보고서 정보
주관연구기관 |
고려대학교 산학협력단 Korea University |
연구책임자 |
오승익
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보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2013-04 |
과제시작연도 |
2012 |
주관부처 |
보건복지부 [Ministry of Health & Welfare(MW)(MW) |
등록번호 |
TRKO201400022460 |
과제고유번호 |
1465011340 |
사업명 |
보건의료기술연구개발 |
DB 구축일자 |
2019-11-16
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키워드 |
골수-유래 중간엽줄기세포.교차분화.유도신경줄기세포.외래유전자.염색체이상.BM-MSC.Transdifferentiation.Induced neural stem cell.Exogenous genes.Chromosomal abnormality.
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DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201400022460 |
초록
▼
연구결과:
1. 인간의 골수-유래 중간엽줄기세포의 특성을 다양한 줄기세포 특이적 마커들로 확인(Positive marker; CD29, CD73, CD90, CD105, Negative marker; CD14, CD34, CD45)하였고, 지방, 연골 및 골세포로 분화시킴으로써 중배엽성 분화능력이 확인함.
2. 외래유전자의 도입이 없는 신경줄기세포로 교차분화의 유도 방법을 개발한 결과, 유도신경줄기세포를 확보 함.
3. 확보된 유도신경줄기세포는 mRNA 및 Protein 수준에서 다양한 신경 줄기세포의 마커(Nest
연구결과:
1. 인간의 골수-유래 중간엽줄기세포의 특성을 다양한 줄기세포 특이적 마커들로 확인(Positive marker; CD29, CD73, CD90, CD105, Negative marker; CD14, CD34, CD45)하였고, 지방, 연골 및 골세포로 분화시킴으로써 중배엽성 분화능력이 확인함.
2. 외래유전자의 도입이 없는 신경줄기세포로 교차분화의 유도 방법을 개발한 결과, 유도신경줄기세포를 확보 함.
3. 확보된 유도신경줄기세포는 mRNA 및 Protein 수준에서 다양한 신경 줄기세포의 마커(Nestin, NCAM, Sox1/2, Mushashi, Tuj1 등)가 발현됨이 확인됨.
4. 유도신경줄기세포는 냉동보관 및 장기배양 후에도 지속적으로 안정된 증식을 한다는 사실을 Doubling time으로 확인 함.
5. 유도신경줄기세포를 신경세포, 별아세포 및 희돌기아교세포로 분화유도를 실시 후 면역형광염색방법으로 확인 한 결과, 각각의 신경세포 특이적인 마커들이 모두 발현됨이 확인 됨.
6. 유도신경줄기세포를 신경세포로 분화 유도시켜 그 기능성을 전기생리학적 방법으로 활동전위 전도 능력을 확인 중에 있음.
7. 유도된 신경 줄기세포의 염색체이상 유무를 확인하기 위해서 핵형 분석을 실시한 결과 비정상적인 염색체형태 및 수적 증가가 확인됨.
8. 면역거부반응이 저하된 생쥐의 머리 및 피하에 이식된 유도신경줄기세포는 이식된 부위에서 종양이 형성됨.
9. 현재 유도된 신경줄기세포는 뇌종양암세포의 특성을 보임. 그러므로 임상 가능한 정상 핵형을 갖는 신경줄기세포를 유도하는 in-vitro 유도 및 배양방법의 개발이 우선적으로 이루어져야 할 사항 임.
Abstract
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In these studies, we would like to develop a new method to apply autograftable cell-beased therapy to the patients of brain disorders with neural stem cells, transdifferentiated from human bone marrow-derived stem cells (BM-MSCs). This induced neural stem cell (iNSC) did not contain any exogenous ge
In these studies, we would like to develop a new method to apply autograftable cell-beased therapy to the patients of brain disorders with neural stem cells, transdifferentiated from human bone marrow-derived stem cells (BM-MSCs). This induced neural stem cell (iNSC) did not contain any exogenous genetic factor in itself; thereby potentially lead to be more safely to apply to treat patients of degenerative brain disorders.
First, we analyzed the characteristics of human bone marrow-derived stem cell with various stem cell specific antigens including CD29, CD73, CD90, CD105 as a positive marker and CD14, CD34 and CD45 as a negative marker. And then we identified the lineage specific differential potential of BM-MSCs, which can be differentiated into adipocytes, chondrocytes and also osteocytes.
Next, we developed the method for trans-differentiation of BM-MSC into neural stem cell without any exogenous genetic materials.
1. iNSCs were successfully expressed in both mRNA and protein levels of specific neuronal markers as follows, Nestin, NCAM, Sox1/2, Mushashi, Tuj1.
2. iNSCs were successfully expressed neuronal specific markers as follows, Nestin, NCAM, Sox1/2, Mushashi, Tuj1 in both mRNA and protein levels.
3. iNSC line proliferates very rapidly with doubling time of < 24 h and showed stably proliferative regardless of passage numbers (from early up to 20), even when iNSC line has been properly preserved in cryogenic freezing methods.
4. iNSC line could be differentiated in neurons, astrocytes and oilgodendrocytes, which expressed in respective specific markers such as Tuj1, MAP2, GFAP and O4 in protein levels.
5. iNSC line, however, displays chromosomal abnormalities in the number or structure of chromosome.
6. iNSCs showed to be tumorigenic in immunocompromised model mice, when injected into subcutaneous and also orthotopic regions.
Therefore, developing a new method to generate neural stem cells without chromosomal abnormality should be given priority over any others.
목차 Contents
- 1. 표지 ... 1
- 2. 제출문 ... 2
- 3. 보고서 요약서 ... 3
- 4. 요약문(한글) ... 4
- 5. 요약문(영문) ... 5
- 6.1 총괄연구개발과제의 연구성과 실적 및 향후 계획 ... 6
- 6.2 연구성과 유형별 세부 내역 ... 7
- 6.2.1 연구논문 ... 7
- 6.2.2 지적재산권 ... 7
- 7. 참여연구원 현황표 ... 8
- II. 총괄연구과제 연구결과 ... 9
- 1. 연구개발과제의 배경 및 필요성 ... 10
- 2. 국내외 기술개발 현황 ... 11
- 3. 연구개발과제의 추진체계 ... 12
- 4. 연구개발수행 내용 및 결과 ... 16
- 5. 목표달성도 및 관련분야 기여도 ... 21
- 6. 향후 연구성과 추진 계획 ... 23
- 7. 연구개발결과의 파급효과 ... 23
- 8. 연구개발결과의 활용계획 ... 24
- 9. 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 24
- 10. 참고문헌 ... 25
- IV. 첨부서류 ... 26
- ○. 실적증빙자료 및 첨부서류 목차 ... 27
- 1. 자체평가의견서 ... 28
- 2. 실적 증빙자료 ... 32
- 3. 기타 첨부서류 ... 34
- 끝페이지 ... 37
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