초록 ▼

본 연구에서는 IL-12의 구성 소단위체의 하나인 p40, 또는 p35 소단위체 단백질을 세포면결합형으로 발현하는 암세포의 항암 면역성과 면역기작을 연구하였다. 특히 항암 면역백신으로서 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포가 면역세포에 어떠한 미치는 영향을 미치며, 어떠한 면역세포에 특정적으로 작용하는가를 MethA fibrosarcoma 생쥐모델에서 분석하였다. 결과적으로 p40만을 발현하는 암세포 클론, p35만을 발현하는 암세포 클론을 비교한 결과, p40만을 발현하는 암세포 클론은 항암 면역성을 자극시키는 능력이 나타나지

본 연구에서는 IL-12의 구성 소단위체의 하나인 p40, 또는 p35 소단위체 단백질을 세포면결합형으로 발현하는 암세포의 항암 면역성과 면역기작을 연구하였다. 특히 항암 면역백신으로서 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포가 면역세포에 어떠한 미치는 영향을 미치며, 어떠한 면역세포에 특정적으로 작용하는가를 MethA fibrosarcoma 생쥐모델에서 분석하였다. 결과적으로 p40만을 발현하는 암세포 클론, p35만을 발현하는 암세포 클론을 비교한 결과, p40만을 발현하는 암세포 클론은 항암 면역성을 자극시키는 능력이 나타나지 않았으나, p35만을 발현하는 암세포 클론의 경우 항암 면역성을 자극시키는 효과가 나타났다.
구체적으로는
1) p40 또는 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론은 복강에서 채취한 대식세포로부터 TNFa의 분비를 촉진시키지 않았다.
2) p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론은 concanavalin A로 자극된 splenocyte의 증식을 촉진시킨 반면, p40을 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론은 이러한 효과가 없었다. 더구나 p35에 대한 항체는 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론에 의한 concanavalin A로 자극된 splenocyte의 증식효과를 차단하였다.
3) p40 또는 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론을 BALB/c 생쥐의 옆구리에 피하주사를 한경우 암을 형성하여 증식하는 속도에 있어 p40을 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론과는 달리, p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론을 피하주사한 경우 암형성 능력이 현저하게 떨어졌다. 더불어 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론으로 주사한 5마리의 생쥐 중 2 마리에서는 암이 형성되지 않았으며, 이들 생쥐는 2개월 후 wild tyep의 MethA 암세포를 피하주사한 경우 이들 암세포를 퇴치하였다. 대조구로 나이가 비슷한 5마리의 생쥐는 모두 암에 의해 죽었다.
4) p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론의 항암 면역성에 있어 어느 면역세포가 주도적인 역할을 하는 지를 규명하기 위해 CD4+ 세포, CD8+ 세포, NK세포를 각각 제거한 생쥐에 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론을 피하주사한 경우 CD8+ 세포가 제거된 생쥐 그룹이 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론에 가장 빠르게 암에 의해 죽었다.
5) Mitomycin-C로 불활성화시킨 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론은 CD4+세포, CD8+ 세포와 혼합배양한 경우, CD8+세포 그룹에서는 T세포의 활성화 표지인 CD69을 발현하는 세포가 증가하였으며 Interferon-r(IFN-r)를 유도하였으나, CD4+세포에서는 이러한 효과가 나타나지 않았다. 더구나 MHC class I 분자인 L-d 분자에 대한 항체는 이러한 IFN-r의 유도효과를 차단할 수 있었다.
6) p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론은 생체 면역과 시험관내 면역촉진에 의해 CTL을 유도하는 능력이 p40을 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론보다 월등히 뛰어났다.
7) 이러한 현상은 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론이 항암 백신으로서 효과가 있음을 나타낸다. 더불어 p35를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론에서 p35분자는 보조자극분자(costimulatory molecule)로서 작용하여 CTL을 활성화 시킨다는 것을 시사한다.
8) 마지막으로 p35 소단위체와 p40 소단위체를 세포면결합형으로 발현하는 암세포 클론을 확보하여 이들 암세포 클론의 항암 면역성을 분석 중에 있다.

목차 Contents

• 일반연구자지원사업 최종(결과)보고서 ... 1
• 목 차 ... 3
• Ⅰ. 연구결과 요약문 ... 4
• Ⅱ. 연구내용 및 결과 ... 5
• 1. 연구과제의 개요 ... 5
• 2. 국내외 기술개발 현황 ... 5
• 3. 연구수행 내용 및 결과 ... 6
• 4. 목표 달성도 및 관련 분야에의 기여도 ... 7
• 5. 연구결과의 활용계획 ... 7
• 6. 연구과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 7
• Ⅲ. 연구성과 ... 8
• 끝페이지 ... 9