초록 ▼

o 연구결과
본 연구에서는 다섯 가지 정도의 당분해 과정 전이상태 유사물질을 합성하여 SJL/J in vivo immunization 방법과 BALB/c in vitro immunization 방법을 이용하여 다 수의 당분해 촉매항체를 얻었다. 이와 같이 얻어진 촉매항체 중에서 그 효소적 활성이 강한 5 가지 항체에 관하여 자세하게 기질 특이성，촉매활성，효소활성 저해등과 같은 여려 가지 효소적 성질을 조사하였다. 이들 당분해 촉매항체의 heavy chain과 light chain의 V 지역 유전자를 클로닝 하였으며，그 들 유전

o 연구결과
본 연구에서는 다섯 가지 정도의 당분해 과정 전이상태 유사물질을 합성하여 SJL/J in vivo immunization 방법과 BALB/c in vitro immunization 방법을 이용하여 다 수의 당분해 촉매항체를 얻었다. 이와 같이 얻어진 촉매항체 중에서 그 효소적 활성이 강한 5 가지 항체에 관하여 자세하게 기질 특이성，촉매활성，효소활성 저해등과 같은 여려 가지 효소적 성질을 조사하였다. 이들 당분해 촉매항체의 heavy chain과 light chain의 V 지역 유전자를 클로닝 하였으며，그 들 유전자의 특성에 관하여 조사하여 본 결과 이들 항체들은 서로 그 아미노산 배열이 유사하며 서로 공통적연 특징과 다른 특정을 가지고 있는 것으로 확인되었다. Ab 6h4h의 V 지역 유전자 클론으로부터 재조합된 heavy chain과 light chain V 지역 단백질을 발현할 수 있는 클론을 얻었으며，이들을 대장균에 형질전환하고 클론된 V 지역 유전자의 발현을 유도하여 재합된 V 지역 단백질을 얻었다. 대장균 배양으로부터 재조합된 V 지역 단백질을 분리 정제하여 그 효소활성을 조사하여본 결과，이들 재조합 단백질 중에서 heavy chain V 지역 단백질에서 촉매활성을 확인할 수 있었다.

Abstract ▼

Development of the catalytic antibodies using s야￡퍼η and diversity of the natural antibody allows novel way to produce artificial enzyme molecules. In this study, we studied development of catalytic antibodies with glycosidase activity that leads to the development of the glycosidase antibody catalyz

Development of the catalytic antibodies using s야￡퍼η and diversity of the natural antibody allows novel way to produce artificial enzyme molecules. In this study, we studied development of catalytic antibodies with glycosidase activity that leads to the development of the glycosidase antibody catalyzing cornplex carbohydrate moiety such as sialy-Lewis X of the cell adhesion molecules.
Various transition state analogues of the glycosidase enzyme catalysis were synthesized and the resulting compounds were immunized using BALB/c in vitro immunization and S]L/J rnice in vivo immunization protocols. Several scores of monoclonal antibodies with glycosidase activity were prepared and their catalytic constants were exarnined using purified monoclonal antibodies. The genes encoding V regions of the glycosidase antibodies were also cloned and sequenced, revealing common motifs of the glycosidase antibodies. The recombinant V region proteins were also prepared and their catalytic constants were deterrnined.
The findings obtained in this research will eventually lead to development of more advanced glycosidase antibodies catalyzing complex carbohydrate structures including sialyl-Lewis X structure. It also provides some information about the action mechanism of the natural glycosidase enzymes, and ground work for development other catalytic antibodies involved in various other biological or non-biological reactions.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제 출 문 ... 3
• 요 약 문 ... 4
• 영문요약문 ... 7
• 목 차 ... 8
• 제 1장 서 론 ... 9
• 제2장 국내·외 기술개발 현황 ... 11
• 제 3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 13
• 제 1절 연구내용 ... 13
• 제 2절 연구수행방법 ... 14
• 제 3절 연구수행결과 ... 33
• 제4장 달성도 및 대외 기여도 ... 60
• 1. 연구개발목표의 달성도 ... 60
• 2. 대외 기여도 ... 61
• 제 5 장 연구개발결과의 활용성과 및 계획 ... 63
• 제 6장 중요변경사항 ... 65
• 제 7장 참고문헌 ... 66
• 최종보고서 요약 (초록) ... 69
• 끝페이지 ... 69