초록 ▼

진균감염의 빈도는 최근 20년 동안 현저히 증가하여 항진균제 내성은 병원내 중요한 문제로 부각되고 있다. 본 연구에서는 국내 다기관에서 분리된 아스페루길루스 균주의 균종 분포와 항진균제 내성 실태를 조사하고, azole 항진균제 내성 칸디다 균주의 국내 전파 및 내성기전 양상을 분석하고자 하였다. 2012년과 2013년 국내 11개 병원에서 분리된 총 351주의 아스페르길루스를 대상으로 internal transcribed spacer (ITS) 부위와 26S rRNA의 D1/D2 domain 부위에 대한 염기서열분석을 통해 균종을

진균감염의 빈도는 최근 20년 동안 현저히 증가하여 항진균제 내성은 병원내 중요한 문제로 부각되고 있다. 본 연구에서는 국내 다기관에서 분리된 아스페루길루스 균주의 균종 분포와 항진균제 내성 실태를 조사하고, azole 항진균제 내성 칸디다 균주의 국내 전파 및 내성기전 양상을 분석하고자 하였다. 2012년과 2013년 국내 11개 병원에서 분리된 총 351주의 아스페르길루스를 대상으로 internal transcribed spacer (ITS) 부위와 26S rRNA의 D1/D2 domain 부위에 대한 염기서열분석을 통해 균종을 동정한 결과, A. fumigatus (42%)가 가장 많았고, A. niger 23%, A. flavus 15%, 그리고 A. terreus 13% 순이었다. Itraconazole, posaconazole 및 voriconazole에 대한 MIC가 epidemiological cutoff value (ECV)를 넘는 균주%는 각각 A. fumigatus 2.7%, 0.0% 및 1.4%이었고, A. flavus 1.9%, 1.9% 및 9.4%, A. niger 3.7%, 0.0% 및 0.0%, A. terreus 0.0%, 0.0% 및 4.3%이었으며 전체 균주의 2.3%, 0.3% 및 2.6%이었다. 총 351주 중 amphotericin B MIC가 2 μg/ml 이상인 균주는 53주(15.1%)이었다.101주의 A. fumigatus에 대한 cyp51A 유전자 염기서열분석결과 다형성은 13주 (12.9%)에서 관찰되었으나 azole 내성과 연관된 변이는 없었다. 한편, fluconazole MIC가 각 균종의 ECV를 초과한 C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis 및 C. parapsilosis 각각 20주, 12주, 11주 및 12주의 총 55주를 대상으로 MLST 및 PFGE 법을 이용하여 유전자형 검사를 시행한 결과, 5주의 C. albicans (2가지형)과 2주의 C. glabrata (1가지형) 등을 제외하고는 모든 균주가 서로 다른 유형을 보였다. C. albicans 20주 중 CDR1, CDR2 유출펌프 유전자의 과발현 및 FLU1 과발현(감수성 균주보다 3배 이상)을 보이는 균주는 없었고, MDR1 과발현을 보이는 균주가 11주 있었다. ERG11 유전자의 3배 이상 발현 균주는 2주 있었고, 내성과 연관성이 보고된 ERG11 유전자 돌연변이가 관찰된 균주가 8주 있었다. 특히 ST 1179형 C. albican 3주는 내성과 연관된 동일한 ERG11 유전자 돌연변이(D116E, K128T, K143R)를 보였다. C. glabrata 12주는 모두 CgCDR1과 CgCDR2 유출펌프 유전자의 과발현을 보였으나, ERG11 유전자 돌연변이와는 연관이 없었다. 이상의 성적은 국내 아스페르길루스 균주의 아졸 항진균제에 대한 내성 빈도는 3% 이내로서 외국의 보고에 비해 낮은 수준이었고, 항진균제 내성 칸디다 균주에 대한 유전자형 검사 결과, 동일 클론 균주의 전파는 아직은 매우 드물게 일어날 가능성을 제시해 주었다.

Abstract ▼

Antifungal resistance have become an important problem in hospitalized patients. This study investigated antifungal susceptibilities and species distribution of Aspergillus from 11 university hospitals in Korea. In addition, genotyping for azole-resistant clinical Candida isolates was assessed with

Antifungal resistance have become an important problem in hospitalized patients. This study investigated antifungal susceptibilities and species distribution of Aspergillus from 11 university hospitals in Korea. In addition, genotyping for azole-resistant clinical Candida isolates was assessed with their resistant mechanisms. The overall species distribution for 351 Aspergillus isolates, which determined by gene sequence analysis was as follows: A. fumigatus (42%), A. niger (23%), A. flavus (15%), and A. terreus (13%). Using the epidemiological cutoff values (ECVs), the percentages of non-wild type (WT) isolates for itraconazole, posaconazole, and voriconazole, respectively, were as follows: A. fumigatus (2.7%, 0.0%, and 1.4%), A. flavus (1.9%, 1.9%, and 9.4%), A. niger (3.7%, 0.0%, and 0.0%), A. terreus (0.0%, 0.0%, and 4.3%), and all five species (2.3%, 0.3%, and 2.6%). Resistance to amphotericin B (MIC > 2 μg/ml) was found in 15.1% of the isolates. Mutations in the cyp51A gene which has an association with zole resistance were not detected in any of 101 isolates of A. fumigatus isolates. When 55 clinical isolates of Candida which fluconazole MICs were above ECVs were genotyped by multilocus sequence typing and/or pulsed field gel electrophoresis, most of isolates showed unique genotypes except two pairs of C. albicans and one pair of C. glabrata. Of 20 clinical isolates of C.albicans, Mdr1 over-expression was found in 55%, whereas CDR1, CDR2 and FLU1 genes over-expression was found in none of isolates. Eight isolates showed amino acid substitutions in Erg11 which are suspected to be involved in azole resistance. Especially, three isolates belonging to the same DST (DST 1179) from three hospitals displayed the amino acid substitutions in Erg11 (D116E, K128T, K143R). In addition, all of 12 C. glabrata isolates showed over-expression of CgCDR1 and/or CgCDR2 genes. These findings show that the rates of resistance to azole antifungals are still low among clinical isolates of Aspergillus species in Korea. and clonal transmission of fluconazole resistant Candida isolates is still rare.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 목차 ... 2
• 최종결과보고서 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 연구결과 ... 5
• 제1장 최종 연구개발 목표 ... 5
• 제2장 국내.외 기술개발 현황 ... 7
• 제3장 최종 연구개발 내용 및 방법 ... 8
• 제4장 최종 연구개발 결과 ... 12
• 제5장 연구결과 고찰 및 결론 ... 33
• 제6장 연구성과 및 활용계획 ... 38
• 제7장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 40
• 제8장 기타 중요변경사항 ... 40
• 제9장 연구비 사용 내역 및 연구원 분담표 ... 41
• 제10장 참고문헌 ... 44
• 제11장 첨부서류 ... 46
• 끝페이지 ... 47