[보고서]내재성 신경줄기세포의 조직 특이적 분화유도 기전 규명 및 응용기술 개발

내재성 신경줄기세포의 조직 특이적 분화유도 기전 규명 및 응용기술 개발
Elucidation of mechanisms for regulating the behaviors of neural stem cells and their applications in ischemic brain injury 원문보기

보고서 정보
주관연구기관	경희대학교 산학협력단 Kyung Hee University
보고서유형	1단계보고서
발행국가	대한민국
언어	한국어
발행년월	2013-07
과제시작연도	2012
주관부처	미래창조과학부 Ministry of Science, ICT and Future Planning
등록번호	TRKO201300034994
과제고유번호	1345175180
사업명	바이오·의료기술개발
DB 구축일자	2013-12-21
키워드	뇌졸증.신경줄기세포.Shh.미세환경.유전자 적중 마우스.Stroke.neural stem cell.Shh.microenvironment.geneticslly engineered mice.
DOI	https://doi.org/10.23000/TRKO201300034994

초록 ▼

● 뇌졸중 치료의 한 방법으로 줄기세포를 이용한 세포치료가 제시되고 있음.
● 줄기세포이식으로 뇌졸증후 소실된 신경조직의 재생이 효율적으로 일어날 수 있도록 도와주는 전략이 필요함.
● 본 과제에서는 신경줄기세포의 생존, 증식, 분화 및 이동 등의 세포 행동에 있어서 Shh signaling의 역할을 규명하고자 하였음.
● 유전자 적중 마우스 모델들을 이용하여 ischemic brain injury시 대뇌 미세환경내에 존재하는 Shh 반응세포들의 증식, 분화 및 이동 과정을 규명하였고, Shh signaling의 미세환경 조절작용을 분석하였음.
● 이와 같은 유전학적 방법을 통해 Shh signaling은 정상상태에서 뿐만 ischemic brain injury시 조직 재생 과정에서 필수적인 역할을 하고 있음을 확인하였음.
● 줄기 세포 행동에 관여하는 조절인자를 찾기 위해 genome 수준에서 Shh signaling과 Sox2의 transcriptional target들을 발굴하였음.
● 본 연구결과들을 통해 뇌졸중시 세포의 증식, 분화, 이동 등 조직재생에 관여하는 downstream effector들을 찾을 것으로 보이며, 뇌졸증 치료 전략 수립에 큰 진전을 가져올 것으로 기대됨.

Abstract ▼

Stroke, which has been known to be one of the highest causes of death, has profound effects on patients and their family members and takes high social health care costs due to refractory disease and physical disability. As cell therapy using stem cells has been suggested as a way of treating stroke, developing strategies that facilitate their survival, differentiation, migration, axonal growth, synaptogenesis is necessary and challenging. To this end, better understanding of molecular and cellular characteristics of neural stem cells as well as of the mechanism of interaction between neural stem cells and their surrounding microenvironment is essential to the development of strategies that can improve the efficiency of the treatment.
The current project has been aimed at elucidating the role of Shh signaling in controlling behaviors of neural stem cells and their derivatives, such as survival, proliferation, differentiation and migration. We attempted to assess proliferation, differentiation, and migration of Shh-responsive cells after ischemic brain injury by using genetically engineered mouse models.
Furthermore, we determined the regulatory role of Shh signaling in tissue regeneration after ischemic brain injury.

목차 Contents

표지 ... 1
제 출 문 ... 2
보고서 요약서 ... 3
요 약 문 ... 4
SUMMARY ... 5
CONTENTS ... 6
목 차 ... 7
제1장 연구개발과제의 개요 ... 8
제2장 국내외 기술개발 현황 ... 9
1. 증식인자로서 Shh ... 9
2. Adult neuronal specification ... 9
제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 11
1. 미세환경내에서 Shh 반응세포 분석 ... 11
제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 23
제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 26
1. Shh-Sox2 common target genes ... 26
2. Cre driver library ... 27
제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 28
제7장 연구시설ㆍ장비 현황 ... 29
제8장 참고문헌 ... 29

표/그림 (12)

표 Fig. 1. Shh signaling in adult SVZ.
표 Fig. 2. Shh signaling activity is elevated in adult SVZ after ische+D209mic brain injury. Comparison of X-gal staining in P30 SVZ between control (A) and stroke-induced Gli1lacZ/+ mice (B).
표 Fig. 3. SBE4, Shh telencephalic enhancer, controls Shh expression in adult SVZ, and its activity is up-regulated after ischemic brain injury. (A) in situ RNA hybridization for Shh at E10.5. (B) X-gal staining in mouse embryos carrying SBE4-lacZ. Compared to controls (C), The number of lacZ+ cells was increased in stroke-induced SVZ (D).
표 Fig. 4. Identification of two cis -regulatory elements essential for SBE4 enhancer activity. BE4 enhancer is conserved among vertebrate species. Deletion of either cis -regulatory elements resulted in reduction of SBE4 enhancer activity in embryonic and adult brains.
표 Fig. 5. Lineage tracing of Shh responsive cells in adult SVZ. Tamoxifen was administered at P30 and X-gal staining was performed on coronal sections. Compared to controls, the umber of lacZ+ cells was elevated after ischemic brain injury.
표 Fig. 6. Analysis of stroke induced SVZ after selective removal of Shh responsive cells. The number of LacZ+ cells was reduced in adult SVZ of Gli1CreERT/lacZ;ROSA26DTA mice. After stroke, co+D213 mpared to controls, NeuN+, GFAP+ cells were not properly generated in Gli1CreERT/lacZ;ROSA26DTA mice.
표 Fig. 7. Inactivation of Shh signaling activity in embryonic and adult brains using conditional Smoloxp/loxp mutant. Variable recombination efficiency of Nestin enhancer-regulated CreERT2 was detected in embryonic and adult brains.
표 Fig. 8. Identification of Shh-regulated target genes. After tamoxifen administration, mRNA was isolated from Smo+/+;NestinCreERT2 and Smoloxp/loxp;NestinCreERT2 embryos and used for gene expression profiling. This analysis revealed 1208 target genes, and was compared with the data from gene expression profiling with mRNA isolated from ROSASmoA;NestinCreERT2. Total 526 genes were found to be upregulated by Shh signaling
표 Fig. 10. Spatial expression pattern of Shh-Sox2 common target genes by RNA in situ hybridization
표 Fig. 12. Sox2 binds directly to the Six3 forebrain enhancer
표 Fig. 11. Sox2 bound regions act as functional regulatory enhancers during embryogenesis. Transient transgenic reporter assays of Sox2 -bound regions (SBRs) performed in E10.5 embryos. Shown at the top of each panel shown is Multiz Alignment of SBRs among vertebrate species (http://genome.ucsc.edu). Numbers of embryos exhibiting reproducible reporter activity over total number of transgenic embryos are indicated in Supplementary Table 1. hg19, human; galGal4, chicken; xenTro3, frog; fr3, fugu; danRer7, zebrafish.
표 Fig. 13. Six3 expression is disrupted in SoxB1 compound mutants. Whole-mount in sit u hybridization for Six3 in wild-type (A, E) and SoxB1 mutant embryos (B -D, F -H) at E10.5. Six3 transcription was similarly observed in Sox2+/-;Sox3+/- and Sox2+/+;Sox3y/- embryos (B, C, F, G). In contrast, compared to control, Sox2+/-;Sox3y/- embryos exhibited an almost complete lack of Six3 expression in the ventral forebrain (D, H). Dashed lines (A -D) indicate the planes of transverse sections (E -H) through the forebrain at the level of the anterior diencephalon.

과제명(ProjectTitle) :	-
연구책임자(Manager) :	-
과제기간(DetailSeriesProject) :	-
총연구비 (DetailSeriesProject) :	-
키워드(keyword) :	-
과제수행기간(LeadAgency) :	-
연구목표(Goal) :	-
연구내용(Abstract) :	-
기대효과(Effect) :	-

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 제목(한글), 저자명(한글), 발행일자, 전자원문, 초록(한글), 초록(영문) 관리번호, 제목(한글), 제목(영문), 저자명(한글), 저자명(영문), 주관연구기관(한글), 주관연구기관(영문), 발행일자, 총페이지수, 주관부처명, 과제시작일, 보고서번호, 과제종료일, 주제분류, 키워드(한글), 전자원문, 키워드(영문), 입수제어번호, 초록(한글), 초록(영문), 목차
저장형식	Text(ASCII format) Excel format
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증

내재성 신경줄기세포의 조직 특이적 분화유도 기전 규명 및 응용기술 개발
Elucidation of mechanisms for regulating the behaviors of neural stem cells and their applications in ischemic brain injury 원문보기