보고서 정보
주관연구기관 |
경북대학교 KyungPook National University |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
|
발행년월 | 2002-11 |
주관부처 |
농림부 Ministry of Agriculture and Forestry |
등록번호 |
TRKO201400023980 |
DB 구축일자 |
2014-11-10
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초록
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Ⅳ. 연구개발 결과 및 활용에 대한 건의
제 1 절 연구개발 결과
발효에 의한 생물활성 강화 기능성 대두제품 개발을 위하여 1 개의 세부과제와 1 개의 협동과제로 연구를 수행하였다. 제1세부과제어서는 발효에 의한 생물활성 강화 기능성 대두제품을 개발하기 위하여 대두 발효 미생물을 분리하였으며, 이를 이용하여 대두를 발효시켜 isoflavone aglycone의 함량이 높은 발효대두를 제작하고, 또 선발된 균주가 생산하는 효소를 이용하여 대두분으로부터 isoflavone 배당체를 가수분해하고 isoflavone rich f
Ⅳ. 연구개발 결과 및 활용에 대한 건의
제 1 절 연구개발 결과
발효에 의한 생물활성 강화 기능성 대두제품 개발을 위하여 1 개의 세부과제와 1 개의 협동과제로 연구를 수행하였다. 제1세부과제어서는 발효에 의한 생물활성 강화 기능성 대두제품을 개발하기 위하여 대두 발효 미생물을 분리하였으며, 이를 이용하여 대두를 발효시켜 isoflavone aglycone의 함량이 높은 발효대두를 제작하고, 또 선발된 균주가 생산하는 효소를 이용하여 대두분으로부터 isoflavone 배당체를 가수분해하고 isoflavone rich fraction을 수집하여 이를 이용한 고기능성 가공식품을 개발 제조하였다. 이상의 결과를 정리하면 다음과 같다.
1. 제 1 세부과제 : 고기능성 대두제품 제조를 위한 발효균주 개발
가. 고기능성 대두제품을 제조하기 위하여 재래식 된장, 매주, 청국장으로부터 isoflavone 배당체를 고효율로 가수분해 할 수 있는 균주 Bacillus sp. SI, Bacillus sp. K123-1과 된장의 향미를 우수하게 하는 균주 Bacillus subtilis SM2를 선발하였다.
나. 선발된 균주로 발효대두를 제조하기 위한 최적 발효조건의 검토한 결과 증자한 대두에 선발된 균주 배양액을 10% 접종하고, 30℃에서 5 일간 발효시킨 후 증자대두의 수분함량에 대해 12%의 소금을 첨가하고 15 일간 숙성 하는 것이 가장 좋았으며, isoflavone 배당체를 aglycone으로 95%이상 전환시켰고 맛과 향도 우수하였다.
다. 발효대두에 가염 농도는 12%가 가장 적당하였으며, 첨가제로서는 10% 쌀을 첨가하는 것이 맛과 향의 증가에 가장 적합한 것으로 나타났다.
라. 향미 및 식미 증진을 위하여 선발된 균주 Bacillus sp. SI와 Bacillus subtilis SM2를 혼합 접종하여 발효시킴으로 isoflavone 배당체의 분해도 높고 맛과 향도 우수한 된장을 제조할 수 있었다.
마. 대규모의 제품을 생산하기 위한 발효 및 제품화 공정 검토하였다.
바. 선발된 균주 Bacillus sp. K123-1이 생산하는 isoflavone glucosidase를 순수하게 정제하여 SDS-PAGE로 분자량을 측정한 결과 44.8 kDa 이었다.
사. 정제된 isoflavone glucosidase는 pH 4.5 부근에서 가장 활성이 높았고 pH 4.0∼8.0 사이에서는 안정하였다.
아. 정제된 isoflavone glucosidase의 최적온도는 45℃이고, 30 분간 열처리에서 45℃ 까지는 안정하였으나 그 이상의 온도에서는 급격히 실활하였다.
자. Iosflavone rich fraction을 조제하기 위하여 대두, 대두박, 탈지대두분(大豆粉)을 사용하여 100% 메탄올로 3 회 환류추출한 결과 대두분에서 가장 많은 isoflavone이 추출되었다. 대두분을 사용하여 isoflavone rich fraction 조제공정을 확립하기 위하여 대두분에 조제한 조효소액 (isoflavone glucosidase)을 가하여 45℃에서 3 시간 처리하고 이를 에틸아세테이트로 추출하여 isoflavone rich fraction을 추출하였다. 그 결과 isoflavone 배당체의 aglycone으로 전환율은 97% 이상이였고, 회수율은 genistein의 경우 99% 이상이었다.
차. Isoflavone rich fraction을 비스킷 과 식초에 첨가하여 기능성을 높인 식품을 제작하였으며, 비스킷의 경우 1 일 3 개의 비스킷만으로도 각종 질병예방에 가능한 일일 권장량(30 ∼ 60 ㎎/day)을 충족시킬 수 있었다.
2. 협동과제 : 발효 대두제품으로부터 약리활성 물질의 분리 및 동정
가. Isoflavone을 신속하게 분석하기 위하여 분석 조건을 검토한 결과, column은 Nova-Pak(Waters사, 3.9×150 mm), 이동상은 1% acetic acid를 함유한 H2O(A)와 1% acetic acid를 함유한 methanol(B) [용매 (B)가 40 분 동안 10%에서 60%까지 증가하도록 농도구배를 줌], flow rate는 0.8 ㎖/min, detector는 UV 254 nm로 하였을 때 50 분 이내에 genistein, daidzein 및 이들의 배당체가 base line separation되는 결과를 얻었다
나. 대두를 분석하기 위한 최적의 추출조건을 확립하기위하여 에타놀의 농도와 용질에 대한 추출 용매의 비, 추출시간 등을 고려하였을 때 95% 에타놀에서 대두 40g에대하여 100ml의 용매를 사용하여 2 시간 추출하였을 때 가장 좋은 결과를 얻을 수 있었다.
다. 발효가 대두의 항치매 효과에 미치는 영향을 검토하기 위하여 제1 세부과제로부터 isoflavone aglycone 전환 능력이 우수한 것으로 선발된 균주로 발효시킨 대두 추출물에 대한 PEP 저해활성을 측정한 결과, 균주에 따른 저해 활성에는 큰 차이가 없었으나 그 중 K221-1, K114-1, K113-1, K123-1, C20-2, SI 등 5종의 균주들이 다른 균주에 비하여 약간 높은 활성을 나타내었다. 또한 발효 전의 대두에 비하여 PEP 저해활성은 약 두 배 이상 증가되어 본 연구진에 의하여 선발된 균주에 의하여 발효를 거치는 것이 발효전의 대두를 섭취하는 것보다 치매의 예방, 치료에 더 좋은 효과를 나타낼 수 있을 것으로 기대되었다.
라. PEP 저해활성의 활성본체를 찾기 위하여 각종 chromatography를 통하여 분리 후 기기분석에 의하여 구조를 동정한 바 이들은 각각 daidzein과 genistein으로 판명되었으며 이들의 IC50값은 각각 20 μM, 17 μM이었다. PEP 저해활성의 positive control로 사용되는 Z-Pro-Prolinal (IC50, 0.07 μM)에 비해서는 활성이 낮았으나 식품으로서 사용된다는 점을 감안한다면 이들 화합물을 비교적 고농도로 함유하는 발효 대두, 또는 발효대두 유래의 isoflavone rich fraction이 치매의 예방에 이용될 수 있을 것으로 기대된다.
마. 선발된 균주 7종을 이용하여 만든 발효대두를 대상으로 항혈전 활성 (aPTT, TT assay)을 측정하였을 때 SI 및 SM2 균주가 가장 높은 활성을 나타내었다. 발효 대두로부터 혈전 생성 억제 물질을 분리하기 위하여 에타놀 (EtOH) 침전법에 의하여 분획을 나누고 각각의 분획에 대한 aPTT 및 TT assay를 행한 결과 80% EtOH에 침전하며 60% EtOH에 의해서도 침전하는 I-60이 가장 높은 활성을 나타내었다. 당 및 단백질의 함량을 분석한 결과 활성 분획과 불활성 분획 사이에 함량의 차이는 인정되지 않았다. 따라서 아마도 당과 단백질의 함량의 차이 보다는 당의 종류, 또는 분자량의 크기가 활성에 필요한 부분이라고 추측되어진다.
바. 혈전 용해 활성에 대한 실험에서 발효전의 대두는 거의 활성을 나타내지 않았으나 SI 균주로 발효시킨 대두는 10 mg/ml의 농도에서 대조군으로 사용한 trypsin (1mg/ml)에 비해 약 2/3의 활성을 나타내었다.
사. 발효 대두의 항산화 활성을 시판된장과 비교한 결과 거의 유사한 활성 (18%)을 나타내었으나 발효시키지 않은 대두(2.3%)에 비해서는 일곱 배 이상의 활성을 나타내었다.
아. 발효에 의한 항치매 활성 증감을 측정하기 위하여 최종 선발된 5종의 균주로 발효시킨 대두에 대하여 prolyl endopeptidase(PEP)에 대한 저해활성을 지표로 판별하였다. 대두의 PEP 저해활성은 100 ppm에서 27.4%이고 발효 후 그 활성은 약 35∼56%로 발효 후 두 배정도 활성이 증가되는 결과를 나타내었다.
자. 혈전 형성 억제 작용의 발효 후 증감 유무를 판별하기 위해 주관 연구기관으로부터 제공된 2가지 균주와 풍미개선에 좋은 1가지 균주로 발효시킨 대두의 열수 추출물에 대하여 aPTT 및 TT 활성을 측정하였다. 그 결과 발효에 의해 aPTT의 경우 약 4배 이상의 활성 증가가 나타났으며, TT assay의 경우는 약 2배 이상의 활성 증가가 있었다.
차. Isoflavone aglycone의 효율적 추출법을 검토한 결과 95%의 에타놀을 사용하여 1시간 내지 2시간 추출하고 대두 1 g 당 5 ml의 비율로 용매량을 사용하는 것이 가장 좋은 것으로 판단되었다. 이러한 결과를 바탕으로 발효대두 20 g에 대하여 100 ml의 95% 에타놀로 두 시간 추출하였을 경우 2.67g의 엑스를 얻을 수 있었으며 이 중 aglycone은 27.1 mg (엑스 건중량 비 약 1%의 aglycone)이었다. 한편 1 g의 발효 대두를 상기에서 제시한 최적조건으로 추출 후 물에 분산한 다음 ethyl acetate로 분획 후 가용성 성분을 농축하였을 때 4.68 mg의 추출물을 얻을 수 있었고 이 중 aglycone의 함량은 0.80 mg으로 건고물 당 함량이 17.1%로 에타놀 추출물에 비해 약 17배 이상의 함량을 갖는 fraction을 얻을 수 있었다.
타. 발효 대두 중 isoflavone aglycone 함량은 1.2 mg/g의 함량으로 조사되었다. 따라서 발효대두의 품질 관리 기준에 있어 isoflavone aglycone 함량은 발효대두 건조 g당 1.2 mg±10%로 설정하는 것이 바람직하며, isoflavone rich fraction을 첨가한 식초의 경우 isoflavone 함량은 100 ml 당 각각 12 ㎍±10%, 16 ㎍±10%가 되도록 설정하는 것이 바람직할 것으로 인정되었다.
파. 발효대두의 기간별 isoflavone 함량을 조사하여 유효기간 확립 설정하기 위하여 0 개월부터 5개월까지의 isoflavone의 함량을 조사한 결과 발효공정 완료 후 isoflavone 함량은 적어도 5개월 까지는 변화가 없는 것으로 판단되어 진다. 따라서 단지 isoflavone의 변질에 따른 유효기간을 설정하기 보다는 풍미나 제품의 변질에서 오는 요소를 감안하여 설정하는 것이 중요할 것으로 보여진다. 식초의 경우에는 isoflavone rich fraction을 식초 중 첨가하고 4개월간 함량의 변이를 추적해 보았으나 4개월까지는 isoflavone의 변질은 일어나지 않았다. 그러므로 적어도 4개월까지는 isoflavone의 함량 측면에서는 안전할 것으로 판단되어진다.
Abstract
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Ⅳ. RESULTS AND APPLICATIONS
1. Results of this study
In order to development of bacteria for the production of soyfoods enriched biological function by the fermentation, we isolated bacteria which can hydrolyze isoflavone glucosides into their aglycones and prepared the fermented soybean paste
Ⅳ. RESULTS AND APPLICATIONS
1. Results of this study
In order to development of bacteria for the production of soyfoods enriched biological function by the fermentation, we isolated bacteria which can hydrolyze isoflavone glucosides into their aglycones and prepared the fermented soybean paste with the isolated bacteria which could convert the isoflavone glucosides into their aglycones. We also purified the isoflavone glucosidase from the isolated bacteria, and then prepared a functional foods and food materials by isoflavone rich fraction which prepared from the hydrolysis of isoflavone glucosides with purified enzyme. The result were summerized as follows :
1) Results on 「Development of bacteria for the production of soyfoods enriched biological function by the fermentation」
① In order to produce a soyfood enriched biological function by fermentation, we isolated bacteria from the traditional soyfood such as Doenjang, Meju, Chunggukjang. The isolates, Bacillus sp. SI and Bacillus sp. K123-1 had good ability to hydrolyze isoflavone glucosides into their aglycone and Bacillus subtilis SM2 was good for the taste and flavor in the fermentation of soyfood.
② For the optimal fermentation condition 10% culture broth of the isolated strain were inoculated to the steamed soybean, fermented them at 30℃ for 5 days, and incubated for 15 days after adding 12% of salt to the water content of the steamed soybean. Ninety five percent of isoflavone glucosides in the fermented soybean were converted into their aglycones and also the taste and flavor of the fermented soybean were excellent.
③ The taste and flavor of the fermented soybean were proper when 12% salts and 10% steamed rice were added to the steamed soybean.
④ The converting ratio of isoflavone glucosides to their aglycone, taste, and flavor were enhanced in the fermentation of soybean by the inocluation of the mixture of Bacillus sp. SI and Bacillus subtilis SM2.
⑤ The manufacturing process of the fermented soybean was established at the large scale
⑥ The isoflavone glucosidase produced by Bacillus sp. K123-1 was purified to be homogeneous and estimated the molecular mass(44.8 kDa) by SDS-PAGE.
⑦ The optimal pH of the purified isoflavone glucosidase was pH 4.5 and it was stable at the range from pH 4.0 to 8.0.
⑧ The optimal temperature of purified isoflavone glucosidase was 45℃ and it was stable at 45℃ for 30 minute.
⑨ In order to prepare the isoflavone rich fraction the soybean, defatted soybean chip and defatted soybean flour were used and the isoflavones were extracted from them with 100% methanol at 80℃ for 3 hours. The largest amount of isoflavones from the defatted soybean flour were extracted among them. For the preparation of isoflavone aglycones, the defatted soybean flour was treated with the crude enzyme at 45℃ for 3 hours and the isoflavone aglycones were extracted with ethyl acetate. 97% isoflavone glucosides were converted to their aglycones and 99% genistein were recovered from the soybean flouer.
⑩ The biscuit and vinegar, which had the biological function, were prepared by the enrichment of isoflavones. The quality and taste of biscuit was not changed by the addition of isoflavone rich fraction. Isoflavones were stable during baking biscuit and in the vinegar. Three pieces of the biscuit were contain enough isoflavones(daily recommendation dosage; 30 ∼ 60 ㎎/day) for the prevention from the geriatric diseases, where a piece of the biscuit(27 g) contained 11 ㎎ isoflavones.
2) Results on 「Isolation and identification of biologically active compounds from fermented soybean products」
① HPLC conditions were set up for analyzing isoflavones in soybeans. By this method, daidzein, daidzin, genistein, and genistin can be anaylzed within 50 minutes.
② Extraction and purification method of isoflavones from soybean, soybean refuse, and fermented soybean were established.
③ Prolyl endopeptidase(PEP) inhibitory activity was screened in order to compare anti-dementia effect of fermented soybeans.
④ The fermented soybeans containing higher contents of isoflavone aglycones were more active against PEP.
⑤ PEP inhibitors were isolated from fermented soybeans and identified as genistein and daidzein.
⑥ The PEP inhibitory activity of fermented soybeans (56.7%) was about two times higher than that of non-fermented ones (27.4%).
⑦ The IC50 values of daidzein and genistein on PEP were 20 and 17 μ M, respectively. In Dixon plot, genistein and daidzein were incompetitive with substrate. The Ki values of daidzein and genistein were 14.41 and 43.78, respectively.
⑧ Thrombin time assay and partial thromboplastin time assay were set up to test anti-coagulant effect of fermented soybeans.
⑨ Water extract of fermented soybean showed higher anti-coagulant activity than methanol extract. Soybeans fermented with strain SI exhibited 39.2% and 48.1% of anti-coagulant activity in aPTT and TT assay, respectively. It was about two times of increase in activity compared to non-fermented soybeans.
⑩ The soybeans fermented with strain SI were extracted with hot water and the water extract was precipitated by 60 and 80% ethanol. The fraction which was insoluble both in 60 and 80% ethanol showed the highest anti-coagulant activity. The sugar and protein contents of the active fraction were 14.4 and 23.6%, respectively.
⑪ The optimal extraction condition for obtaining isoflavone aglycone rich fraction were investigated. When one gram of fermented soybean was refluxed in 5 ml of 95% ethanol for 2 hours, the result was the best.
⑫ The fermented soybeans were extracted according to the above method, and the extract was partitioned with ethyl acetate. The ethyl acetate fraction contained about 17 times higher contents (17.1%) of isoflavone aglycones than ethanol extract.
⑬ For the quality control of fermented soybeans, 1.2 mg±10% of isoflavone aglycone per gram dry weight of fermented soybeans should be contained.
⑭ In case of isoflavone enriched vinegar, 12 μg±10% (when 10 mg isoflavone rich fraction was added in 100 ml vinegar) and 16 μ±10% (when 30 mg isoflavone rich fraction was added in 100 ml vinegar) of isoflavone aglycones should be contained in 100 ml.
⑮ The isoflavone aglycone contents in the fermented soybeans were unchanged up to 5 months later.
⑮ The isoflavone aglycone contents in isoflavone-added vinegar were unchanged up to 5 months later.
목차 Contents
- 표지 ... 1
- 제출문 ... 2
- 요약문 ... 4
- SUMMARY ... 16
- CONTENTS ... 28
- 목차 ... 34
- 제1장 연구개발과제의 개요 ... 40
- 제1절 연구개발의 목적 및 필요성 ... 40
- 제2절 연구개발 내용 및 범위 ... 42
- 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 45
- 제1절 국내·외 관련기술 현황 ... 45
- 제2절 국내·외 관련 연구내용 및 문제점과 본 연구종료 후 기대되는 국내기술 상황 ... 48
- 제3장 고기능성 대두제품 제조를 위한 발효균주 개발 ... 52
- 제1절 서론 ... 52
- 제2절 재료 및 방법 ... 56
- 1. 사용 재료 ... 56
- 2. 배지 및 배양 ... 57
- 3. 분리균에 의한 isoflavone 배당체의 분해력 측정 ... 57
- 4. 분리균의 isoflavone 배당체 가수분해 효소의 활성 측정 ... 58
- 5. Polymerase chain reaction (PCR) ... 59
- 6. 된장의 제조 ... 60
- 7. 효소의 정제 ... 60
- 8. 단백질 정량 ... 61
- 9. 단백질의 전기 영동 ... 61
- 10. 분자량 측정 ... 61
- 제3절 균주의 분리 및 선발 ... 62
- 1. 균의 분리 ... 62
- 2. 균주의 선발 ... 62
- 3. 선발된 균주의 동정 ... 73
- 4. 선발된 균주의 보존법 ... 80
- 제4절 발효조건의 검토 ... 82
- 1. 선발된 균주에 의한 발효과정중 genistein 및 daidzein의 2차 분해조사 ... 82
- 2. 발효에 미치는 온도의 영향 ... 83
- 3. 발효에 미치는 가염 시기의 영향 ... 85
- 4. 발효기간에 따른 isoflavone 배당체의 분해 정도 ... 88
- 5. 발효에 미치는 최적 접종량 ... 89
- 제5절 발효에 미치는 염류 및 기타 첨가제효과 ... 90
- 1. 염농도가 발효에 미치는 영향 ... 90
- 2. 부형제가 발효에 미치는 영향 ... 92
- 3. 부형제 첨가농도의 영향 ... 93
- 4. 혼합발효의 효과 ... 94
- 5. 실험실 scale 배양 ... 95
- 제6절 대규모의 제품을 생산하기 위한 발효 및 제품화 공정 ... 97
- 제7절 Bacillus sp. K123-1 균주가 생산하는 isoflavone glucosidase의 정제 ... 99
- 1. Isoflavone glucosidase 생산에 미치는 배양시간의 영향 ... 99
- 2. 황산암모늄 분획침전 ... 100
- 3. DEAE Sephadex A-50 ion exchange column chromatography ... 101
- 4. Sephacryl S-200 HR gel chromatography ... 103
- 5. Fast protein liquid chromatography(FPLC) ... 103
- 6. 정제효소의 순도검정 ... 106
- 7. 정제효소의 분자량 측정 ... 107
- 제8절 정제된 isoflavone glucosidase의 효소학적 성질 ... 108
- 1. 효소활성 최적 pH ... 108
- 2. 효소의 pH 안정성 ... 109
- 3. 효소활성 최적온도 ... 110
- 4. 효소의 열 안정성 ... 111
- 5. 효소의 기질 특이성 ... 112
- 제9절 효소를 이용한 isoflavone rich fraction 추출 ... 116
- 1. 대두, 대두박 및 대두분 내의 isoflavone 함량 조사 ... 116
- 2. Isoflavone rich fraction 추출 공정검토 ... 116
- 제10절 Isoflavone rich fraction의 기능성 식품화 및 재료화 ... 118
- 1. Isoflavone rich fraction을 첨가한 비스킷 제조 ... 118
- 2. Isoflavone rich fraction을 첨가한 식초 제조 ... 124
- 제4장 발효 대두제품으로부터 약리활성 물질의 분리 및 동정 ... 126
- 제1절 서론 ... 126
- 제2절 Isoflavone 간편 분석법 확립 ... 127
- 1. 새로운 분석법 확립의 필요성 ... 127
- 2. 대두 중 isoflavone 함량 분석법의 확립 ... 127
- 3. 검량선의 작성 ... 128
- 4. Isoflavone 함량 분석을 위한 최적 추출조건 확립 ... 129
- 제3절 항치매 활성 측정법의 확립 및 활성물질의 추출·정제 ... 132
- 1. Prolyl endopeptidase 저해활성 측정법의 확립 ... 132
- 2. 발효 대두의 PEP 저해 활성 ... 133
- 3. Prolyl endopeptidase 저해 활성물질 추출 및 정제 ... 134
- 4. 활성화합물의 구조동정 ... 136
- 제4절 혈전 생성 억제활성 측정법 확립 ... 146
- 1. 혈전 억제활성 assay법 확립의 필요성 ... 146
- 2. Thrombin time assay (TT)법의 확립 ... 147
- 3. Partial thromboplastin time assay (aPTT)법의 확립 ... 147
- 4. 발효 대두에서 혈전형성 억제활성 검정 ... 148
- 5. 항혈전 억제활성 측정시 시료의 전처리법 확립 ... 150
- 제5절 혈전생성 억제 활성 성분의 분획 ... 151
- 1. 항혈전 성분의 분획 및 이화학적 성상 검토 ... 151
- 제6절 혈전 용해 활성의 측정 ... 153
- 제7절 항산화 활성의 측정 ... 154
- 제8절 발효 산물의 약리 작용의 증감 및 유무의 판별, 비교 ... 156
- 1. 항치매 활성의 증감 유무의 판별 ... 156
- 2. 발효에 의한 혈전형성 억제활성의 증감유무의 판별 ... 156
- 3. 발효에 의한 혈전용해 활성 및 항산화 활성 증감유무의 판별 ... 157
- 제9절 유기용매 의한 간단하고 수율이 우수한 isoflavone 대량 추출법 검토 ... 158
- 제10절 동정된 활성 화합물의 활성 기작 검토 ... 162
- 1. 활성 성분의 IC50 value ... 162
- 2. 활성성분의 효소저해 양상 ... 162
- 제11절 시작품의 isoflavone 및 유효성분 분석법 확립에 의한 품질 관리법 개발 ... 163
- 1. 발효대두의 품질관리법 개발 ... 163
- 2. Isoflavone 함유 식초의 품질 관리법 개발 ... 164
- 제12절 보존기간별 함량변화에 따른 유효기간 기준 마련 ... 165
- 1. 발효 대두의 보존 기간에 따른 isoflavone 함량변화 ... 165
- 2. 식초의 보존기간에 따른 isoflavone 함량변화 검토 ... 166
- 제5장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 167
- 제1절 총괄추진계획표 ... 167
- 제2절 연구개발 목표의 달성도 ... 168
- 1. 제1 세부과제 ... 168
- 2. 제2 세부과제 ... 170
- 제6장 연구개발결과의 활용계획 ... 173
- 제1절 활용분야 및 활용 방안 ... 173
- 1. 활용분야 ... 173
- 2. 활용방안 ... 173
- 제2절 현장 보급방안, 산업화 계획 방안 및 기술이전 방안 ... 173
- 제3절 추가 기술개발 방안 ... 174
- 제4절 연구개발 결과의 활용 ... 174
- 제7장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 175
- 제8장 참고문헌 ... 177
- 끝페이지 ... 185
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