초록 ▼

5. 최종 연구결과 요약
○ 세부과제명:토종벌 낭충봉아부패병바이러스 대량배양
- 낭충봉아부패병 바이러스가 접종된 PK-15, IBRS-2 및 Vero에서 양성 반응 확인
- 낭충봉아부패병의 재조합 단백질 발현 및 정제
- 감염시료에서 낭충봉아부패병의 원인 바이러스 (Korean Sacbroodvirus)의 분리 (PCR 및 투과전자현미경 확인)
○ 세부과제명:낭충봉아부패병 특이 항체 및 난황항체생산
- 낭충봉아부패병 바이러스에 대한 난황 항체 생산 (SDS-PAGE 및 Western blotting을

5. 최종 연구결과 요약
○ 세부과제명:토종벌 낭충봉아부패병바이러스 대량배양
- 낭충봉아부패병 바이러스가 접종된 PK-15, IBRS-2 및 Vero에서 양성 반응 확인
- 낭충봉아부패병의 재조합 단백질 발현 및 정제
- 감염시료에서 낭충봉아부패병의 원인 바이러스 (Korean Sacbroodvirus)의 분리 (PCR 및 투과전자현미경 확인)
○ 세부과제명:낭충봉아부패병 특이 항체 및 난황항체생산
- 낭충봉아부패병 바이러스에 대한 난황 항체 생산 (SDS-PAGE 및 Western blotting을 이용하여 낭충봉아부패병 바이러스에 대한 난황항체 형성 확인)
- 낭충봉아부패병 바이러스에 대한 단클론항체를 제작 (다수의 IgG/kappa를 확인 및 ELISA 실시)
- 낭충봉아부패병 바이러스 VP1, VP2에 대한 재조합 항원 선발 · 제작 및 난황항체를 제작
- 낭충봉아부패병 특이 단클론항체를 이용한 진단키트 생산
○ 세부과제명: 낭충봉아부패병 진단법 및 특이 난황항체생산의 야외적용 및 효능시험
-낭충봉아부패병 바이러스 진단을 위한 HP-PCR(High Performence Polymerase Chain Reaction), Ultra-rapid real-time PCR (URRT-PCR) 및 Loop-mediated isothermal amplification(LAMP) 진단법 확립

Abstract ▼

Sacbrood virus (SBV) is one of the most serious honeybee viruses. The virus causes failure to pupate and death in both larvae and adult bees. Recently, the Korean sacbrood virus (KSBV) caused great losses in Korean honeybee (Apis cerana) colonies. Although KSBV shows high homology with SBV strains,

Sacbrood virus (SBV) is one of the most serious honeybee viruses. The virus causes failure to pupate and death in both larvae and adult bees. Recently, the Korean sacbrood virus (KSBV) caused great losses in Korean honeybee (Apis cerana) colonies. Although KSBV shows high homology with SBV strains, it has unique motifs and causes different symptoms. Therefore, a simple, sensitive and specific method for detecting KSBV is needed urgently. In this study, a reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) assay was developed for detecting KSBV using total RNA extracted from honeybees (A. cerana) infected with SBV. The LAMP and the polymerase chain reaction (PCR) methods were then compared for their ability to detect KSBV in clinical samples. The virus was detected in RT-LAMP reactions containing 10(3) copies of pBX-KSBV within 30min, which was comparable to RT-PCR. In addition, the LAMP was able to distinguish between KSBV and other closely-related SBV strains, indicating a high degree of specificity. This simple and sensitive RT-LAMP assay is a useful method for the rapid diagnosis of KSBV infection in honeybees.

목차 Contents

• 총괄요약표 ... 1
• 연구과제 최종결과보고서 ... 3
• I. 연구배경 및 목표 ... 3
• Ⅱ. 연구방법 및 수행전략 ... 5
• Ⅲ. 연구결과 ... 6
• Ⅳ. 연구결과요약 ... 26
• Ⅴ. 고 찰 ... 27
• Ⅵ. 연구결과 활용실적 및 계획 ... 27
• Ⅶ. 연구사업 추진상 문제점 및 건의사항 ... 29
• Ⅷ. 주요연구과제 변경사항 ... 29
• IX. 참고자료 ... 29
• X. 영문초록 ... 29
• 끝페이지 ... 29