초록 ▼

○ 연구결과
i) 제주흑우 친자감별 및 등록에 필요한 24개 마커를 선정하고 활용함. ii) 2013년 현재, 제주흑우 등록우 460두, 등록대기 150두로 연구시작 2008년 96두에서 610두로의 증식효과에 기여함. iii) 우수 흑우정액 선별을 위한 데이터베이스 구축용 정액분석기와 정액스트로제조자동화 시스템을 두 기관(축산진흥원, 난지축산시험장) 내에 설비하여 가동하게 함. iv) 체외수정란 생산 효율을 높인 새로운 수정기법과 배양기술 개발하여 3건 특허 등록함. v) 복제효율 두 배 증진 기술과 초자화동결 뒤 농장에서

○ 연구결과
i) 제주흑우 친자감별 및 등록에 필요한 24개 마커를 선정하고 활용함. ii) 2013년 현재, 제주흑우 등록우 460두, 등록대기 150두로 연구시작 2008년 96두에서 610두로의 증식효과에 기여함. iii) 우수 흑우정액 선별을 위한 데이터베이스 구축용 정액분석기와 정액스트로제조자동화 시스템을 두 기관(축산진흥원, 난지축산시험장) 내에 설비하여 가동하게 함. iv) 체외수정란 생산 효율을 높인 새로운 수정기법과 배양기술 개발하여 3건 특허 등록함. v) 복제효율 두 배 증진 기술과 초자화동결 뒤 농장에서 one-step 융해 후 바로 이식하는 동결법 개발하여 활용함. vi) 현존 및 절멸한 우수·우량 제주흑우 종모우와 종빈우 체세포 확보 후 체세포 핵이식기법으로 복제씨수소 2두와 씨암소 1두를 생산함. vii) 복제소 성과 (3두) 와 논문 성과 (19편) 을 언론 매체를 통해 홍보함 (총 257건). viii) 2010년 농림수산식품 우수과제 선정 및 일본 동물생식학회 (JRD) 우수논문으로 선정됨. ix) 제주흑우 천연기념물 제546호 지정에 기여함 x) 관련 기술을 교육·홍보 (20건) 하고 우수인력을 양성함 (5건, 석사 5명).

Abstract ▼

Results of research and development
Results obtained in this research and development were as follows: i) Selection of 24 markers required for paternity analysis of Jeju Black Cattle ii) As of year 2013, 460 Jeju black cattles are registered and 150 Jeju black cattle are ready to be register. Thi

Results of research and development
Results obtained in this research and development were as follows: i) Selection of 24 markers required for paternity analysis of Jeju Black Cattle ii) As of year 2013, 460 Jeju black cattles are registered and 150 Jeju black cattle are ready to be register. This research was started with only 96 Jeju Black Cattle in 2008, but now they increased to 610 Jeju Black Cattle. iii) For excellent database screening of Jeju Black Cattle semen, Computer Assisted Sperm Analyser (CASA), sperm freezer and automated sperm distributor installed in Institution for Livestock Promotion and the National Institute of Subtropical Agriculture in Jeju as a request of this project will produce elite Jeju Black Cattle embryo. iv) Three patent are registered for in vitro embryo production efficiency and new IVF techniques. v) Newly developed vitrification and one-step dilution technique applied effectively on field trial for cloned Jeju Black Cattle production. vi) We producted two elite Jeju Black Cattle cloned bulls (Heuk Young Dolee and Heuk Oll Dolee) and one elite Jeju Black Cattle cloned cow (Heuk Woo Sunee). Two out of three of these animals (Heuk Oll Dolee and Heuk Woo Sunee) were post-death cloned and produced by somatic cell nuclear transfer (SCNT) approximately 2 years after their nuclear donors were slaughtered. vii) Successfully produced 3 cloned Jeju Black Cattles, total of 19 submitted research papers, and total of 257 events are publicized throughout the media. viii) Our team has been selected for excellent project from the IPET in 2010and received the honorable paper award from Japan Society of Animal Reproduction (JRD) ix) Contributed the designation of Jeju Black Cattle as No. 546 natural monument of national cultural property. x) Promoted total of 20 educational and related techniques and were able to train and educate 5 masters degree students.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 요 약 문 ... 3
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 7
• 목 차 ... 11
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 14
• 제1절 연구개발의 목적 ... 14
• 제2절 연구개발의 필요성 ... 15
• 제3절 연구개발의 범위 ... 19
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 20
• 제1절 연구개발 대상 기술의 국내·외 현황 ... 20
• 1. 세계적 수준 ... 20
• 2. 국내수준 ... 20
• 제2절 관련기술 국내·외의 연구동향 ... 21
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 23
• 제1절 체외 수정란 배양 환경 기술 개발 및 최적화 ... 23
• 1. 체외 배양환경 기술 개발 ... 23
• 가. 체외수정란 발달에서 플라보노이드 첨가가 미치는 항산화·항사멸 작용 ... 23
• 나. 플라보노이드 처리된 체세포 핵이식 배아의 체외 발달 및 제주흑우 복제소 생산 ... 31
• 다. 줄기세포 생리활성 물질을 이용한 배양환경 개발 ... 43
• 2. 체외수정 기술 개발을 통한 우수 수정란 생산 ... 56
• 가. 2단계 스윔업(swim-up) 방법을 이용한 가축의 체외수정능 향상방법 (기술발명) ... 56
• 나. GAG 처리된 정자가 소 난자의 체외발달에 미치는 영향 ... 65
• 제2절 흑우 수정란 생산 및 이식 체계 확립 ... 72
• 1. 수정란 생산 ... 72
• 2. 수정란 이식 ... 79
• 3. 제주흑우 씨수소 확보 ... 81
• 4. 제주흑우 후보씨수소 정액성상 분석 ... 83
• 5. 제주흑우 등록관리 ... 83
• 제3절 성감별 정자 및 수정란 활용 기술 개발 ... 87
• 1. 정자 성감별 ... 87
• 가. 정액 분석 ... 87
• 나. 정자 성감별에 사용되는 정액 희석액의 체외수정능에 미치는 영향 검토 ... 89
• 다. 정자 성감별 (Flow cytometer에 의한 정자분리) ... 90
• 2. 수정란 성감별 ... 102
• 가. PCR방법과 LAMP법을 이용한 수정란 성감별 ... 102
• 나. Sexual Dimorphism (성별 이형성)을 활용한 수정란 성 감별 ... 107
• 제4절 제주흑우 수정란 동결 기술 개발 및 이식 ... 114
• 1. 수정란 동결 기술 개발 ... 114
• 가. 동결-융해 수정란에 대한 항산화제 플라보노이드 처리효과 ... 116
• 나. 미수정란 동결 기술의 적정화 ... 119
• 2. 동결 기술 활용 ... 121
• 가. 완만동결 ... 121
• 나. 초자화동결과 1-단계 융해된 체세포핵이식란의 직접이식기술로 제주흑우 복제소 생산 ... 122
• 제5절 제주흑우 유전형질 검출 및 분석 ... 129
• 1. 제주흑우 친자확인을 위한 표지인자 분석 및 시스템 구축 ... 129
• 가. 제주흑우 Microsatellite (MS) 유전자형 분석 ... 129
• (1) 제주흑우 MS 표지인자 선정 ... 133
• (2) 농가 제주흑우 집단에서의 MS marker 실제 적용 ... 138
• (3) 제주흑우 혈통관리 및 육종체계에서의 개체식별·친자감별 시스템의 이용 ... 142
• (4) 유전형질에 따른 제주흑우 가계도 작성 ... 143
• 나. 제주흑우 Insertion-deletion polymorphisms (Indel) 유전자형 분석 ... 145
• (1) Indel 마커 선정 및 조사 ... 145
• (2) Indel 마커 선발과 최적의 개체식별 및 친자감별 시스템 구축 ... 151
• 다. 제주흑우 특이 모색 유전자 분석 ... 160
• (1) 제주흑우와 실용화 축군에서 모색 관련 유전자 분석 ... 160
• (2) 제주흑우 실용화축군의 모색과 MC1R, ASIP 유전자형의 분포 ... 162
• (3) 제주흑우 실용화축군에서 발견되는 특이모색 관련 유전자 분석 ... 164
• 2. 제주흑우의 타 품종과의 유전적 특이성 분석 ... 165
• 가. 미토콘드리아 DNA 분석을 통한 제주흑우 계통유전학적 분석 ... 165
• (1) 제주흑우 NJ & network 분석 ... 165
• (2) 한국 소 품종들 간 NJ & network ... 166
• (3) 일본 화우 NJ & network 분석 ... 167
• (4) 제주흑우와 일본화우의 NJ & network 분석 ... 168
• (5) KN4 개체의 mt DNA 분석 및 NJ & network ... 169
• (6) 전 세계 소 품종의 D-loop 유전자에 대한 계통유전학적 분석과 제주흑우의 위치 ... 171
• 나. 제주흑우 Bovine SNP chip 분석 및 특이 SNP 탐색 ... 173
• 다. 제주흑우의 도체형질 분석 ... 175
• (1) 제주지역에서 출하된 소의 도체성적 ... 176
• (2) GHR 유전자형의 다형성과 한우 및 제주흑우의 도체형질의 상관 분석 ... 177
• (3) GH1과 POU1F1 유전자형의 다형성과 한우 및 제주흑우의 도체형질의 상관 분석 ... 179
• (4) IGFBP3 유전자형의 다형성과 한우 및 제주흑우의 도체형질의 상관 분석 ... 180
• (5) 제주흑우 도축우 집단에서 유전자의 SNP 분포와 도체형질의 성적 ... 180
• 제6절 제주흑우 우수 유전형질 보존 및 응용기술 개발 ... 184
• 1. 체세포핵이식 기술 최적화 및 복제수정란 생산 효율 개선 ... 184
• 가. Oosight imaging system을 이용한 복제 수정란 생산 효율 개선 ... 184
• 2. 제주흑우 복제소 생산 ... 189
• 가. 복제씨수소 ‘흑영돌이’ 생산 ... 191
• 나. 복제씨수소 ‘흑올돌이’ 생산 ... 194
• 다. 복제씨암소 ‘흑우순이’ 생산 ... 196
• 3. 체세포복제소의 정액 분석 및 체외수정능 검정 ... 198
• 가. 복제소 흑영돌이 정액 분석 및 체외수정 ... 198
• 나. 복제소 흑올돌이 정액 분석 및 체외수정 ... 202
• 4. 소 배아줄기세포주 확립 기술 개발 ... 204
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여 ... 206
• 제1절 연구개발 목표의 달성도 ... 206
• 제2절 관련분야의 기술발전에의 기여도 ... 211
• 제 5 장 연구개발 성과 및 성과활용 계획 ... 213
• 제1절 연구성과 목표 및 달성 ... 213
• 1. 특허 성과 ... 213
• 2. 논문발표 성과 ... 217
• 3. 학술발표 ... 223
• 4. 교육·지도활용 ... 240
• 5. 수상실적 ... 244
• 6. 연구인력 활용/양성 성과 ... 245
• 7. 홍보 (언론 및 영상 매체); 33개 종류 총 257회 ... 246
• 제2절 성과활용 계획 ... 267
• 1. 확립된 유전자 marker 체계를 활용한 친자감별확인과 도체 형질분석 통한 우수유전 능력 제주흑우 발굴 ... 267
• 2. 제주흑우 전용 홈페이지를 통한 제주흑우 전수 공개로 소비자 니즈 충족 ... 268
• 3. 구축된 기반·설비를 이용한 수정란이식사업의 활성화유도 ... 270
• 가. 자동화 기계 이용으로 정액데이터베이스구축을 통한 우수 정액 스트로 제조 ... 270
• 나. 수정란이식사업을 기관 주도형에서 농가와 기관혼합형으로 활용 ... 271
• 다. 초급속 간편 동결 융해 기술이용 ... 272
• 4. 제주흑우 대량증식을 통한 제주흑우 판매유통 산업화 기반 활성화 ... 273
• 5. 제주흑우 천연기념물 제546호 지정에 따른 제주특별자치도와 제주대학교 줄기세포 연구센터 간 “우량 제주흑우 체외수정란 이식사업협약” 으로 활성화 ... 274
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 278
• 1. 제주흑우 수정란 생산 및 이식 체계 확립 ... 278
• 2. 성감별 정자 및 수정란 활용 기술 개발 ... 280
• 3. 제주흑우 수정란 동결 기술 개발 및 이식 ... 284
• 4. 제주흑우 유전형질 검출 및 분석 ... 285
• 5. 제주흑우 우수 유전형질 보존 및 응용기술개발 ... 289
• 제 7 장 연구시설?장비 현황 ... 291
• 제 8 장 참고문헌 ... 293
• 연구개발보고서 초록 ... 302
• 끝페이지 ... 303