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재조합 바이러스 유사 입자 생산을 위한 baculovirus 증식결여 곤충세포주 개발
Development of Replication-deficient baculovirus/insect cell system for production of recombinant virus-like particles 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 질병관리본부
Korea Center for Diease Control and Prevention
보고서유형최종보고서
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월2014-01
과제시작연도 2013
주관부처 보건복지부
[Ministry of Health & Welfare(MW)(MW)
등록번호 TRKO201400011498
과제고유번호 1465013389
사업명 감염병관리기술개발연구(구.질병관리연구지원)
DB 구축일자 2014-07-05
키워드 배큘로바이러스.당단백질 64.DBP 단백질.RNA 간섭.Baculovirus.AcMNPV (Autographa californica nucleopolyhedrovirus ).Gp64(glycoprotein 64).DBP (ssDNA binding protein.AcOrf-25).RNA interference.
DOI https://doi.org/10.23000/TRKO201400011498

초록 ▼

○ 연구목표
- Short-hairpin RNA 간섭 (shRNA interference)를 이용해 baculovirus의 증식 및 budding이 결여된 곤충세포주를 개발하여 더욱 안전한 재조합 단백질 및 VLP 생산 방법 연구에 기여하고자 함.
○ 연구내용 및 범위
1. Baculovirus 증식 억제 가능한 유전자 고찰 및 스크리닝
2. shRNA벡터기반 세포주 제작 및 최적화
3. 증식 결여 baculovirus/곤충세포주에서의 VLP 발현 생산 및 baculovirus 오염도 분석
○ 기대성

목차 Contents

  • 연구최종보고서 ... 1
  • 표지 ... 2
  • 내부연구과제 요약서 [총괄] ... 3
  • 내부연구과제 연구결과 요약서 [총괄] ... 4
  • 제1장 연구의 목적 및 필요성 ... 5
  • 제1절 수행하고자 하는 연구와 관련되는 국내․외 연구기술개발 현황 ... 5
  • 제2절 현 연구(기술)상태의 문제점 및 앞으로의 전망 ... 6
  • 제3절 연구의 필요성과 중요성 ... 7
  • 제2장 연구의 연구목표 및 달성도, 관련 분야에의 기여도 ... 8
  • 제1절 연구의 최종목표 ... 8
  • 제3장 국내.외 기술개발 현황 ... 8
  • 제4장 연구의 내용 및 결과 ... 11
  • 1. Baculovirus의 GP64, DBP, IE-1 siRNA 디자인 및 제작 ... 11
  • 2. Baculovirus 증식 및 오염도 측정을 위한 Q-PCR protocol 확립 ... 14
  • 3. Baculovirus의 GP64, DBP siRNA의 단백질 발현 억제능 확인 ... 26
  • 4. Baculovirus의 GP64, DBP siRNA 처리에 의한 baculovirus assembly 및 유출 억제능 확인 ... 37
  • 5. siRNA로 변환가능한 shRNA 디자인 및 벡터 클로닝 ... 41
  • 6. GP64 상쇄 혹은 DBP 상쇄 shRNA 발현시키는 stable cell line 제작 ... 43
  • 7. 곤충세포주에서 생산된 VLP 분리 정제 및 오염도 분석 ... 48
  • 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 53
  • 제6장 연구의 주요 연구 성과 ... 55
  • 제7장 기대성과 ... 58
  • 제8장 참고문헌 및 첨부문서 ... 59
  • 끝페이지 ... 61

표/그림 (32)

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