초록 ▼

최근 건강에 대한 관심이 늘면서 다양한 종류의 건강기능식품이 개발되고 있으나 특정 효능을 극대화하기 위해 불법적으로 전문의약품이나 허가 외 성분 등을 혼합하여 제조, 판매하는 관련 안전사고가 증가하고 있다. 이 중 항히스타민제는 히스타민작용에 길항하여 알러지성 질환에 사용되는 전문의약품이나, 최음제나 체중감량성분 등에서 불법적으로 사용하는 사례가 보고되는 등 오남용 사례가 심각한 수준이다. 이에 본 연구는 식품 중 불법으로 혼입 가능성이 있는 항히스타민제에 대한 동시분석법을 개발하고, 식품 중에 불법으로 혼입되는 미지물질을 규명하여

최근 건강에 대한 관심이 늘면서 다양한 종류의 건강기능식품이 개발되고 있으나 특정 효능을 극대화하기 위해 불법적으로 전문의약품이나 허가 외 성분 등을 혼합하여 제조, 판매하는 관련 안전사고가 증가하고 있다. 이 중 항히스타민제는 히스타민작용에 길항하여 알러지성 질환에 사용되는 전문의약품이나, 최음제나 체중감량성분 등에서 불법적으로 사용하는 사례가 보고되는 등 오남용 사례가 심각한 수준이다. 이에 본 연구는 식품 중 불법으로 혼입 가능성이 있는 항히스타민제에 대한 동시분석법을 개발하고, 식품 중에 불법으로 혼입되는 미지물질을 규명하여 관련 사고 대비 안전관리를 강화하기 위해 수행되었다. 먼저 항히스타민제 분석법은 직선성, 검출한계, 정량한계, 정확성, 정밀성, 안정성, 회수율에 대한 밸리데이션을 통해 신뢰성을 확보한 결과, 기기검출한계는 0.5∼1.5 ㎍/mL, 기기정량한계는 1.5∼2.5 ㎍/mL이었고, 분석법 검출한계는 10.0∼30.0 ㎍/mL, 분석법 정량한계는 20.0∼50.0 ㎍/mL이었다. 직선성의 상관계수는 0.999이상이었고, 정밀성은 0.2∼5.1%(intra-day), 0.1∼8.8%(inter-day), 정확성은 84.5∼111.2%(intra-day), 91.9∼112.0%(inter-day), 안정성은 상대표준편차(RSD) 3.4% 이내로 나타났다. 건강기능식품에 적용되는 제형인 환, 연질캡슐, 경질캡슐, 액상, 파우더, 정제형 등에 대하여 회수율 실험을 수행한 결과 75.4∼119.3%이었으며, 상대표준편차는 6.6%로 나타나 국제 분석법 가이드라인을 만족하였다. LC-MS/MS의 경우 기기검출한계는 0.0003∼0.3 ㎍/mL, 기기정량한계는 0.0009∼0.600 ㎍/mL이었고, 분석법 검출한계는 0.006∼6.000 ㎍/mL, 분석법 정량한계는 0.018∼12.000 ㎍/mL이었다. 직선성은 상관계수 0.99이상으로 좋은 직선성을 보였다. 정밀성은 0.1∼9.8%(intra-day), 0.3∼9.6%(inter-day), 정확성의 경우 82.7∼116.7% (intra-day), 84.3∼113.0%(inter-day), 안정성의 상대표준편차는 5.4% 이내로 조사되었다. 회수율은 83.9∼117.9%였고, 표준편차는 5.2%이내였다. 미지물질 규명의 경우 2013년 식약처 위해사범중앙조사단으로 의뢰된 식품에서 기존의 분석성분과 다른 성분이 발견되어, HPLC, prep-LC, LC-Q-Tof, NMR로 분석한 결과, 프록시폭시페닐치오실데나필과 프로폭시페닐치오호모실데나필임을 세계최초로 규명하였으며, 프로폭시페닐치오하이드록시호모실데나필과 프로폭시페닐치오아일데나필은 국내최초로 규명하였다. 본 연구에서 확립된 항히스타민제 동시분석법과 신규규명물질 분석법은 시중에서 불법으로 유통되고 있는 불법·부정식품을 단속하고 관련 식품사고에 대한 사전·사후 안전관리에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

Abstract ▼

Recently, people are often tempted to use dietary supplements by increasing interest of health. But the sales cases of foods containing unauthorized substances have been increased. Thus, advanced analytical method for distinguishing antihistamine substances in food was developed and in contributes t

Recently, people are often tempted to use dietary supplements by increasing interest of health. But the sales cases of foods containing unauthorized substances have been increased. Thus, advanced analytical method for distinguishing antihistamine substances in food was developed and in contributes to have rapid and accurate method for analyzing unauthorized substances. Originally antihistamines used to treat allergies but currently used many illegal abuse cases that are reported as in dietary supplement. The purpose of this study was developing a simultaneous analysis method for the potentially illegal adulteration in food. We developed a high performance liquid chromatography(HPLC) and liquid chromatography tandem mass spectrometry(LC-MS/MS) method for simultaneous analysis of 23 antihistamines in food sample. Linearity, accuracy, precision, limit of detection(LOD), limit of quantification(LOQ), stability and recovery were carried out for a method validation. In the HPLC results of this study, we obtained LOD and LOQ of instrument to be 0.5∼1.5 ㎍/mL and 1.5∼2.5 ㎍/mL, respectively. LOD and LOQ of method were found to be 10.0∼30.0 ㎍/mL and 20.0∼50.0 ㎍/mL, linearity over 0.999, the precision was 0.2∼5.1%(intra-day) and 0.1∼8.8%(inter-day), the accuracy was 84.5∼111.2%(intra-day), 91.9∼112.0%(inter-day), the stability was less than 3.4% relative standard deviation(RSD). There are various types of dietary supplements such as powder, tablet, liquid, pill, and capsule. We tested all type of the dietary supplements. The mean recoveries of 23 targeted compounds in different formulations were from 74.4 to 119.3%. The RSD is less than 6.6% and was shown suitable the international guideline. In LC-MS/MS validation, LOD and LOQ of instrument were found to be 0.0003∼0.3 ㎍/mL and 0.0009∼0.600 ㎍/mL, respectively. LOD and LOQ of method were found to be 0.006∼6.000 ㎍/mL and 0.018∼12.000 ㎍/mL, respectively. The linearity was found to be over 0.99 and the precision was 0.1∼9.8%(intra-day), 0.3∼9.6%(inter-day), the accuracy was 82.7∼116.7% (intra-day), 84.3∼113.0%(inter-day), the stability was less than 5.4% relative standard deviation(RSD). The mean recovery was found to be 83.9∼117.9% for the dietary supplements and less than 5.2% RSD. In our team, we have found many dietary supplements that sildenafil and analogues adulterated. A sample was confiscated and sent to our team by Criminal Investigations Office of MFDS. An unknown compound was detected by HPLC-PDA and LC-Q-TOF method. The UV spectrum of suspicious compound was similar to that of sildenafil, although, molecular weights of these two compounds were clearly different. The sample was isolated by semi-prep LC and the structure of this compound was identified by NMR. As the result, propoxyphenylthiosildenafil and propoxyphenylthiohomosildenafil were the first identified in the world,
propoxyphenylthiohydroxyhomosildenafil and propoxyphenylthioaildenafil were the first identified in Korea. Through this study, the advanced analytical method were developed and established to distinguish unauthorized antihistamine substances. This study might help preventing food-related incidents and clamping down on illegally circulated food.

목차 Contents

• 표 지 ... 1
• 자체연구개발과제 연차실적ㆍ계획서 ... 2
• 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목 차 ... 5
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 6
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 6
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 6
• 제2장 총괄연구개발과제의 국내․외 연구개발 현황 ... 9
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 10
• 제 1절 항히스타민성분 동시분석법 개발 및 결과 ... 16
• 제 2절 물질 구조규명 ... 74
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 119
• 제1절 식품 중 항히스타민 성분 동시분석법 확립 ... 119
• 제2절 식품 중 신규물질 규명 ... 120
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 122
• 제1절 목표달성도 ... 122
• 제2절 관련분야에의 기여도 ... 122
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 123
• 제1절 활용성과 ... 123
• 제2절 활용계획 ... 123
• 제7장 참고문헌 ... 125
• 제8장 첨부자료 ... 127
• 차기연도 연구개발 계획 ... 151
• 끝페이지 ... 163