초록

○ 연구결과
*백합화분의 배양 및 Agrobacterium을 이용한 화분의 형질전환법을 확립
*HBsAg 발현백합화분을 제조 및 확인
*Mouse에 경구투여 시 왕성한 HBsAg에 대한 항체가 형성 확인
*간편한 식용백신 생산기술 확립

Abstract ▼

- Screening of lily plant producing pollen in high amount with good quality
- Analysis of pollen culture. storage and transformation
- Analysis of HBsAg expressing lily pollen
- Enhancement of HBsAg gene expression in lily pollen
- Analysis of cholera toxin B as an adjuvent
- Test of

- Screening of lily plant producing pollen in high amount with good quality
- Analysis of pollen culture. storage and transformation
- Analysis of HBsAg expressing lily pollen
- Enhancement of HBsAg gene expression in lily pollen
- Analysis of cholera toxin B as an adjuvent
- Test of biosafety and edibility of lily pollen
- Analysis of HBsAg expressing pollen as an edible vaccine against HBV
- Preparation of edible vaccine diet

목차 Contents

• 제출문 ... 1
• 요약문 ... 2
• SUMMARY ... 4
• CONTENTS ... 6
• 목차 ... 10
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 14
• 제1절 연구개발의 목적과 필요성 ... 14
• 1. 백합 ... 14
• 2. 화분 ... 14
• 3. 화분(pollen)의 형질전환 및 기내배양 ... 15
• 4. 백합화분을 이용한 유용단백질생산 ... 15
• 5. 백합화분과 분자농업(Molecular farming) ... 16
• 6. 백합화분을 이용한 식용간염백신의 생산 ... 17
• 가. 화분의 食用가능성 ... 17
• 나. 식용백신의 개발 ... 17
• 다. 식용간염백신 ... 19
• 7. 기대효과 ... 19
• 제2절 연구개발 범위 ... 20
• 제2장 국내외 기술개발현황 ... 21
• 제3장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 22
• 제1절 백합화분 저장, 기내배양, 형질전환 ... 22
• 1. 화분저장 및 기내배양 ... 22
• 가. 연구내용 ... 22
• 나. 결과 ... 23
• 2. 형질전환 ... 33
• 가. 연구내용 ... 33
• 나. 결과 ... 34
• 다. 결론 ... 39
• 제2절 백합화분의 GUS 발현증대 및 HBsAg발현 ... 40
• 1. 화분의 GUS 발현증대 ... 40
• 가. ntp303 5UTR의 DNA 합성, cloning, 발현 ... 40
• 나. Dc3 cloning과 GUS발현분석 ... 40
• 다. Dc3 자극과 GUS발현의 차이분석 ... 45
• 라. 4x omega enhancer의 cloning 및 GUS발현분석 ... 49
• 2. 백합화분에서의 HBsAg형질전환 및 발현분석 ... 53
• 가. 본 연구에서 이용한 HBsAg adw type ... 53
• 나. PCR, T-vector cloning, DNA sequencing ... 53
• 다. Southern hybridization and RT-PCR ... 55
• 라. HBsAg 단백질발현 ... 57
• 마. cis element와 HBsAg와의 재조합 및 발현 ... 57
• 제3절. 화분 섭취의 면역안전성 ... 60
• 1. 내용 및 방법 ... 60
• 가. 화분재료 ... 60
• 나. 실험동물 및 화분 투여 ... 60
• 다. 면역안전성 평가를 위한 실험방법 ... 60
• 2. 백합화분섭취의 면역안전성 결과 ... 62
• 가. 백합화분 투여군과 대조군간 일반 면역병리 비교 ... 62
• 나. 백합화분 투여의 체액면역에 미치는 영향 ... 65
• 다. 백합화분 투여의 세포면역에 미치는 영향 ... 68
• 라. 결론 ... 69
• 제4절 화분을 이용한 백신의 면역원성 ... 71
• 1. 재료 및 연구내용 ... 71
• 가. 재료 ... 71
• 나. 실험동물 및 화분 투여 ... 71
• 다. 혈장 내 간염 바이러스 항체의 수준 측정 ... 73
• 라. 통계처리 ... 73
• 2. 결과 ... 75
• 가. 예비 실험결과 ... 75
• 나. 본 실험결과 (1) ... 75
• 다. 본 실험결과 (2) ... 77
• 라. 혈장내 IgA 측정 ... 80
• 3. 결론 ... 82
• 제4장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 83
• 제1절 1차년도 연구개발목표, 달성도 및 기여도 ... 83
• 1. 개발목표 및 달성도 ... 83
• 2. 기여사항 ... 83
• 제2절 2차년도 연구개발목표, 달성도 및 기여도 ... 84
• 1. 1차년도 종료 시 보완요구사항 및 2년차 이행계획 ... 84
• 2. 개발목표 및 달성도 ... 85
• 3. 기여사항 ... 85
• 제3절 3차년도 연구개발목표, 달성도 및 기여도 ... 87
• 1. 2차년도 종료 시 보완요구사항 및 3년차 이행계획 ... 87
• 2. 개발목표 및 달성도 ... 88
• 3. 기여사항 ... 88
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 90
• 제1절 추가연구의 필요성 ... 90
• 제2절 연구성과의 활용 ... 90
• 제6장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 91
• 제7장 참고문헌 ... 92
• 끝페이지 ... 97