정

Abstract ▼

The purpose of this study was the development of high purity purification technology, the assay of in vivo biological activity, and the efficacy test in the laboratory animals with the erythropoietin (tgEPO) derived from the milk of transgenic pig. This research was divided into three tasks: The fir

The purpose of this study was the development of high purity purification technology, the assay of in vivo biological activity, and the efficacy test in the laboratory animals with the erythropoietin (tgEPO) derived from the milk of transgenic pig. This research was divided into three tasks: The first was 'the development of high purity purification technology and efficacy test of the tgEPO'. It involved the purification of highly purified tgEPO from the milk of transgenic pig and then subjected to the efficacy test by using rodent anemic models and cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis). The second was 'breeding of transgenic pig and collection of the milk from transgenic pig and providing it to the research'. It was aimed to establish herds of human EPO-transgenic pigs, to collect the milk containing the tgEPO, and thus to be subjected to the purification of tgEPO. The last was 'the assay of in vivo biological activity for the biopharmacoceutical material (tgEPO)'. It involved in vivo pharmacokinetics assay of tgEPO with rodent and test of protective effect of tgEPO against nephropathy induced by contrast media. As a representative result, when tgEPO was used for the assessments of efficacy and hematological toxicity evaluation in rodent anemic models and cynomolgus monkeys, the erythrogenic effect was shown especially in monkeys. In addition, any hematological toxicity was not detected in both rodents and monkeys. However, the half-life of tgEPO was significantly shorter than the cases of AranespⓇ and dimeric EPO. Furthermore, when HK293 cells were cultured with the addition of contrast media and tgEPO, the viability of cells was increased by the treatment of tgEPO. Consequently, these results showed that there was no hematological toxicity of tgEPO in rodents and cynomolgus monkeys, and there was erythropoiesis activity confirmed in the experiments of rodents and primates.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 5
• 제1장 서 론 ... 6
• 제1절 연구개발의 필요성 ... 6
• 제2절 연구개발의 목표 및 내용 ... 7
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 8
• 제1절 연구개발 수준의 국내외 현황 ... 8
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 10
• 제1절 형질전환 동물유래의 바이오 신약물질 (tgEPO)의 유효성 평가를 위한 전처리 과정 및 분리정제 방법 결정 ... 10
• 제2절 정상 마우스 및 빈혈모델 마우스에서 tgEPO의 투여에 따른 적혈구 신생 효과 검정 ... 11
• 제3절 형질전환 돼지 유래의 tgEPO의 유효성 평가를 위하여 빈혈 질환 모델 설치류를 이용한 생리학적 활성 및 혈액독성을 평가 ... 12
• 제4절 영장류 이용 tgEPO의 유효성 및 혈액학적 독성 평가 실시 ... 20
• 제5절 형질전환 돼지 계대번식 및 유즙채취 ... 36
• 제 6절 바이오 신약 물질(EPO)의 생리학적 활성 비교/평가 ... 39
• 제4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 46
• 제1절 목표대비 달성도 ... 46
• 제2절 정량적 성과 ... 47
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 48
• 제6장 중요 변동사항 ... 49
• 제7장 참고문헌 ... 50
• [참고 1] 연차평가 지적사항 및 조치결과 ... 52
• [참고 2] 주요연구 성과 ... 53