초록 ▼

연구결과
필요성 및 목표
○국제세포치료학회(ISCT)에서는 2006년부터 연구용 중간엽줄기세포의 표면항원 기준을 제시, 지속적인 연구로 새로운 표면항원들이 보고됨.
○표면항원의 발현 비율은 줄기세포의 기원별, 계대별, 동결, 배양 조건 등에 따라 영향을 받는 것으로 보고되어, ISCT의 기준은 다양한 제조공정이 반영된 중간엽줄기세포 특성을 밝히는 데 한계가 있음
○본 연구는 배양조건 등을 고려한 표면항원 분석조건 등을 확립하여 중간엽줄기세포 치료제 심사시 특성 평가 지표로 활용하고자 함.
방 법 및 결 과

연구결과
필요성 및 목표
○국제세포치료학회(ISCT)에서는 2006년부터 연구용 중간엽줄기세포의 표면항원 기준을 제시, 지속적인 연구로 새로운 표면항원들이 보고됨.
○표면항원의 발현 비율은 줄기세포의 기원별, 계대별, 동결, 배양 조건 등에 따라 영향을 받는 것으로 보고되어, ISCT의 기준은 다양한 제조공정이 반영된 중간엽줄기세포 특성을 밝히는 데 한계가 있음
○본 연구는 배양조건 등을 고려한 표면항원 분석조건 등을 확립하여 중간엽줄기세포 치료제 심사시 특성 평가 지표로 활용하고자 함.
방 법 및 결 과
○중간엽줄기세포 표면항원에 관한 ISCT 자료 및 연구현황 조사·분석
○지방, 골수, 제대 유래의 중간엽줄기세포 확보 및 배양법 확립
○FACS를 이용하여 기원별, 대수, 동결 전후 및 배양조건 등 제조공정을 고려한 외부요인이 반영된 표면항원 발현 분석
- ISCT의 기준을 대부분 충족하지만, CD105와 CD34은 제고 필요성, CD44(양성) 및 CD144(음성)의 활용가능성을 확인
○기원별 다양성과 표면항원의 변이와 유전자 발현양상 등에 대한 추가적인 특성분석 연구가 요구
기대성과
○중간엽줄기세포 제재의 표면항원 상세 기준 및 품질평가 시험에 근거 제공

Abstract ▼

In 2006, ISCT proposed a minimal criteria to characterize mesenchymal stem cells. However, the new CD markers and expression of specific CD markers in accordance with the origin have been reported through continuous research. Also, expression of the CD markers was affected by origin, passage, cryopr

In 2006, ISCT proposed a minimal criteria to characterize mesenchymal stem cells. However, the new CD markers and expression of specific CD markers in accordance with the origin have been reported through continuous research. Also, expression of the CD markers was affected by origin, passage, cryopreservation and culture condition, so minimal criteria of ISCT limit to elucidate the characteristics of mesemchymal stem cells are reflected in the various factors. In this study, we establish CD marker analysis method and apply an evaluation index of stem cell therapy product.
16 CD marker(positive marker: CD13, CD29, CD44, CD73, CD90, CD105, CD146, CD 166; negative marker: CD11b, CD14, CD19, CD31, CD34, CD45, CD144, HLA-DR) were selected through minimal critera of ISCT, domestic stem cell therapy product approval and paper. We selected umbilical cord, adipo tissue and bone marrow derived mesenchymal stem cells which were used as a major raw material for stem cell therapy.
In order to analyzed the CD markers of mesemchymal stem cells are reflected in the various factors, we performed analysis of mesenchymal stem cells were cultured in various condition(origin: umbilical cord, adipose tissue, bone marrow; passages: 5, 10, 15 passage; cryopreservation: 2 month; culture medium: human MSCs growth medium, serum-free medium, ADMEM) by FACS. CD105 and CD34 have to be reconsidered as CD markers of mesenchymal stem cells because CD105 and CD34 were affected by mesenchymal stem cells origin, passages, cryopreservation and culture medium. Also, we suggest the application possibility of CD44(positive) and CD144(negative) as new CD markers. The results of in this study showed that the current CD marker expression criteria(positive≥95%, negative≤2%) should be reconsider. Therefore, this study expected to provide the basis of the surface antigen standards in quality evaluation test of stem cell therapy products.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 자체연구개발과제 최종보고서 ... 2
• 국문 요약문 ... 3
• Summary ... 4
• 목 차 ... 5
• 연구개발과제 연구결과 ... 6
• 제1장 연구개발과제의 개요 ... 6
• 제1절 연구개발과제의 목표 ... 6
• 제2절 연구개발과제의 필요성 ... 7
• 제2장 연구개발과제의 국내·외 연구개발 현황 ... 11
• 제1절 국내 연구개발 현황 ... 11
• 제2절 국외 연구개발 현황 ... 12
• 제3장 연구개발과제의 연구수행 내용 및 결과 ... 17
• 제1절 연구수행 내용 ... 17
• 제2절 연구방법 ... 18
• 제3절 연구수행 결과 ... 24
• 제4장 연구개발과제의 연구결과 고찰 및 결론 ... 37
• 제5장 연구개발과제의 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 40
• 제6장 연구개발과제의 연구개발 결과 활용계획 ... 41
• 제1절 활용성과 ... 41
• 제2절 활용계획 ... 41
• 제7장 참고문헌 ... 42
• 제8장 첨부서류 ... 46
• 끝페이지 ... 48