보고서 정보
주관연구기관 |
전북대학교 Chonbuk National University |
연구책임자 |
윤봉식
|
참여연구자 |
이인경
,
석순자
,
이승웅
,
김영숙
,
염지희
,
기대원
,
이명석
,
김성은
,
송자경
,
김대원
,
이호근
,
이영희
,
이난희
,
김고은
,
고빈다 바타라이
,
황평한
,
김선영
,
샤마나빈
,
양유진
|
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2013-03 |
과제시작연도 |
2010 |
주관부처 |
산림청 |
사업 관리 기관 |
산림청 Korea Forest Service |
등록번호 |
TRKO201400015490 |
과제고유번호 |
1405001007 |
DB 구축일자 |
2014-09-20
|
키워드 |
산림균류,생리활성물질,기능성식품,분리 및 정제,화학구조Forest-fungi,Bioactive substances,Nutraceutical,Isolation & purification,Chemical structure
|
초록
▼
- 산림균류의 다양성 조사 및 133점의 균류 확보와 추출물 라이브러리 구축.
- 소나무잔나비버섯, 검은잔나비버섯, 콩버섯, 장수상황버섯으로부터 총 12종의 활성물질을 분리, 정제하고 분광분석방법에 의하여 6종의 신규 화합물 도출.
- 항산화 및 항염 활성물질 davallialactone과 pachymic acid의 구강치수세포에서의 항염증작용 및 항노화작용을 밝히고 작용기전을 규명. 항염 활성물질 pachymic acid의 뼈 보호와 재생 효과를 밝히고, 항암 활성물질 fomitoside K 의 암세포 특이적인 세포독성
- 산림균류의 다양성 조사 및 133점의 균류 확보와 추출물 라이브러리 구축.
- 소나무잔나비버섯, 검은잔나비버섯, 콩버섯, 장수상황버섯으로부터 총 12종의 활성물질을 분리, 정제하고 분광분석방법에 의하여 6종의 신규 화합물 도출.
- 항산화 및 항염 활성물질 davallialactone과 pachymic acid의 구강치수세포에서의 항염증작용 및 항노화작용을 밝히고 작용기전을 규명. 항염 활성물질 pachymic acid의 뼈 보호와 재생 효과를 밝히고, 항암 활성물질 fomitoside K 의 암세포 특이적인 세포독성 효과 및 작용기전을 규명하고 동물모델에서 암의 성장과 전이 억제를 밝힘.
- Davallialactone의 항암제 부작용 억제 효과 및 사염화탄소유도 급성간염에 대한 항염증 활성 및 간기능 회복 활성을 동물시험에 의하여 규명.
Abstract
▼
1. Forest mushrooms of 133 samples were collected at national mountains, Korea, in 2010-2012 and were classified.
2. The collected forest mushrooms were extracted with methanol and concentrated under reduced pressure, and solubilized in dimethyl sulfoxide (DMSO) at a concentration of 10 mg/mL to
1. Forest mushrooms of 133 samples were collected at national mountains, Korea, in 2010-2012 and were classified.
2. The collected forest mushrooms were extracted with methanol and concentrated under reduced pressure, and solubilized in dimethyl sulfoxide (DMSO) at a concentration of 10 mg/mL to construct mushroom extract library.
3. Antioxidant activity of the forest mushrooms extracts were evaluated by using ABTS radical scavenging activity, DPPH radical scavenging activity, and reducing power activity.
4. The methanolic extract of Fomitopsis pinicola was exhibited potent anti-inflammatory activity. Active compounds FP-1 and FP-3 were purified from the methanolic extract of F. pinicola through various column chromatographies and preparative HPLC. Their chemical structures were identified as a lanostane-class triterpenoid isofucosterol and methylprotocatechuic acid, respectively, by mainly NMR and mass spectroscopic methods.
5. The methanolic extract of Datronia scutellata was exhibited potent anti-inflammatory activity. Active compounds FC-1, FC-2, FC-3, and FC-51-8 were purified from the methanolic extract of F. castanea through various column chromatographies and preparative HPLC. Their chemical structures were determined by NMR and mass spectroscopic methods as pachymic acid, 5α,8α-epidioxyergosta-6,9,22-triene-3β-ol, 5 α,8α-epidioxyergosta-6,9-diene-3β-ol, and a new triterpene glucoside, respectively. A new compound FC-51-8 was designated as fomitoside K.
6. The methanolic extract of Daldinia concentrica was exhibited potent antioxidant activity. Active compounds DCE-1, DCE-2, DCE-3, DCE-4, and DCE-5 were purified from the methanolic extract of D. concentrica through various column chromatographies and preparative HPLC. Their chemical structures were determined as new isoindolinone compounds by extensive NMR and mass spectroscopic analysis. Therefore, these new compounds were designated as daldinan A, daldinan B, daldinan C, methyldaldinan B, and methyldaldinan C, respectively. These compounds exhibited potent ABTS radical scavenging activity.
7. Davallialactone is a polyphenol with potent antioxidant and anti-inflammatory activity. To investigate its biological activity, davallialactone was purified from the fruiting body of Phellinus xeranticus with modified purification procedure and was provided to collaborative research teams.
8. The fruiting body of Phellinus xeranticus was very difficult to collect because of its rareness in nature. Thus, we tried to isolate davallialactone from the cultivated forest mushroom Phellinus baumii with modified purification procedure. Davallialactone was successfully obtained from the forest mushroom P. baumii with high yield and high purity.
9. Anti-oxidant character of davallialactone showed LPS-induced anti-inflammation activity in dental pulp cells, and its mechanism was proved inhibition of NF-kB translocation to nucleus followed by ERK1/2 signal blocking.
10. Pachymic acid showed oxidative stress induced anti-inflammation activity in dental pulp cells, and its main function was HO-1 overexpression.
11. Fomitoside K had an superior anti-cancer activity against several cancer cells compared to normal cells, and its main function was to increase cellular ROS formation which brought to mitochondria mediated apoptosis in oral cancer cells.
12. Anti-inflammatory character of pachymic acid showed to protect and regenerate bone against several stress, and its mechanism was proven as inhibition of AP-1 activity and NF-kB translocation followed by SAPK/JNK signal inhibition.
13. Davallialactone showed anti-inflammation and cell survival activity against oxidative stress in dental pulp cells, and this activity induced odontogenesis and dentin mineralization.
14. Davallialactone showed anti-ageing activity and anti-inflammation of age-related inflammation, and its main mechanism was proved as inhibition of ERK1/2.
15. Davallialactone protected cardiotoxicity against adriamycin-induced side effect, and its powerful anti-oxidant character was functional evidence.
16. In addition, davallialactone also recovered liver function and liver inflammation against CCl4 toxicity.
17. Fomitoside K inhibited tumor growth and metastasis in mouse model.
목차 Contents
- 표 지 ... 1
- 제출문 ... 3
- 보고서 요약서 ... 4
- 요 약 문 ... 5
- SUMMARY ... 12
- CONTENTS ... 14
- 목차 ... 18
- 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 22
- 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 25
- 제 1 절 국내의 기술 개발 현황 ... 25
- 제 2 절 국외의 기술 개발 현황 ... 26
- 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 29
- 제 1 세부 과제 ... 29
- 제 1 절 재료 및 방법 ... 29
- 1. 산림 균류의 다양성 조사 및 추출물 라이브러리 제조 ... 29
- 가. 산림 균류의 다양성 조사 및 확보 ... 29
- 나. 산림 균류 메탄올 추출물 라이브러리의 제조 ... 29
- 2. 시약 및 기기 ... 29
- 3. 분석기기 ... 30
- 가. 자외선 스펙트럼 (UV spectrum) ... 30
- 나. 적외선 스펙트럼 (IR spectrum) ... 30
- 다. 질량분석 스펙트럼 (mass spectrum) ... 30
- 라. 핵자기공명 스펙트럼 (NMR spectrum) ... 30
- 4. 항산화 활성 측정 ... 30
- 가. DPPH radical 소거 활성 ... 30
- 나. ABTS radical cation 소거 활성 ... 31
- 다. 환원력 검정 ... 31
- 제 2 절 연구 결과 및 고찰 ... 32
- 1. 산림 균류의 다양성 조사 및 추출물 라이브러리 제조 ... 32
- 2. 확보한 산림 균류 추출물의 항산화 활성 ... 36
- 3. 소나무잔나비버섯(Fomitopsis pinicola) 유래 활성물질의 분리, 정제 및 화학구조 ... 38
- 가. 소나무잔나비버섯(Fomitopsis pinicola) 유래 활성물질의 분리 및 정제 ... 38
- 나. 소나무잔나비버섯(Fomitopsis pinicola) 활성물질의 화학 구조 규명 ... 39
- 4. 검은잔나비버섯(Datronia scutellata) 유래 활성물질의 분리, 정제 및 화학구조 ... 47
- 가. 검은잔나비버섯(Datronia scutellata) 유래 활성물질의 분리 및 정제 ... 47
- 나. 검은잔나비버섯(Datronia scutellata) 유래 활성물질의 화학구조 규명 ... 48
- 5. 콩버섯(Daldinia concentrica) 유래 신규 항산화 화합물의 분리, 정제 및 화학구조 ... 69
- 가. 콩버섯(Daldinia concentrica) 유래 신규 항산화 화합물의 분리 및 정제 ... 69
- 나. 콩버섯(Daldinia concentrica) 유래 신규 항산화 화합물의 화학구조 규명 ... 70
- 다. 콩버섯(Daldinia concentrica) 유래 신규 화합물의 항산화 활성 ... 91
- 6. 기와층버섯(Phellinus xeranticus) 항산화물질 davallialactone의 분리, 정제 및 화학구조 ... 93
- 가. 기와층버섯(Phellinus xeranticus) 유래 활성물질의 분리 및 정제 ... 93
- 나. Davallialactone의 화학 구조 확인 ... 94
- 7. 장수상황버섯(Phellinus baumii )으로부터 davallialactone의 분리, 정제 및 화학구조 ... 95
- 가. 장수상황버섯(Phellinus baumii )으로부터 davallialactone의 정제 방법 확립 및 확보 ... 95
- 제 2 세부 과제 ... 97
- 제 1 절 재료 및 방법 ... 97
- 1. 항염증활성물질 스크리닝 실험방법 ... 97
- 2. 항산화활성물질 스크리닝 실험방법 ... 97
- 3. 항암활성물질 스크리닝 실험방법 ... 97
- 4. 항산화, 항염증, 항암 활성성분의 단일물질분리 ... 98
- 제 2 절 연구 결과 및 고찰 ... 99
- 1. 항산화활성을 나타내는 davallialactone의 구강치수세포의 항염증작용 및 기전 연구 ... 99
- 가. 연구배경 ... 99
- 나. 연구방법 ... 99
- 다. 연구결과 ... 99
- 2. 치수세포에서 산화스트레스에 대한 pachymic acid의 항염증활성 및 치수보호 기전에 관한 연구 ... 103
- 가. 연구배경 ... 103
- 나. 연구방법 ... 103
- 다. 연구결과 ... 104
- 3. 구강암세포에서 fomitoside K의 항암활성 기전 연구 ... 108
- 가. 연구배경 ... 108
- 나. 연구결과 ... 108
- 4. 치조골세포에서 Pachymic acid의 항염증활성 및 뼈의 재생능력에 관한 기전 연구 ... 112
- 가. 연구배경 ... 112
- 나. 연구결과 ... 112
- 5. 치수세포에서 Davallialactone의 당뇨스트레스로부터 항염증활성 및 상아모세포 분화유도에 관한 기전 연구 ... 115
- 가. 연구배경 ... 115
- 나. 연구방법 ... 115
- 다. 연구결과 ... 115
- 6. 노화계세포에서 davallialactone의 노화과정의 항염증활성 및 노화억제에 관한 기전 연구 ... 119
- 가. 연구배경 ... 119
- 나. 연구방법 ... 119
- 다. 연구결과 ... 119
- 제 3 세부 과제 ... 123
- 제 1 절 연구 개요 ... 123
- 제 2 절 활성평가를 위한 연구방법 및 동물모델 구축 ... 124
- 1. 항암동물모델 구축 ... 124
- 가. Nude mouse를 이용한 기초적인 항암약물 특성 모델 ... 124
- 나. B16/BL-6 mouse를 이용한 폐암 전이 모델 ... 124
- 2. 항염증 모델 구축 ... 125
- 가. 구강염증 모델 ... 125
- 제 3 절 연구 결과 ... 127
- 1. Adriamycin 투여에 의한 심장근 보호 항산화 물질 탐색 모델 구축 및 davallialactone 심장근 보호 효과 ... 127
- 가. 연구 개요 및 방법 ... 127
- 나. 연구결과 ... 127
- 2. Davalliactone의 간 독성 물질에 의한 급성 및 만성 간손상 및 간염 치료 및 예방 효과 ... 131
- 가. 연구개요 ... 131
- 나. 연구방법 ... 131
- 다. 연구결과 ... 131
- 3. Fomitoside K의 동물모델에서 항암활성 ... 136
- 가. 연구개요 ... 136
- 나. 연구결과 ... 136
- 제 4 장 목표달성도 및 관련분야의 기여도 ... 137
- 제 1 절 목표달성도 ... 137
- 제 2 절 관련분야에의 기여도 ... 140
- 제 3 절 정량적 성과 ... 141
- 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 146
- 제 1 절 추가연구의 필요성 ... 146
- 1. 균류자원 다양성의 지속적 확보 필요 ... 146
- 2. 생리활성물질의 지속적인 연구개발 필요 ... 146
- 3. 기 도출한 화합물의 계속적인 개발연구 필요 ... 146
- 제 2 절 타 연구에의 응용 ... 147
- 제 3 절 기업화 추진 방안 ... 147
- 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 149
- 제 7 장 참고문헌 ... 151
- 끝페이지 ... 156
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