보고서 정보
주관연구기관 |
농림수산검역검사본부 |
연구책임자 |
구복경
|
참여연구자 |
최정수
,
지현화
,
박미영
,
김영일
,
김혜지
,
임숙경
,
정석찬
,
권진욱
,
이경섭
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2005-12 |
과제시작연도 |
2005 |
주관부처 |
농림부 |
사업 관리 기관 |
농림기술관리센터 Agricultural Research & Development Promotion Center |
등록번호 |
TRKO201300008671 |
과제고유번호 |
1380000443 |
사업명 |
수의과학검역원(수의과학기술개발) |
DB 구축일자 |
2013-05-20
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키워드 |
닭고기(수입/국산).항생제 내성균.Camphylobacter spp.(jejuni coli).
|
초록
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□ 수입 및 국내 닭고기로부터 Campylobacter spp.의 분리․동정 및 항생제 내성 분포 조사(2004~05) :
◦ 수입 및 국내 닭고기로부터 Campylobacter spp.(jejuni/coli) 분리
- 냉동육 : 미국, 영국, 프랑스, 태국, 덴마크, 브라질, 네덜란드 등 7개국 43개 작업장에서 C. jejuni 125주, C. coli 34주 분리
- 냉장육 : 부산, 전남 등 9개 지역 18개 작업장에서 C. jejuni 56주, C. coli 51주 분리
◦ 분리된 Campylobact
□ 수입 및 국내 닭고기로부터 Campylobacter spp.의 분리․동정 및 항생제 내성 분포 조사(2004~05) :
◦ 수입 및 국내 닭고기로부터 Campylobacter spp.(jejuni/coli) 분리
- 냉동육 : 미국, 영국, 프랑스, 태국, 덴마크, 브라질, 네덜란드 등 7개국 43개 작업장에서 C. jejuni 125주, C. coli 34주 분리
- 냉장육 : 부산, 전남 등 9개 지역 18개 작업장에서 C. jejuni 56주, C. coli 51주 분리
◦ 분리된 Campylobacter jejuni, coli 동정
- 생화학적 성상 ․ kit 및 PCR 동정(multiplex PCR)
수입 및 국내 닭고기에서 분리된 C. jejuni, C. coli 모두 catalase, oxidase양성을 나타내었고, C. jejuni는 hippurate hydrolysis에 양성을 나타내었으며 분리균주 모두 25℃ (미호기), 37℃(호기)에서는 배양이 되지 않았고 반면에 42℃미호기 상태에서는 잘 자랐으며 Singlepath kit(Merck)에 양성을 보였음 multiplex PCR 결과 C. jejuni에서는 323bp, C. coli에서는 126bp 크기의 특이적인 밴드를 확인하였음
◦ 동정된 Campylobacter jejuni, coli 항생제 감수성 검사 (agar gel diffusion test)
- 냉동육(수입)
C. jejuni : 감수성 : Erythromycin(87.8%), Tetracycline(65%), Quinolones(ENO, (125) NOR, CIP : 78.4~80.8%)
C. coli : 감수성 : Erythromycin(87.9%), Tetracycline(66.7%), Quinolones(ENO, (34) NOR, CIP : 79.4~82.4%)
- 냉장육(국내산)
C. jejuni : 감수성 : Erythromycin(100%), Tetracycline(16.1%), Quinolones(ENO, (56) NOR, CIP : 19.6~30.4%)
C. coli : 감수성 : Erythromycin(52.9%), Tetracycline(17.6%), Quinolones(ENO, (51) NOR, CIP : 9.8~25.5%)
◦ 5종의 항생제(E, TE, ENO, NA, CIP)에 대한 MIC(agar dilution method) 감수성 결과
: 수입육 C. jejuni, coli : E(100%), ENO(71%), TE(59%), NA(69%), CIP(71%) (75)
국내산 C. jejuni, coli : E(86%), ENO(23%), TE(8.6%), NA(5.7%), CIP(11.4%) (35)
◦ RAPD 기법을 이용한 국내산 닭고기 역학적 특성 조사
1254, 1281+1283+1290 primer 이용 국내산 3개 작업장에서 분리된 Campylobacter spp.(jejuni, coli)와 냉각수간의 역학적 관계를 조사한 결과 동일 작업장에서 동일균주로 판명된 균주는 다른 primer를 사용하더라도 동일한 패턴을 보였고 또한 분리주들이 냉각수와 같은 패턴을 보여 냉각수가 주 오염원임을 알 수 있었으며 수입산 닭고기의 경우에서도 4개의 작업장에서 분리된 균주들에서도 각각 다른 primer를 사용하더라도 동일한 패턴으로 분류되어 primer간의 변별력이 아주 높아 역학적 특성규명에 RAPD가 유용할 것으로 여겨짐
목차 Contents
- 수의과학기술개발연구사업 연구과제 최종보고서 ... 1
- I. 연구배경 및 목표 ... 3
- 1. 연구배경 ... 3
- 2. 연구최종목표 ... 4
- 3. 연차별 연구개발 목표 및 내용 ... 5
- II. 재료 및 방법 ... 6
- 1. 재료 ... 6
- 2. 연구전략 및 방법 ... 6
- III. 연구결과 ... 8
- 1. Thermophilic Campylobacter spp. 분리배양 ... 8
- 2. 수입국 작업장별 닭고기 검사 현황 ... 9
- 3. 국내 작업장별 닭고기 검사현황 ... 10
- 4. 수입국별 thermophilic Campylobacter spp. 분리 내역 ... 10
- 5. 국내 작업장별 thermophilic Campylobacter spp. 분리 내역 ... 11
- 6. 수입 및 국내 닭고기에서 thermophilic Campylobacter spp. 분리율 조사 ... 11
- 7. 수입 및 국내 닭고기에서 분리된 thermophilic Campylobacter spp.의 생화학적 성상 ... 12
- 8. Multiplex PCR 기법이용 수입산 닭고기에서 분리된 thermophilic Campylobacter spp. 동정 ... 13
- 9. Multiplex PCR 기법이용 국내산 닭고기에서 분리된 thermophilic Campylobacter spp. 동정 ... 14
- 10. 수입 및 국내 닭고기에서 분리된 Campylobacter spp.의 항생제 디스크 감수성 및 내성 비교조사 ... 15
- 11-1. 항생제 디스크 내성 패턴별 thermophilic Campylobacter spp. 분리율(1) ... 16
- 11-2. 항생제 디스크 내성 패턴별 thermophilic Campylobacter spp. 분리율(2) ... 17
- 11-3. 항생제 디스크 내성 패턴별 thermophilic Campylobacter spp. 분리율(3) ... 17
- 12. 항생제 디스크 이용 수입국가 작업장별 Quinolone계열 항생제 내성 조사 ... 19
- 13. 배양조건 및 균 접종량에 따른 agar dilution method의 MIC range 값 비교 ... 20
- 14. Agar dilution method를 이용한 CLSI QC 균주 MIC range 값 비교 ... 20
- 15. Agar dilution method, broth microdilution method와의 MIC 값 일치율 비교조사 ... 21
- 16. Agar dilution method, E-Test와의 MIC 값 일치율 비교조사 ... 22
- 17. Agar dilution method 기준 disc diffusion test, E-Test, broth microdilution method 간의 항생제 감수성․내성 비교 및 상관관계 조사 ... 22
- 17. 반복적인 Subculturing을 통한 Campylobacter spp. 분리균주 항생제 내성 변이율 조사 ... 23
- 18. Agar dilution method를 이용한 수입산․국내산 thermophilic Campylobacter spp. 분리균주의 감수성 및 내성 비교 ... 23
- 19. RAPD 기법을 이용한 역학적 특성규명 ... 26
- IV. 고찰 ... 27
- V. 결론 ... 29
- VI. 참고문헌 ... 31
- VII. 연구결과 활용 ... 34
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