초록 ▼

Ⅳ. 연구개발결과
- 3종의 Thermococcales 균주를 분리하여 vesicle 생성을 확인하였고, 그중 2종인 T. onnurineus NA1^T 와 Thermococcus sp. KBA1로 부터 vesicle 생성을 확인하였다.
- T. onnurineusNA1^T 균주는 모두 4종류의 밀도가 다른 vesicle을 생성하고, 그중 우점적으로 생산하는 band B, C vesicle은 각각 밀도값 1.2434, 1.2648 g cmNA1^-3을 나타냈다.

Ⅳ. 연구개발결과
- 3종의 Thermococcales 균주를 분리하여 vesicle 생성을 확인하였고, 그중 2종인 T. onnurineus NA1^T 와 Thermococcus sp. KBA1로 부터 vesicle 생성을 확인하였다.
- T. onnurineusNA1^T 균주는 모두 4종류의 밀도가 다른 vesicle을 생성하고, 그중 우점적으로 생산하는 band B, C vesicle은 각각 밀도값 1.2434, 1.2648 g cmNA1^-3을 나타냈다.
- 두 종류의 vesicle형태는 모두구형이고, tail이 없다. 크기는 80-210nm이고, 평균값은 140 nm이다. B, C vesicle의 평균 생산량은 각각 2.7 x 10¹⁰, 3.7x 10¹⁰L^-1로 확인되었고, band B:C의 비율은 약 2:3으로 나타났다.
- Vesicl 내에 DNA가 존재함을 확인하였고, DNA size 는 약 14kb이다.
- 36 종류의 biochemical markers를 이용하여 검색한 결과 vesicle DNA에는 TON_0544가 전달되지 않는 것을 확인하였다.
- Vesicle DNA의 sequence reads를 모세포인 T. onnurineus NA1^T reference genome과 비교분석한 결과 TON_0536-TON_0544 부분의 유전자가 vesicle로 이동되지 않는다는 사실을 알게 되었다.

Abstract ▼

Extracellular vesicles (EVs) produced by a sulfur-reducing, hyperthermophilic archaeon, Thermococcus onnurineus NA1^T (To), were purified and characterized. A maximum of four EV bands, showing buoyant densities between 1.1899 and 1.2828 g cm^-3, were observed after CsCl ultracent

Extracellular vesicles (EVs) produced by a sulfur-reducing, hyperthermophilic archaeon, Thermococcus onnurineus NA1^T (To), were purified and characterized. A maximum of four EV bands, showing buoyant densities between 1.1899 and 1.2828 g cm^-3, were observed after CsCl ultracentrifugation. The two major EV bands, B (ρ²⁵=1.2434 g cm^-3) and C (ρ²⁵=1.2648 g cm^-3), were separately purified and counted using a qNano particle analyzer. The EVs showing different buoyant densities were identically spherical in shape, and their size varied from 80 to 210 nm in diameter, with the 120 and 190 nm sizes predominant. The average size of DNA packaged into EVs was about 14 kb. The DNA of the EVs in band C was sequenced and assembled. The mapping of the ToEV DNA sequences on the reference genome of the parent archaeon revealed that most genes of T. onnurineus NA1T were packaged into EVs, except for an approximately 9.4kb region encoded from TON_0536 to 0544. The absence of this specific region of the genome in the EVs was confirmed from band B of the same culture and from bands B and C purified from a different batch culture. The presence of the 5’-termina lsequence and the absence of the 3’-terminal sequence of TON_0536 were repeatedly confirmed. On the basis of those results, we hypothesize that the unpackaged part of the T. onnurineus NA1^T genome might be related to the process that delivers DNA into ToEVs and/or the mechanism generating the ToEVs themselves.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 초록 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 6
• CONTENTS ... 7
• 목차 ... 8
• 제1장 서론 ... 9
• 제1절 연구개발 목적 및 필요성 ... 9
• 제2절 연구개발의 범위 ... 10
• 제2장 국내외 기술개발 현황 ... 11
• 제1절 국내외 관련분야 기술개발 현황 및 본 연구결과의 위치 ... 11
• 제3장 연구개발 수행내용 및 결과 ... 14
• 제1절 재료 및 방법 ... 14
• 제2절 연구내용 및 결과 ... 20
• 제4장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도 ... 35
• 제5장 연구개발결과의 활용계획 ... 35
• 제6장 참고문헌 ... 36
• 끝페이지 ... 41