초록 ▼

Ⅳ. 연구개발 결과
< 바이러스/바이로이드 검정/복합진단>
○ 5과종 바이러스 진단 기술 개발
- 사과:ACLSV, ASGV, ASPV, ApMV / 배:ACLSV, ASGV, ASPV / 포도:GLRaV-1, GLRaV-3, GFkV, GFLV / 복숭아:ACLSV, PDV, PNRSV, PPV / 단감:PeCV
○ 5과종 바이로이드 진단 기술 개발
- 사과·배:ASSVd; 포도:HSVd, GYSVd; 복숭아:HSVd, PLMVd; 단감:PVd, CVd
○ 바이러스 복합진단 기술 개발
- 사과

Ⅳ. 연구개발 결과
< 바이러스/바이로이드 검정/복합진단>
○ 5과종 바이러스 진단 기술 개발
- 사과:ACLSV, ASGV, ASPV, ApMV / 배:ACLSV, ASGV, ASPV / 포도:GLRaV-1, GLRaV-3, GFkV, GFLV / 복숭아:ACLSV, PDV, PNRSV, PPV / 단감:PeCV
○ 5과종 바이로이드 진단 기술 개발
- 사과·배:ASSVd; 포도:HSVd, GYSVd; 복숭아:HSVd, PLMVd; 단감:PVd, CVd
○ 바이러스 복합진단 기술 개발
- 사과 바이러스 4종, 배 바이러스 3종, 포도 바이러스 5종, 복숭아 4종, 단감 3종 복합 진단 기술 개발
○ 주요 과종 바이러스 진단 결과
- 사과: 6지역 81개 농가 검사 결과 약 47.6% 바이러스 감염률 확인
- 배: 6지역 96개 농가 검사 결과 약 29% 바이러스 감염률 확인
- 포도: 6지역 52개 농가 검사 결과 약 47.3% 바이러스 감염률 확인
- 복숭아: 6지역 52개 농가 검사 결과 약 65.1% 바이러스 감염률 확인
< 과수 무병묘 육성/보급>
○ 기내 무병묘 육성
- 사과(선홍, 새나라, 홍금, 썸머드림, 홍안, 홍소, 단홍, 서광, 포항우량계, 수미, 썸머킹)
- 배(만황, 스위트스킨, 미황, 한아름, 진황, 선황, 만풍, 신고, 원황, 신황)
- 포도(수옥, 진옥, 청수, 홍아람, 흑보석, 흑구슬, 캠밸)
- 복숭아(수미, 미스홍, 유미, 진미, 수홍, 미홍, 하홍)
○ 격리온실 무병묘 육성
- 사과(선홍, 새나라, 그린볼, 홍금, 썸머드림, 홍안, 홍소, 단홍)
- 배(만황, 스위트스킨, 미황, 한아름, 진황, 선황, 만풍, 행수)
- 포도(수옥, 홍이슬, 진옥, 청수, 홍아람, 흑보석)
- 복숭아(수미, 미스홍, 유미, 진미)
○ 3과종 13품종을 상주묘목관리센터 보급
< 과수 분자표지 개발>
○ SCAR 방법에 의한 분자 표지 마커 개발
- 품종 판별용 분자마커(82종): 사과 13종, 배 19종, 감 15종, 포도 16종, 복숭아 19종
- 품종 판별 가능 품종수(5과종 178품종): 사과 35품종, 배 43품종, 감 37품종, 포도 37품종, 복숭아 25품종
○ SSR 방법에 의한 분자 표지 마커 개발
- 품종 판별 마커 선발을 통한 품종 판별 가능 품종수: 사과 31품종, 배 53품종, 감 31품종, 포도 28품종, 복숭아 28품종

Abstract ▼

In worldwide, the incidence of viral diseases has caused the serious problems like reduced production and malformation of fruits in fruit plants. To investigate the occurrence of viruses in apple, pear, grapevine, peach and persimmon leaf samples were collected from fruit trees in commercial orchard

In worldwide, the incidence of viral diseases has caused the serious problems like reduced production and malformation of fruits in fruit plants. To investigate the occurrence of viruses in apple, pear, grapevine, peach and persimmon leaf samples were collected from fruit trees in commercial orchard in Korea. In this project, Enzyme linked immunoassay(ELISA) and Reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) were used to identify the presence of the following fruit tree viruses: ACLSV(Apple chlorotic leaf spot virus), ASGV(Apple stem grooving virus), ASPV(Apple stem pitting virus), ApMV(Apple mosaic virus), GLRaV-1(Grapevine leafroll-associated virus 1), GLRaV-3(Grapevine leafroll-associated virus 3), GFkV(Grapevine fleck virus), GFLV(Grapevine fanleaf virus), PDV(P rune dwarf virus), PNRSV(P runus necrotic ringspot virus) and PPV(P lum pox virus). and reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) were used to identify the presence of the following fruit tree viroids and phytoplasma : ASSVd(Apple scar skin viroid), HSVd(H op stunt viroid), GYSVd(Grapevine
yellow speckle viroid), PLMVd(P each latent mosaic viroid), PVd(P ersimmon viroid), CVd(Citrus viroid) and AFCVd(Apple fruit crinkle viroid). Also, A multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was developed to detect four apple
viruses; ACLSV, ASGV, ASPV, ApMV, three pear viruses: ACLSV, ASGV and ASPV, five grapevine viruses and viroid: GLRaV-1, GLRaV-3, GFkV, GFLV and HSVd, four peach viruses and viroid: ACLSV, PDV, PNRSV, HSVd and three persimmon virus and
viroids; PeCV, PVd, CVd.
The precise, fast, and cost-effective identification of important fruit crop cultivars is essential for practical breeding and plant breeder’s rights. Traditional methods for identification of fruit crop cultivars are based on the evaluation of sets of orphological
characteristics. However, the identification using only morphological traits is difficult to distinguish among genetically closely related cultivars. This study was conducted to develop more reliable DNA markers for identification of the apple, pear, and persimmon cultivars bred in Korea and Japan. Eighty-three randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers were developed from 30 different random primers in apple cultivars. The resulting 52 RAPD fragments were selected, and their sequences were determined to convert them into sequence-characterized amplified region (SCAR) markers. The combination of nine markers (AW15_368, A330_424, AN11_333, AK14_575, A408_592, AM16_708, AO04_711, AO04_779, AT14_789) among 13 SCAR markers provided enough polymorphism to identify 36 apple cultivars. Nineteen and 15 SCAR markers were
developed in pear and persimmon cultivars, respectively. In pear, the combination of ten SCAR markers (P561_331, P561_372, PK15_410, PH15_452, PT16_472, PT06_509, P270_593, PK10_514, PK14_583, PK15_616) as provided enough polymorphism to identify 43 cultivars.
The combination of nine SCAR markers (PS225_200, PSN05_420, PSF13_523, PSN11_540, PS372_567, PS485_569, PSP08_635, PS631_735, PS533_767) provided sufficient polymorphisms to identify 37 persimmon cultivars depending on number and size of amplicons. One hundred twenty-nine randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers were developed from 25 different random primers in grapevine cultivars. The resulting 48 RAPD fragments were selected, and their sequences were determined to convert them into sequence-characterized amplified region (SCAR) markers. The combination of 11 markers (GG05_281, GU13_283, G116_319, G427_348, GW04_463, G169_515, G116_539, GV04_618, GV01_678, GG05_689, GB17_732) among 16 SCAR markers provided enough polymorphism to identify 37 grapevine cultivars. Nineteen SCAR markers were developed in peach cultivars. The combination of ten SCAR markers (PEC20_204, PET16_261, PEH08_509, PEV01_520, PER01_523, PEQ01_686, PEF13_815, PE327_885, PEU03_899, PEN15_1039) provided sufficient polymorphisms to identify 25 peach cultivars depending on number and size of amplicons. These newly developed markers will be useful as a fast and reliable tool to identify grapevine and peach cultivars. In addition, simple sequence repeat marker sets were selected for cultivars identification. The three SSR markers sets (VVIn61, VVIt60, and VVIu20) were differentiated in 28 grapevine cultivars.
The four SSR markers sets (MA035a, MA026a, MA031a, BPPCT017) selected from 24 primers were differentiated in 28 peach cultivars. Also, we developed production system of virus-free fruit plants using heat treatment and shoot tip culture. Finally, Fruit cultivars (apple 12, pear 11, grapevine 8, peach 7 and persimmon 7) were selected by virus detection system and marker. Taken together, this approach can be a good tool for virus-free stocks.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 2
• 요 약 문 ... 3
• SUMMARY ... 7
• 목차 ... 9
• 제 1 장 서 론 ... 10
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 11
• < 바이러스/바이로이드 검정/복합진단> ... 11
• < 과수 무병묘 육성/보급> ... 11
• < 과수 분자표지 개발> ... 12
• 제 3 장 연구개발 수행 내용 및 결과 ... 13
• <제1세부과제 : 주요 과수 바이러스 발생 모니터링 및 분리동정> ... 13
• <제2세부과제 : 주요 과수 바이로이드, 파이토플라즈마발생 모니터링 및 분리동정> ... 22
• <제3세부과제 : 국내육성 품종의 바이러스 무독화 및 안전관리 체계화> ... 28
• <제4세부과제 : 과수 바이러스, 바이로이드 유전자 복합진단 기술 개발> ... 34
• <제5세부과제 : 인과류 품종인증을 위한 품종판별용 DNA표지 개발> ... 44
• <제6세부과제 : 장·핵과류 품종인증을 위한 품종판별용 DNA표지 개발> ... 66
• <제7세부과제 : 과수 바이러스, 바이로이드 감염에 따른 피해해석> ... 83
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 92
• 1절 : 목표대비 달성도 ... 92
• 2절 : 정량적 성과(논문게재, 특허출원, 기타) ... 93
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 101
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 102
• 제 7 장 기타 중요 변동사항 ... 103
• 제 8 장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구장비 현황 ... 104
• 제 9 장 참고문헌 ... 105
• 끝페이지 ... 110