보고서 정보
주관연구기관 |
경상대학교 GyeongSang National University |
보고서유형 | 최종보고서 |
발행국가 | 대한민국 |
언어 |
한국어
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발행년월 | 2011-12 |
과제시작연도 |
2010 |
주관부처 |
농림축산식품부 Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs(MAFRA) |
등록번호 |
TRKO201400026368 |
과제고유번호 |
1545002046 |
사업명 |
농림기술개발 |
DB 구축일자 |
2014-11-10
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DOI |
https://doi.org/10.23000/TRKO201400026368 |
초록
▼
○ 연구결과
가) 농가에서 수거한 분변샘플에서 현미경미세조작법(micromanipulation)을 이용하여 E.acervulina(291-5),E.maxima(291-3),E.tenella(291-7)를 포함하여 3종에서 6종류의 단일 균주를 확보하였다. 분리된 콕시듐의 ITS-1지역의 유전자를 증폭하여 국내외 균주와의 유전적 유사성과 유의성을 살펴보기 위하여 보고 국내 균주의 유전자를 NCBI의 GenBank (www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank)에 유전자원을 등록하였다. Genbank에 등록 번호는 HQ33
○ 연구결과
가) 농가에서 수거한 분변샘플에서 현미경미세조작법(micromanipulation)을 이용하여 E.acervulina(291-5),E.maxima(291-3),E.tenella(291-7)를 포함하여 3종에서 6종류의 단일 균주를 확보하였다. 분리된 콕시듐의 ITS-1지역의 유전자를 증폭하여 국내외 균주와의 유전적 유사성과 유의성을 살펴보기 위하여 보고 국내 균주의 유전자를 NCBI의 GenBank (www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank)에 유전자원을 등록하였다. Genbank에 등록 번호는 HQ338947,HQ338948,HQ338949,HQ386732,HQ386733,HQ615990이다.
나)국내에서 분리된 Eimeria 야외 균주의 안정성을 파악하기 위하여 In Ovo inoculation을 실시하였다.E.acervulina,E.maxima,E.tenella의 sporulated oocysts를 각 1×104 혹은 1×105/0.2 ㎖로 준비하여 18일령의 발육란에 200 ㎕씩 접종하여였다. 시험군에 따라서 sporulatedoocysts을 부화란에 접종한 경우 부화율이 5-10% 정도 대조군에 비하여 감소하였다.이의 원인으로는 접종한 sporulatedoocysts의 병원성에 의한 것으로 판단된다.
다)국내 농장 및 분리 균주의 약제 감수성을 평가하기 위하여 시중에서 사료첨가제로 사용 중인 7종의 항콕시듐제제 Clopidol,Diclazuril,Lasalocidsodium,Maduramicin,Monensinsodium, Narasin,Salinomycin Sodium을 사용하였다.3종류 이상의 콕시듐을 포함하고 있는 3농가를 대상으로 한 실험과 분리된 3종류 (E.acervulina,E.maxima,E.tenella)의 콕시듐을 검사한 결과 농가별로 약제에 대한 감수성에 차이를 보이고 있으나 일반적으로 약제에 대한 내성이 있는 것으로 판단된다.그러나 대조군에 비교하여 항콕시듐제의 효과를 보이고 있다.
라) 국내에서 분리된 3가지의 Eimeriaspecies(E.acervulina:291-5,E.maxima:291-3,E.tenella:291-7)를 단독 감염 또는 혼합 감염된 닭에서의 공격 감염에 대한 방어 면역 효과를 검증하기 위하여 Eimeriaoocyst의 총배출량을 조사하여 비교하였다.
(1)분리된 3가지의 Eimeria species (E.acervulina:291-5,E.maxima:291-3,E.tenella: 291-7)를 단독 감염의 경우는 2차 공격접종에서 방어율이 87.5%,98.3%,46.3%로 각각 나타내어서 단일 백신의 접종은 E.tenella을 제외하고는 상당한 효과가 있는 것으로 나타났다.
(2)혼합된 Eimeria (mix;291-5,-3,-7)의 감염에 대한 방어는 0.125 Ⅹ 104 sporulated oocysts/0.5 ㎖ 실험군은 약 52.8 %,0.25 Ⅹ 104 sporulated oocysts/0.5㎖ 실험군에서는 약 53.1%,0.5Ⅹ 104 sporulatedoocysts/0.5㎖ 실험군에서는 약 57.9%로 나타났다.
마) 국내에서 분리된 3가지의 Eimeriaspecies(E.acervulina:291-5,E.maxima:291-3,E.tenella:291-7)를 혼합 감염된 닭에서의 공격 감염에 대한 방어 면역 효과를 검증하기 위하여 증체율을 조사하여 비교하였다.혼합된 Eimeria (mix;291-5,-3,-7)의 감염에 대한대조군(positivecontrol)은 약 35.4% 낮게 나타났으며,1차 감염 0.125Ⅹ 104 sporulatedoocysts/0.5㎖과 2차 공격감염이 된 실험군은 약 42.0% 낮게 나타났으며,1차 감염을 0.25 Ⅹ 104 sporulatedoocysts/0.5㎖과 2차 공격감염이 된 실험군은 약 56.9% 낮게 나타났으며,1차 감염을 0.5Ⅹ 104 sporulatedoocysts/0.5㎖과 2차 공격감염이 된 실험군은 약 65.5% 낮게 나타났다.따라서 실험의 결과는 1차감염과 2차 공격감염 사이에 시간적 고려가 상당히 필요함을 나타냈었으며 일반적으로 많은 양의 콕시듐이 감염된 닭에서 증체율에 문제가 발생하였다.
Abstract
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2. In Ovo inoculation was carried out to investigate pathogenicity of isolates. Chickens were orally infected with 1x104 or 1x105/0.2㎖ sporulated oocysts of Korean E. acervulina, E. maxima, and E. tenella isolates into embryos. Hatchery rate was reduced around 5-10% compared w
2. In Ovo inoculation was carried out to investigate pathogenicity of isolates. Chickens were orally infected with 1x104 or 1x105/0.2㎖ sporulated oocysts of Korean E. acervulina, E. maxima, and E. tenella isolates into embryos. Hatchery rate was reduced around 5-10% compared with control group, suggesting the possibility that isolates have pathogenicity.
3. Effects of Anticoccidial drugs, Clopidol, Diclazuril, Lasalocid sodium, Maduramicin, Monensin sodium, Narasin, Salinomycin Sodium were investigated on Korean isolates by fecal oocyst production. Three fecal samples contained multiple Eimeria species and three Korean isolates showed generally drug-resistance to almost drugs. However, chickens fed a regular diet supplemented with anticoccidial drugs produced less fecal oocysts compared to chickens fed only a regular diet.
4. Chickens were vaccinated with multiple Eimeria species or three Korean isolates (E. acervulina: 291-5, E. maxima: 291-3, E. tenella: 291-7), and challenged against each other. The effects were monitered by fecal oocyst production after a challenge infection.
(1) Chickens were vaccinated with three Korean isolates (E. acervulina: 291-5, E. maxima: 291-3, E. tenella: 291-7) and challenged against each other. The chickens vaccinated with each of E. acervulina, E. maxima, and E. tenella showed 87.5%, 98.3%, and 46.3% reduction of fecal oocyst production compared to that of positive control group, respectively.
(2) Chickens were vaccinated with mixed isolates (E. acervulina: 291-5, E. maxima: 291-3, E. tenella: 291-7) and challenged against mixed isolates. The chickens vaccinated with isolates mixed with each of 0.125 X 104 showed 52.8 % reduction of fecal oocyst production compared to that of positive control group. The chickens vaccinated with isolates mixed with each of 0.25 X 104 showed 53.1 % reduction. The chickens vaccinated with isolates mixed with each of 0.5 X 104 showed 57.9 % reduction
5. Chickens were vaccinated with mixed isolates (E. acervulina: 291-5, E. maxima: 291-3, E. tenella: 291-7), and challenged against mixed isolates. The effects were monitered by body weight gain after a challenge infection. The chickens vaccinated with isolates mixed with each of 0.125 X 104 showed 42.0% reduction of fecal oocyst production compared to that of negative control group. The chickens vaccinated with isolates mixed with each of 0.25 X 104 showed 56.9% reduction. The chickens vaccinated with isolates mixed with each of 0.5 X 104 showed 65.5% reduction. The positive control group showed 35.4% reduction of body weight gain compared to that of negative control group. The results suggested that intervals between vaccination and challenge infection are very important and chickens infected with high dose showed more severe reduction of body weight gain.
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