초록 ▼

III. 연구개발의 내용 및 범위
CSVd 무독묘 생산을 위한 열처리, 저온처리 및 항바이러스제를 단용 또는 병용 처리한 생장점 배양 기술을 개발하고자 저온(4℃), 고온(38℃)처리를 실시했으며, 항바이러스제로 ribavirin, amantdine을 농도별로 처리하였다. 또한 초저온처리(cryopreservation)의 안정적인 처리 및 식물체 재생을 위해 재료배양 시 배지내 sucrose 농도별 배양, preculture 시 sucrose 농도별, bead의 유무, vitrification solution 종류 등 다양한

III. 연구개발의 내용 및 범위
CSVd 무독묘 생산을 위한 열처리, 저온처리 및 항바이러스제를 단용 또는 병용 처리한 생장점 배양 기술을 개발하고자 저온(4℃), 고온(38℃)처리를 실시했으며, 항바이러스제로 ribavirin, amantdine을 농도별로 처리하였다. 또한 초저온처리(cryopreservation)의 안정적인 처리 및 식물체 재생을 위해 재료배양 시 배지내 sucrose 농도별 배양, preculture 시 sucrose 농도별, bead의 유무, vitrification solution 종류 등 다양한 요인실험을 실시하였다.
국화 바이로이드 대량진단시 신속한 진단을 위한 기술개발로 RNA의 신속한 추출방법을 개발하였고, 또한 좀 더 정확하고 신속하게 현장에 적용할 수 있는 방법으로 새로운 방안을 개발하였다.

Abstract ▼

1. Elimination of Chrysanthemum stunt viroid (CSVd) from an Viroid-infected Chrysanthemum through Shoot Tip Culture
As the increase of chrysanthemum demand in Korea, the production of high quality chrysanthemum is needed. Chrysanthemum stunt viroid (CSVd) is one of the important viroid, which inf

1. Elimination of Chrysanthemum stunt viroid (CSVd) from an Viroid-infected Chrysanthemum through Shoot Tip Culture
As the increase of chrysanthemum demand in Korea, the production of high quality chrysanthemum is needed. Chrysanthemum stunt viroid (CSVd) is one of the important viroid, which infects chrysanthemum and induces diseases that effect on the decrease of quality and yield. To solve this problem, we used different size of meristem of chrysanthemum ‘Ency’ for shoot tip culture and also that of combined with heat treatment at 37℃. The efficiency of CSVd elimination was influenced by the size of shoot tip. The small size of meristems with 1 or 2 leaf primodia was regenerated into the highest number of CSVd-free plantlets. By RT-PCR, the 214-bp band corresponding to CSVd was not detected in 22.2% of the total number of tested regenerants. While, shoot tip culture combined with heat treatment of one-month-old in vitro shoots was not effective for CSVd-elimination. The CSVd-free plants grew more vigorously than CSVd-infected plants in the greenhouse.
2. Elimination of Chrysanthemum Stunt Viroid (CSVd) from Meristem Tip Culture Combined with Prolonged Cold Treatment
Chrysanthemum production in Korea has recently been greatly affected by the spread of Chrysanthemum stunt viroid (CSVd) infection, necessitating the use of CSVd-free stocks to ensure successful chrysanthemum cultivation. We investigated the effects of low temperature (4℃), antiviral chemicals (ribavirin and amantadine) and a combination of these treatments on CSVd of meristem tip cultures using plantlets that originated from CSVd-infected chrysanthemum ‘Ency’. Neither antiviral agent led to CSVd elimination, despite suppression of meristem tip growth in a concentration dependent manner. However, the CSVd elimination rate increased up to 42.8% when meristem tips were excised after storage at 4℃ for two months. The most effective results were obtained from a combination of low temperature for three months at 4℃ followed by meristem tip culture on media containing 50 and 100 mg·L^-1ribavirin. These results suggest that anti viral agents can also be useful for CSVd elimination if their treatment is combined with prolonged periods of low temperature.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 5
• 목차 ... 7
• 제1장 서 론 ... 9
• 제1절 연구배경 및 필요성 ... 9
• 제2절 연구목적 ... 9
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 10
• 제1절 국내 연구 현황 ... 10
• 제2절 국외 연구 현황 ... 10
• 제3절 연구현황 비교 및 필요연구 분야 ... 10
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 11
• 제1절 연구내용 ... 11
• 1. 생장점 배양의 열처리 및 항생제 처리를 통한 바이로이드 제거 ... 11
• 2. 생장점 배양의 저온처리 및 항생제 처리를 통한 바이로이드 제거 ... 12
• 3. 국화 정단의 초저온 처리를 통한 바이로이드 제거 ... 14
• 4. 국화재배농가에 대한 품종별 국화 바이로이드 질병 예찰 및 실태조사 실시 ... 16
• 5. 국화 바이로이드의 검정 시스템 개발 ... 16
• 6. 국화 바이로이드 신속한 대량검정 시스템 개발 ... 17
• 제2절 연구결과 ... 20
• 1. 생장점 배양의 열처리 및 항생제 처리를 통한 바이로이드 제거 ... 20
• 2. 생장점 배양의 저온처리 및 항생제 처리를 통한 바이로이드 제거 ... 23
• 3. 국화 정단의 초저온 처리를 통한 바이로이드 제거 ... 30
• 4. 국화재배농가에 대한 품종별 국화 바이로이드 질병 예찰 및 실태조사 실시 ... 35
• 5. 국화 바이로이드의 검정 시스템 개발 ... 41
• 제4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 47
• 제1절 목표대비 달성도 ... 47
• 제2절 정량적 성과 ... 48
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 49
• 제1절 기업화 추진방안 ... 49
• 제2절 타연구에의 응용 ... 49
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 50
• 제7장 기타 중요 변동사항 ... 51
• 제8장 국가과학기술종합정보시스템에 등록한 연구장비 현황 ... 52
• 제9장 참고문헌 ... 53