초록 ▼

□ 연구 목적
- 기존 간/폐흡충 진단검사법의 단점 및 문제점을 보완하기 위하여 민감도와 특이도가 뛰어나며 간편하고 신속한 간/폐흡충 진단키트를 개발하고자 함
□ 세부과제별 수행 내용
- 1세부: 간흡충 진단을 위한 고감도 특이항원 개발
· 성충체 생산, 특이항원 정제, 단클론항체 제작, 재조합단백질 제조 및 정제, 환자 혈청 제공
- 2세부: 폐흡충 진단을 위한 고감도 특이항원 개발
· 성충체 생산, 특이항원 정제, 단클론항체 제작, 재조합단백질 제조 및 정제, 환자 혈청 제공
- 3세부: 간

□ 연구 목적
- 기존 간/폐흡충 진단검사법의 단점 및 문제점을 보완하기 위하여 민감도와 특이도가 뛰어나며 간편하고 신속한 간/폐흡충 진단키트를 개발하고자 함
□ 세부과제별 수행 내용
- 1세부: 간흡충 진단을 위한 고감도 특이항원 개발
· 성충체 생산, 특이항원 정제, 단클론항체 제작, 재조합단백질 제조 및 정제, 환자 혈청 제공
- 2세부: 폐흡충 진단을 위한 고감도 특이항원 개발
· 성충체 생산, 특이항원 정제, 단클론항체 제작, 재조합단백질 제조 및 정제, 환자 혈청 제공
- 3세부: 간/폐흡충 항체 진단용 신속진단키트 개발
· 1, 2세부로부터 받은 항원의 유효성 검증, 신속진단키트 개발, 키트의 성능 검증
□ 연구성과 및 성능평가
- 간/폐흡충 조항원에서 정제한 특이항원을 이용하여 신속진단키트를 개발함
- 폐흡충 신속진단키트
· ELISA와의 일치율은 양성검체가 약 85.5%, 음성검체가 약 96%를 나타내어 두 방법 간의 결과 일치율은 약 91%임
- 간흡충 신속진단키트
· ELISA와의 일치율은 약 90%이나, 검체이력에 따른 양성 일치율은 다소간의 차이를 나타냄. 충란검사법과의 양성 일치율은 1차 테스트에서는 약 56%, 2차 테스트에서는 약 12.3%를 나타내 검체이력에 따라 많은 차이를 나타냄
□ 연구결과 고찰 및 결론
- 본 과제로부터 개발된 폐흡충 신속진단키트의 경우, 정확도 (민감도, 특이도)가 효소면역측정법(ELISA)과 90%이상으로서 우수하여 폐흡충증 진단을 위한 표준진단법으로서 현장에서 널리 사용할 수 있을 것으로 판단됨
- 본 과제로부터 개발된 간흡충 신속진단키트의 경우, 효소면역측정법과의 일치율은 90%이상이었으나, 변을 이용한 충란검사법과는 일치도가 약 12 ~ 57%선으로 비교적 낮았음. 또한, 다른 혈청학적 진단법인 효소면역측정법과 충란검사법과의 일치도는 약 4 ~ 60%선이었음
- 혈청학적인 진단법과 충란검사법의 일치율이 낮은 이유는 변에서 직접 검출하는 충란 검사법과 혈청학적 검사법의 근본적인 차이에서 기인한 것으로 사료됨. 변내의 충란의 유무 및 충란 수와 혈액내의 항체 역가 사이에는 다음과 같은 이유로 상관성이 낮은 것으로 사료됨
· 충란을 배출하더라도 담낭의 특수성 때문에 생체내 기관에서의 낮은 항원성을 보임
· 초기 감염의 경우 혈중의 높은 항체역가 존재
· 충란을 배출하지 않은 상태의 감염기
- 본 과제로부터 개발된 간흡충증 신속진단키트의 경우, 현장에서의 스크리닝법으로 충란검사법과 상호 보완적 사용되면 보다 정확한 진단이 이루어질 것으로 사료됨

Abstract ▼

□ Purpose of this study
- To development of the rapid diagnostic kits having the best sensitivities and specificities on the detection of C. sinensis and P. westermani
- To solve the disadvantages of the current diagnostic kits
□ Research of each part
- Part 1: development of high sensit

□ Purpose of this study
- To development of the rapid diagnostic kits having the best sensitivities and specificities on the detection of C. sinensis and P. westermani
- To solve the disadvantages of the current diagnostic kits
□ Research of each part
- Part 1: development of high sensitive and specific antigens for the diagnosis of C. sinensis, including several recombinant proteins as well as its somatic antigens
- Part 2: development of high sensitive and specific antigens for the diagnosis of P. westermani, including several recombinant proteins as well as its somatic antigens
- Part 3: development of the rapid diagnostic device using the antigen raw materials from Part 1 and Part 2. Evaluation of the kit performance
□ Results and efficacy of the kits
- Successful development of the rapid diagnostic kits using the specific somatic antigens from C. sinensis and P. westermani
- Kit for P. westermani
· 85.5% and 96% corelationship with ELISA method on positive and negative sapmles, respectively. Overall agreement is 91%
- Kit for C. sinensis
· 90% corelationship with ELISA having high variability on specimen source
· corelationship with stool examination: 56% of 1st evaluation and 12.3% of 2nd evaluation
□ Discussion and conclusions
- In the case of the diagnostic kit for P. westermani coming from this project, the kit can be effectively used in the field as the standard method because it has very good accuracy (90% of sensitivity and specificity) compared with ELISA method and the properties of ease to use and simple method
- In the case of the diagnostic kit for C. sinensis coming from this project, its correlation ratio is 90% with ELISA method but 12 ~ 57% with stool examination. And, agreement of ELISA and stool testing is just 4 ~ 60%
- The reasons of the low correlation between serological methods (such as rapid test in this project and ELISA) and stool testing are coming from their original detection methods as followed;
· Very low or rare antigenicity of C. sinensis from organ properties of gall even eggs are secreted
· Normally, the antibody titer is high but eggs are not detectable in the case of early infection,
· no-egg infection stages
- Finally, in the case of the diagnostic kit for C. sinensis, the kit can be effectively used in the field as the screening method because the kit can compensate the stool test to get more exact results.

목차 Contents

• 학술연구용역사업 최종결과보고서 ... 1
• 목차 ... 2
• I. 연구개발결과 요약문 ... 3
• 최종결과보고서 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• II. 학술연구용역사업 연구결과 ... 5
• 제1장. 최종 연구개발 목표 ... 5
• 제2장. 최종 연구개발 내용 및 방법 ... 9
• 제3장. 최종 연구개발 결과 ... 11
• 제4장. 연구결과 고찰 및 결론 ... 34
• 제5장. 연구성과 ... 38
• 제6장. 참고문헌 ... 39
• 제7장. 첨부서류 ... 41
• III. 제1세부연구개발과제 연구결과 ... 42
• 제1장. 제1세부연구개발과제의 연구개발 목표 ... 43
• 제2장. 제1세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 45
• 제3장. 제1세부연구개발과제의 연구개발 결과 ... 49
• 제4장. 제1세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 56
• 제5장. 참고문헌 ... 57
• IV. 제2세부연구개발과제 연구결과 ... 59
• 제1장. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 59
• 제2장. 제2세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 61
• 제3장. 제2세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ... 65
• 제4장. 제2세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 69
• 제5장. 참고문헌 ... 70
• V. 제3세부연구개발과제 연구결과 ... 71
• 제1장. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발 목표 ... 72
• 제2장. 제3세부연구개발과제의 연구대상 및 방법 ... 73
• 제3장. 제3세부연구개발과제의 최종 연구개발 결과 ... 74
• 제4장. 제3세부연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 86
• 제5장. 제3세부연구개발과제의 연구성과 ... 89
• 제6장. 참고문헌 ... 90