초록 ▼

본 연구과제에서는 면역항암작용과 백신항원에 대한 면역증강활성이 확인된 LPS 유도체인 CIA05의 내재성면역 증강작용 기전을 규명함으로써 향후 효과적인 감염성질환의 예방 및 바이러스성 감염병 치료백신의 개발에 활용할 수 있도록 하는 데에 그 목적이 있음. 본 과제에서는 사람과 마우스에서 CIA05의 monocyte, macrophage 및 수지상 세포의 활성화 및 성숙 유도 작용을 분석하며, CIA05의 면역활성에서의 TLR4 의존성을 확인하였음. CIA05는 사람 단핵구 세포주와 사람 monocyte에서 cytokine 분비 유도

본 연구과제에서는 면역항암작용과 백신항원에 대한 면역증강활성이 확인된 LPS 유도체인 CIA05의 내재성면역 증강작용 기전을 규명함으로써 향후 효과적인 감염성질환의 예방 및 바이러스성 감염병 치료백신의 개발에 활용할 수 있도록 하는 데에 그 목적이 있음. 본 과제에서는 사람과 마우스에서 CIA05의 monocyte, macrophage 및 수지상 세포의 활성화 및 성숙 유도 작용을 분석하며, CIA05의 면역활성에서의 TLR4 의존성을 확인하였음. CIA05는 사람 단핵구 세포주와 사람 monocyte에서 cytokine 분비 유도를 활성화 시키고, LPS에 비하여 초기 염증반응은 낮고 T cell activation에 관여하는 IL-12p40의 분비활성은 여전히 가지고 있다는 것을 확인하였음. 또한 CIA05는 monocyte의 migration을 증가시켜 수지상 세포 활성화시키는 작용을 할 것으로 생각됨. 사람 monocyte로 부터 수지상 세포로 분화시키고 LPS와 같이 미성숙 수지상 세포를 활성화시키는지 알아봄. 분석 결과 CIA05는 미성숙 수지상 세포를 활성화 시켜 MHC class Ⅱ molecule과 co-stimulatory molecule (CD80, CD86)의 발현을 증가시킴으로서 in vivo에서 항원제시기능을 증강시키는 작용을 할 것으로 생각됨. 마우스에서 LPS 유도체의 내재성 면역활성 작용 기전을 분석하기 위해 마우스에 LPS와 CIA05를 농도별로 주사하고 in vivo 혈청내의 cytokine 및 chemokine 분비량을 측정하였음. CIA05는 LPS에 비하여 pro-inflammatory cytokine인 TNF-α, IL-6 분비량이 매우 낮은 반면에 immune cell을 recruiting 하는데 관련된 cytokine과 chemokine (IP-10, MIG, MCP-1, RANTES) 및 세포성 면역반응을 유도하는 cytokine (IFN-γ, IL-12p40) 활성은 우수한 것으로 생각됨. 또한 CIA05는 마우스 골수유래 수지상 세포를 활성화 시켜 co-stimulatory molecule (CD40, CD80, CD86)의 발현을 증가시킬 뿐만 아니라 cytokine (TNF-α, IL-12p40, IL-10) 분비량도 촉진시킴으로서 앞서 사람 수지상 세포에서 보였던 결과를 마우스에서 다시 한 번 확인할 수 있었음. 이렇게 CIA05에 의해 성숙화된 수지상세포는 naive한 CD4⁺ T 세포를 Th1 세포로 분화 유도시켜 in vivo에서 세포성 면역을 활성화시키는 작용을 확인하였음. CIA05의 면역증강작용에서 TLR4 의존성을 분석하기 위해 TLR4 결핍마우스(C3H/HeJ)에 KLH 항원과 같이 LPS 또는 CIA05를 혼합하여 근육 주사하고 항체역가로 면역반응을 분석하였음. CIA05 혼합 투여군의 항체역가와 항원 단독 투여군의 역가가 비슷한 것으로 보아 CIA05는 TLR4를 통해 항원에 대한 면역 보조 활성을 나타낸다는 것을 알 수 있었음. 앞서 CIA05에 의한 수지상 세포 활성화 즉, antigen-presenting cell (APC) 활성화 또한 TLR4에 의존적인지 분석하였음. CIA05는 TLR4를 통하여 macrophage, B 세포, 마우스 골수유래 수지상 세포를 활성화 시키는 것을 알 수 있었음. 결론적으로 CIA05는 TLR4 수용체를 통해 사람과 마우스의 내재면역세포 (monocyte, macrophage 및 수지상세포)를 활성화시키고 naive한 CD4⁺ T 세포를 Th1 type 세포로 분화 유도시키는 것으로 나타나 향후 효과적인 감염성질환의 예방 및 바이러스성 감염병 치료백신의 개발에 활용가능성이 높은 것으로 사료됨.

목차 Contents

• 일반연구자지원사업 최종(결과)보고서 ... 1
• 목차 ... 3
• I. 연구결과 요약문 ... 4
• II. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 5
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 7
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 7
• III. 연구성과 ... 8