초록 ▼

Ⅲ. 연구개발의 내용 및 범위
1. 단백질 측정표준 개발
단백질 측정표준 체계구축 사업은 4개의 세부과제로 구성되어 있으며 각 세부별 연구개발의 범위는 다음과 같이 구성되어 있다.
가. 단백질 표준물질 생산기반 구축
- 인성장 호르몬 인증표준물질 후보물질의 FDS 분석
- 내부표준물질용 안정동위원소 표지 단백질 생산을 위한 정제기술 개발
- 바이오 마커(Biomarker) 단백질 생산기반 구축
- 아미노산 인증표준물질 개발
나. 단백질 정량 측정표준기술의 개발
- 아미노산 기반 단백질

Ⅲ. 연구개발의 내용 및 범위
1. 단백질 측정표준 개발
단백질 측정표준 체계구축 사업은 4개의 세부과제로 구성되어 있으며 각 세부별 연구개발의 범위는 다음과 같이 구성되어 있다.
가. 단백질 표준물질 생산기반 구축
- 인성장 호르몬 인증표준물질 후보물질의 FDS 분석
- 내부표준물질용 안정동위원소 표지 단백질 생산을 위한 정제기술 개발
- 바이오 마커(Biomarker) 단백질 생산기반 구축
- 아미노산 인증표준물질 개발
나. 단백질 정량 측정표준기술의 개발
- 아미노산 기반 단백질 정량기술 개발
- 단백질 측정기술의 개발
- 당단백질의 성분당 분석법의 개발
- 펩타이드 기반 단백질 정량기술 개발 및 동위원소 표지 기술 개발
다. 원소기반 단백질 정량분석기술의 개발
- 황 기반 단백질 절대정량 분석법 개발
- CRIF1 상호작용 단백질 동정 및 CRIF1 기능 발굴
라. 단백질 품질관리 기반 구축
- 인성장 호르몬(hGH)의 활성 측정
- 숙주세포 유래 핵산 불순물 정량 분석
- 인 분석 기반 단백질의 활성 측정 방법 개발
- 신개념 단백질 측정 기술 개발
2. 바이오·임상 측정표준 개발
바이오·임상 측정표준 사업의 세부 연구사업 및 범위는 다음과 같다.
가. 핵산 및 세포 측정표준 개발 및 기술 고도화
- DNA 계수정량기술의 고도화
- NMP 분석 기반 RNA 정량 기술 개발
- DNA 손상반응의 정량적 측정기술 개발
- 식중독 원인균의 유전체 DNA 확보 및 정량연구
- 세포 측정 표준 확립을 위한 기술 개발
나. 인증표준물질 개발 및 국제비교
- 바이오·임상 인증표준물질(CRM) 개발
- 바이오·임상분야 국제적 동등성 확보를 위한 국제표준활동
다. 임상진단 측정표준 기술 개발
- 상용 진단검사 교정액 및 대조구 인증값 설정
- 고지혈증 triglyceride CRM 인증값 설정
- 심장질환 및 골다공증 마커 측정표준 개발

Abstract ▼

Ⅲ. Contents and Scope
1. Development of protein measurement standards
Development of protein measurement standards project consists of four sub projects and the contents and scope of each project were as follows.
A. Establishment of production platform for protein reference materials
(1)

Ⅲ. Contents and Scope
1. Development of protein measurement standards
Development of protein measurement standards project consists of four sub projects and the contents and scope of each project were as follows.
A. Establishment of production platform for protein reference materials
(1) Analysis studies of forced degradation samples using hGH certified reference material
(2) Development of production and purification technologies for stable isotope labeled internal reference material
(3) Establishment of own production technology for novel Biomarker protein
(4) Development of a L-Tyrosine amino acid CRM
B. Establishment of Measurement standards for protein quantitation
(1) Establishment of the procedure for quantification of hGH and EPO based on amino acid composition analysis using ID-MS
(2) Development of peptide-based quantitative method for the determination of hGH in serum matrix
(3) Development of HPAEC-PAD method for analyzing glycan compositions of EPO
(4) Development of dual lectin-based enrichment method for N-glycopeptides using field-flow fractionation
(5) Development of on-line microbore hollow fiber enzyme reactor (mHFER)
(6) Development of mHFER-based 18O-labeling method for peptide-based quantitative approach
C. Element-based approach for absolute protein quantification
(1) Sulfur-based absolute quantification of proteins
(2) Identification of CRIF1-interacting proteins and elucidation of novel CRIF1 functions
D. Establishment of standards for quality assessment of proteins
(1) Measurement of hGH activity by cell proliferation assay
(2) Quantification of residual host cell DNA impurity in protein drugs
(3) Traceable measurement of a protein kinase activity by elemental phosphorous analysis
(4) Development of a new measurement principle for trace level proteins
2. Development of bio-clinical measurement standards Development of bio-clinical measurement standards project consists of three sub projects and the contents and scope of each project were as follows.
A. Development and advancement of measurement standards for nucleic acids and cells
(1) Advancement of DNA quantitation by counting method
(2) Development of RNA quantitation based on NMP analysis
(3) Development of quantitative technique to measure DNA damage response
(4) Isolation of genomic DNA from foodborne bacteria and DNA quantification
(5) Advancement of GMO analysis method
(6) Development of techniques to measure cellular properties
B. Development of CRMs and international comparison
(1) Development CRMs
(2) International comparison and collaboration for measurement equivalence
C. Development of techniques for clinical measurement
(1) Provision of reference values to calibrator and control used in commercial diagnostics
(2) Certification of high-level triglyceride CRM
(3) Development of measurement standards for heart and bone disease markers

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 3
• 보고서 요약서 ... 5
• 요약문 ... 7
• SUMMARY ... 16
• CONTENTS ... 26
• 목차 ... 27
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 31
• 제 1 절 연구개발의 필요성 ... 31
• 1. 연구개발 대상 기술의 중요성 ... 31
• 제 2 절 연구개발의 범위 ... 36
• 1. 단백질 측정표준 체계 구축 ... 36
• 2. 바이오.임상 측정표준 체계 구축 ... 37
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 38
• 제 1 절 국내의 기술개발 동향 ... 38
• 1. 단백질 산업 기술개발 동향 ... 38
• 2. 바이오·임상 측정기술 연구개발 동향 ... 40
• 제 2 절 해외 연구 및 기술개발 동향 ... 41
• 1. 단백질 측정표준 개발 ... 41
• 2. 바이오·임상 측정표준 개발 ... 44
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 46
• 제 1 절 단백질 측정표준 체계 구축 ... 46
• 1. 단백질 표준물질 생산기반 구축 ... 46
• 가. 인성장 호르몬 CRM 후보물질의 FDS 분석 ... 46
• 나. 내부표준물질용 안정동위원소 표지 단백질 생산을 위한 정제기술 개발 ... 62
• 다. Biomarker 단백질 생산기반 구축 ... 90
• 라. 아미노산 인증표준물질 개발 ... 105
• 마. 참고문헌 ... 133
• 2. 단백질 정량 측정표준기술의 개발 ... 136
• 가. 아미노산 기반 단백질 정량기술 개발 ... 136
• 나. 단백질 측정기술의 개발 ... 171
• 다. 참고문헌 ... 232
• 3. 원소기반 단백질 정량분석기술의 개발 ... 236
• 가. 황 기반 단백질 절대정량 분석법 개발 ... 236
• 나. CRIF1 상호작용 단백질 동정 및 CRIF1 기능 발굴 ... 254
• 4. 인 성장 호르몬의 활성 측정 ... 257
• 가. 인 성장 호르몬 (hGH) ... 257
• 나. 인 성장 호르몬 (hGH)의 활성 측정 ... 257
• 다. hGH 활성 측정을 위한 새로운 세포주 개발 ... 269
• 라. 신개념 세포 증식 시험을 통한 hGH 활성 측정 ... 280
• 마. 숙주세포 유래 핵산 불순물 정량 분석 ... 285
• 바. 인 분석 기반 단백질의 활성 측정 방법 개발 ... 296
• 사. 신개념 단백질 측정 기술 개발 ... 319
• 아. 참고문헌 ... 339
• 제 2 절 바이오/임상측정표준 기반기술 구축 ... 342
• 1. 핵산 및 세포 측정표준 개발 및 기술 고도화 ... 342
• 가. DNA 계수정량 기술의 고도화 ... 342
• 나. NMP 분석 기반 RNA 정량 기술 개발 ... 355
• 다. DNA 손상반응의 정량적 측정기술 개발 ... 366
• 라. 식중독 원인균의 유전체 DNA 확보 및 정량연구 ... 377
• 마. GM 옥수수 Bt11 표준물질용 플라스미드 DNA 2종 개발 ... 390
• 바. 세포 측정 표준 확립을 위한 기술개발 ... 393
• 사. 참고문헌 ... 397
• 2. 인증표준물질(CRM) 개발 및 국제비교 ... 399
• 가. 4종 NMP CRM 재인증 ... 399
• 나. GMO (유전자변형생물) 인증표준물질 개발 ... 406
• 다. 유전자 메틸화 측정 국제비교 주관 ... 427
• 라. Multiple RNA panel 정량 국제비교(CCQM P103.1) 참가 ... 434
• 마. cTnI 단백질의 면역학적 정량 (CCQM P58.1) 국제 비교 참가 ... 443
• 바. L-Valine 순도분석에 대한 국제비교 참가 ... 453
• 사. 참고문헌 ... 466
• 3. 임상진단 측정표준 기술 개발 ... 468
• 가. 진단시약업체에 대한 측정표준 보급 ... 468
• 나. 고난도 질환 (심장질환/골다공증) 진단 마커 분석법 확립 기반 연구 ... 477
• 다. ID-MS를 이용한 고지혈증 triglyceride CRM 인증 ... 488
• 라. 참고문헌 ... 505
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 507
• 제 1 절 단백질 측정표준 체계 구축 ... 507
• 제 2 절 바이오·임상 측정표준 기반기술 구축 ... 511
• 1. 핵산 및 세포 측정표준 개발 및 고도화 ... 511
• 2. 인증표준물질 개발 및 국제비교 ... 512
• 3. 임상진단 측정표준 기술 개발 ... 513
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 514
• 1. 단백질 측정표준 연구개발 성과물의 활용계획 ... 514
• 2. 바이오.임상 측정표준 연구개발 성과물의 활용계획 ... 516
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 517
• 제 7 장 참고문헌 ... 523