초록 ▼

I. 연구개발의 필요성
벨케이드는 다양한 암에 적용 가능한 신약이지만 암종에 따라 반응에 차이가 있으며 같은 암종에서도 그 분자유전학적 특성에 따라 약효가 다르게 나타나므로 최적의 치료 성적을 나타내기 위해서는 벨케이드에 대한 감수성을 결정하는 세포내적 요소들에 대한 연구가 필요함. 벨케이드는 26S 프로테오솜 복합체의 효소 활성을 선택적으로 강력하게 억제하는 펩타이드 약제로 혈액암, 다발성 골수종을 비롯하여 최근에는 신장암등 다양한 고형암에서도 적응 가능성이 보고되고 있음. 본 과제에서는 벨케이드 작용을 조절하는 새로운 분자

I. 연구개발의 필요성
벨케이드는 다양한 암에 적용 가능한 신약이지만 암종에 따라 반응에 차이가 있으며 같은 암종에서도 그 분자유전학적 특성에 따라 약효가 다르게 나타나므로 최적의 치료 성적을 나타내기 위해서는 벨케이드에 대한 감수성을 결정하는 세포내적 요소들에 대한 연구가 필요함. 벨케이드는 26S 프로테오솜 복합체의 효소 활성을 선택적으로 강력하게 억제하는 펩타이드 약제로 혈액암, 다발성 골수종을 비롯하여 최근에는 신장암등 다양한 고형암에서도 적응 가능성이 보고되고 있음. 본 과제에서는 벨케이드 작용을 조절하는 새로운 분자 기전을 제시하고 동아시아에서 흔한 NK/T 세포 림프종 (NK/TL)에서 벨케이드에 의한 세포 사멸의 기전을 규명하는 한편, NFkB 활성에 영향을 주는 EBV (Epstein -Barr Virus) 유래 세포 표면 단백질 LMP1 및 하부 신호전달 특성을 분석하여 벨케이드에 대한 반응과의 연관성을 밝히고 임상활용 가능성을 연구하고자 하였음.
II. 연구개발의 내용 및 결과
◎ 여러 종류의 림프종 세포주를 대상으로 LNRP를 과발현시키면 벨케이드에 대해 내성이 증가하며 반면 siRNA로 발현을 억제하면 벨케이드에 대한 감수성이 증가하는 것으로 관찰됨.
◎ LMP1 하부신호전달 경로가 벨케이드에 의한 세포 사멸에 미치는 영향을 알아보고자 대표적인 LMP1 하부신호전달 인자인 AKT 및 NFkB에 대한 억제제를 처리한 결과 AKT 신호전달을 억제한 상태에서 벨케이드에 의한 세포 사멸이 더 증가하는 것으로 나타나 LMP1 신호전달 경로 및 AKt 경로가 벨케이드 작용에 부정적 영향을 미칠 것으로 판단됨.
◎ LNRP의 벨케이드에 대한 내성 조절 기전을 분석한 결과 벨케이드에 내성을 보이는 세포를 대상으로 벨케이드를 처리하면 단독으로는 효과가 없지만 LNRP의 발현을 억제한 상태에서 벨케이드를 처리하면 세포주기에는 특별한 변화가 관찰되지 않았으나 미토콘드리아 막전위를 감소시키고 caspase-3, 7, 8, 9를 활성화시켰으며 세포사멸을 유발함을 확인함. 반대로 벨케이드에 내성이 없는 세포에 LNRP를 과발현 시킨 경우 p65의 인산화가 증가함.
◎ 벨케이드 내성 암세포에 PI3K/Akt 억제제 LY294002를 처리하면 LNRP의 발현이 감소함. 따라서 LNRP가 PI3K/Akt 경로에 의해 조절될 것으로 예상되며 LNRP 활성을 조절함으로써 벨케이드의 작용을 최적화 할 수 있을 것으로 예상됨.
III. 연구개발결과의 활용계획
EBV와 관련된 림프종은 항암화학요법에 불응성인 경우가 많아 그 치료 성적이 매우 불량하고 예후가 좋지 않으나 최근 분자 생물학의 눈부신 발전으로 발암 과정의 단계에서 유전자 상호작용에 의한다는 것이 밝혀지고 있음. 본 연구 과제의 성공적 수행으로 벨케이드에 의한 T 세포 림프종 세포 사멸 현상의 구체적인 기전 규명이 이루어졌으며 그 기전에 관여하는 LNRP와 Akt의 의존성을 분자 수준에서 이해함으로써 T 세포 림프종 발생 및 진행에 대한 치료제 개발에 도움이 될 것으로 기대됨.

Abstract ▼

Epstein-Barr virus (EBV) is a potentially oncogenic human herpesvirus capable of infecting lymphoid and epithelial cells. EBV infection has been associated with multiple diseases, including Burkitt's lymphoma, Hodgkin's disease, lymphoproliferative disorders, certain types of T-cell lymphoma, and na

Epstein-Barr virus (EBV) is a potentially oncogenic human herpesvirus capable of infecting lymphoid and epithelial cells. EBV infection has been associated with multiple diseases, including Burkitt's lymphoma, Hodgkin's disease, lymphoproliferative disorders, certain types of T-cell lymphoma, and nasopharyngeal carcinoma (NPC) and breast cancer. Among the EBV-induced latent proteins, LMP-1 is a transmembrane protein that has been shown to be essential for EBV-induced immortalization of B cells.
Velcade, a proteasome inhibitor, has been clinically approved for the treatment of myeloma and lymphoma. Previous studies have demonstrated that velcade exert anti-tumor activity basically by altering NF-kB activity. Although velcade is known to be a selective proteasome inhibitor, the mechanism of chemo-resistance is poorly understood. We found that Velcade induced apoptosis, which has been shown by caspase-3 cleavage, and PARP degradation in velcade-sensitive Sup-B15 and Jurkat cells. Velcade down-regulated phospho-Akt, -ERK in Sup-B15. To investigate the mechanism of resistance to velcade, we analyzed gene expression profiles of velcade-sensitive and velcade- resistant cells derived from Jurkat cells. Micro array analysis demonstrated that several genes were differentially expressed in velcade-resistant cells. Knockdown of these genes together with velcade effectively induced mitochondrial dysfunction and cell death in velcade-resistant cells. Furthermore, LY204002, an inhibitor of PI3K/Akt pathway, dramatically increased the Velcade-induced cell death in velcade resistant cells. Taken together, we found that the cell death effect of Velcade could be further enhanced by modulating LNRP and/or PI3K/Akt pathway.

목차 Contents

• I. 총괄현황 ... 1
• 표지 ... 2
• 제출문 ... 4
• 목차 ... 5
• 요약서 ... 6
• 요약문 ... 7
• SUMMARY ... 8
• 6. 연구 성과 실적 및 향후 계획 ... 9
• 7. 참여연구원 현황표 ... 10
• II. 총괄연구과제 연구결과 ... 11
• 1. 연구개발과제의 배경 및 필요성 ... 12
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 16
• 3. 연구개발과제의 추진체계 ... 16
• 4. 2차년도 연구개발수행 내용 및 결과 ... 17
• 4. 연구성과 ... 22
• 5. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 23
• 6. 향후 연구성과 추진 계획 ... 23
• 7. 연구개발결과의 파급효과 ... 23
• 8. 연구개발결과의 활용계획 ... 23
• 9. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 24
• 10. 참고문헌 ... 24
• 최종보고서 비공개 승인요청서 ... 26