초록 ▼

Ⅴ. 연구개발결과
제 1 절 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)의 돼지바이러스성 질병 억제 효능 검증
1. 한방생약소재 황백의 바이러스 억제 효능 검증
◎ 한방생약소재 황백이 면역세포 및 상피세포에서 다양한 바이러스 (RNA virus인 Influenza virus, Vesicular Stomatitis virus, Newcastle Disease virus, Coxsakievirus, Enterovirus-71과 DNA virus인 Herpes Simplex virus등)에 대한 감염 억제 효능을 검증하였음 (In

Ⅴ. 연구개발결과
제 1 절 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)의 돼지바이러스성 질병 억제 효능 검증
1. 한방생약소재 황백의 바이러스 억제 효능 검증
◎ 한방생약소재 황백이 면역세포 및 상피세포에서 다양한 바이러스 (RNA virus인 Influenza virus, Vesicular Stomatitis virus, Newcastle Disease virus, Coxsakievirus, Enterovirus-71과 DNA virus인 Herpes Simplex virus등)에 대한 감염 억제 효능을 검증하였음 (In vitro).
◎ 한방생약소재 황백의 항바이러스 효능이 선천면역 유도 효능에 의함을 검증하였으며 그 기전을 연구하였음.
◎ 인플루엔자 바이러스 challenge 시험을 통해 한방생약소재 황백의 항바이러스 효능을 검증하였음 (In vivo).
◎ 한방생약소재 황백 유래의 성분 (compound)들을 분리 정제 후 유효 성분들중 항바이러스 효능을 나타내는 성분을 확인하였음 (In vitro).
2. 한방생약소재 단삼의 바이러스 억제 효능 검증
◎ 한방생약소재 단삼이 면역세포에서 다양한 바이러스 (RNA virus인 Influenza virus, Vesicular Stomatitis virus, Newcastle Disease virus)에 대한 감염 억제 효능을 검증하였음 (In vitro).
◎ 한방생약소재 단삼의 항바이러스 효능이 선천면역 유도 효능에 의함을 검증하였으며 그 기전을 연구하였음.
◎ 인플루엔자 바이러스 challenge 시험을 통해 한방생약소재 단삼의 항바이러스 효능을 검증하였음 (In vivo).
◎ 한방생약소재 단삼 유래의 성분 (compound)들을 분리 정제 후 유효 성분들중 항바이러스 효능을 나타내는 성분을 확인하였음 (In vitro).
3. 한방생약소재 승마의 바이러스 억제 효능 검증
◎ 한방생약소재 승마가 면역세포에서 다양한 바이러스 (RNA virus인 Influenza virus, Vesicular Stomatitis virus, Newcastle Disease virus)에 대한 감염 억제 효능을 검증하였음 (In vitro).
◎ 한방생약소재 승마의 항바이러스 효능이 선천면역 유도 효능에 의함을 검증하였으며 그 기전을 연구하였음.
◎ 인플루엔자 바이러스 challenge 시험을 통해 한방생약소재 단삼의 항바이러스 효능을 검증하였음 (In vivo).
◎ 한방생약소재 승마 유래의 성분 (compound)들을 분리 정제 후 유효 성분들중 항바이러스 효능을 나타내는 성분을 확인하였음 (In vitro).
4. 한방생약 및 발효조성물의 돼지유행성설사병 바이러스 (PEDV) 질병 억제 효능 검증
◎ 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)의 돼지유행성설사병 바이러스 (PEDV) 증식 억제 효능을 검증하였음 (In vitro).
◎ 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)와 유용 프로바이오틱스를 이용한 한방생약 발효소재의 돼지 유행성설사병 바이러스 (PEDV) 증식 억제 효능을 검증하였음 (In vitro).
5. 한방생약 및 발효조성물의 박테리아성 질병 원인체의 억제 효능 검증
◎ 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)의 흉막페렴균 (A. pleuropneumoniae)에 대한 항균 활성 효능 검증.
◎ 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)와 한방생약발효소재의 E. coli, Salmonella typhimurium에 대한 항균 활성 효능 검증.
◎ 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)와 한방생약발효소재의 선천면역 활성화에 의한 Salmonella typhimurium에 대한 항균 활성 효능 검증.
6. 한방생약 및 발효조성물의 양돈사양시험을 통한 효능시험
◎ 한방생약소재 단삼을 이용한 예비 양돈사양시험을 통한 돼지의 평균증체량, 사료요구율, 장애 대장균총의 감소율 및 장내 유산균총의 증가를 검증함.
◎ 한방생약소재 단삼과 황백 그리고 단삼 황백의 혼합 급여를 통한 양돈사양시험을 수행하여 돼지의 평균증체량, 사료요구율, 장내 대장균총 및 살모넬라총의 감소율 및 장내 유산균총의 증가를 검증함. 또한, 한방생약소재의 급여에 따른 돼지의 면역증강 효능을 다양한 싸이토카인의 측정으로 확인함.
◎ 한방생약소재 단삼과 황백의 혼합급여 또는 단삼과 황백 발효 혼합급여를 통한 양돈사양시험을 수행하여 돼지의 평균증체량, 사료요구율, 장내 대장균총 및 살모넬라총의 감소율 및 장내 유산균총의 증가를 검증함. 또한, 한방생약소재의 급여에 따른 돼지의 면역증강 효능을 다양한 싸이토카인의 측정으로 확인하였고, 면역지표가 될 수 있는 혈중 IgA의 활성화를 확인하였음.
◎ 최종적으로 돼지유행성설사병 바이러스 (PEDV)가 발병한 농장을 대상으로 한방생약소재 단삼과 황백을 혼합급여한 후PEDV에 의한 설사의 경감과 분변으로 배출되는 PEDV의 측정을 통해 한방생약소재의 항바이러스 효능을 검증하였음.
제 2 절 한방생약소재의 발효 및 유효성분 탐색
1. 한방생약소재의 발효설계
◎ 유용 프로바이오틱스의 탐색을 다양한 세균을 이용한 항균활성 측정으로 수행하였으며, 가장 우수한 유산균주를 확보하였음.
◎ 선별된 프로바이오틱스 균주 및 한방생약들을 대상으로 발효효율분석을 실시하였고 발효효율이 우수한 한방생약을 확보하였음.
◎ 발효효율이 우수한 한방생약을 대상으로 선별된 프로바이오틱스 균주를 이용하여 발효를 한 후 항균활성 측정을 통해 최종적인 균주를 확보하였음.
◎ 한방생약의 발효효율을 최적화하기 위하여 한방생약 열수추출물에 탄소원 및 질소원의 최적 농도를 결정하였음.
◎ 20L Scale Fermenter System을 활용하여 최적의 한방생약 발효실험을 수행하였음.
2. 한방생약소재의 지표물질 선정 및 유효성분 탐색
◎ Lab Scale, Pilot Scale에서 한방생약 단삼, 황백, 승마의 추출물로부터 각각의 한방생약이 포함하고 있는 물질들을 분석하여 각각에 대한 지표물질들을 선정하였음.
◎ 한방생약 단삼, 황백, 승마의 추출물로부터 선정된 각각의 지표물질들의 분석을 통해 표준함량 기준을 설정하였고, 한방생약 소재의 산지 및 채취 시기별 지표물질 함량을 분석하여 그 기준을 확립하였음.
3. 한방생약소재로부터 항바이러스 유효성분 탐색 및 확보
◎ 한방생약 소재 단삼, 황백, 승마 열수추출물을 이용한 Semi-Prep LC 분석을 통한 유효 단일물질 후 보군을 확보.
◎ 확보된 유효 단일 물질을 이용한 항바이러스 효능 검증 후 항바이러스 효능이 검증된 황백, 단삼, 승마등의 단일물질을 대상으로 화학적 구조 분석 (NMR spectrum)을 통해 유효성분 검증 및 확보.
제 3 절 돼지소화기성 질병예방용 사료첨가제의 제품화
1. 경구용 한방생약소재의 안정성분석
◎ 한방생약 소재 단삼, 황백, 승마 열수추출물의 지표성분들을 이용하여 추출물의 유통기한을 설정하기 위해, 품질 평가를 위한 지표항목을 설정하고, 가속시험에 따른 지표항목의 변화를 측정하여 적절한 shelf-life를 예측하였음.
2. 경구용 한방생약소재의 안전성분석
◎ 한방생약 소재 단삼, 황백의 안전성 검증을 위하여 식품의약품안전청 고시 제2005-60호 의약품등의 독성시험방법의“비임상시험 관리기준”(2005년 10월 25일)에 따라 암․수 ICR 마우스를 이용하여 단회투여 급성 독성실험을 실시하였고 안전성을 확인하였음.
3. 한방생약소재를 이용한 제품화
◎ 한방생약소재의 열수추출 및 발효를 80L Scale 추출기를 이용하여 실시하였고 대량 추출물로부터 지표물질들을 분석하여 시제품 생산을 위한 준비를 마쳤음.
◎ 소화기 질병 제어용 한방생약제제의 상표와 상품의 디자인을 제작하였음.
◎ 농축분말제제, 일반분말제제 그리고 일반 액상제제 등의 시작품을 제작하였음.
◎ 제품 인허가 (성분등록 제시 또는 성분등록을 위한 분석 성적서)

Abstract ▼

The purpose of this study is “Development of the Immune stimulating and Anti-pathogenic Feedstuff Additives for Organic Farming”. Recently, a disorders of the digestive system which is caused by porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) or Salmonella infection is one of serious problems in the swine fa

The purpose of this study is “Development of the Immune stimulating and Anti-pathogenic Feedstuff Additives for Organic Farming”. Recently, a disorders of the digestive system which is caused by porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) or Salmonella infection is one of serious problems in the swine farm.
In this projects, we evaluates the following items,
◎ We confirmed antiviral and antibacterial activities of an aqueous extract of traditional herbal medicine (Salvia miltiorrhiza (Danshen), Cortex Phellodendri, Cimicifuga heracleifolia Komarow) using in murine macrophage or epitherial cells.
◎ We confirmed that an aqueous extract of traditional herbal medicine (Salvia miltiorrhiza (Danshen), Cortex Phellodendri, Cimicifuga heracleifolia Komarow) can induce the immune stimulation status (Induction of genes and proteins for Type I interferons and cytokines) of murine macrophage or epitherial cells and inhibits diverse virus replication including PEDV.
◎ We tested anti-influenza virus activities of an aqueous extract of traditional herbal medicine (Salvia miltiorrhiza (Danshen), Cortex Phellodendri, Cimicifuga heracleifolia Komarow) using Influenza challenge model in mice.
◎ We established the production process and test standard for production of an aqueous extract of traditional herbal medicine (Salvia miltiorrhiza (Danshen), Cortex Phellodendri, Cimicifuga heracleifolia Komarow)
◎ We evaluated the antiviral effects and immune stimulating effects of porcine feedstuff additives including an aqueous extract of traditional herbal medicine (Salvia miltiorrhiza (Danshen), Cortex Phellodendri, Cimicifuga heracleifolia Komarow) using in swine farms.
◎ Consequently, we will prepare the commercialized porcine feedstuff additives including an aqueous extract of traditional herbal medicine (Salvia miltiorrhiza (Danshen), Cortex Phellodendri, Cimicifuga heracleifolia Komarow) for the prevention or reduction of a disorders of the digestive system in the swine farm.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 요약문 ... 3
• SUMMARY ... 12
• CONTENTS ... 13
• 목차 ... 14
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 및 성과목표 ... 16
• 제 1 절 연구개발의 목적 및 필요성 ... 16
• 1. 국내외 관련연구의 현황 및 문제점 ... 16
• 2. 기술도입의 타당성 ... 18
• 3. 연구개발의 목적 ... 18
• 제 2 절 연구성과 목적 대비 실적 ... 19
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 20
• 1. 국내외 관련연구의 현황 및 문제점 ... 20
• 가. 친환경적 유기축산과 국내 양돈 시장 현황 ... 20
• 나. 친환경적 사료첨가제 기술도입의 타당성 ... 21
• 2. 국내외 제품생산 및 시장현황 ... 22
• 가. 국내 제품생산 및 시장 현황 ... 22
• 나. 국외 제품생산 및 시장 현황 ... 23
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 25
• 제 1 절 한방생약소재(단삼, 황백, 승마)의 돼지바이러스성 질병 억제효능 검증 ... 25
• 1. 한방생약소재 황백의 바이러스 억제 효능 검증 ... 25
• 2. 한방생약소재 단삼의 바이러스 억제 효능 검증 ... 50
• 3. 한방생약소재 승마의 바이러스 억제 효능 검증 ... 61
• 4. 한방생약 및 발효조성물의 돼지유행성설사병 바이러스 (PEDV) 질병 억제 효능 검증 ... 71
• 5. 한방생약 및 발효조성물의 박테리아성 질병 억제 효능 검증 ... 73
• 6. 한방생약 및 발효조성물의 양돈사양시험을 통한 효능시험 ... 76
• 제 2 절 한방생약소재의 발효 및 유효성분 탐색 ... 87
• 1. 한방생약소재의 발효설계 ... 87
• 2. 표준화 공정을 위한 한방생약 소재의 지표물질 선정 및 표준함량 설정 ... 96
• 제 3 절 돼지소화기성 질병예방용 사료첨가제의 제품화 ... 128
• 1. 경구용 한방생약소재의 안정성분석 ... 128
• 2. 경구용 한방생약소재의 안전성분석 ... 135
• 3. 한방생약소재를 이용한 제품화 ... 140
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 148
• 제 1 절 연구개발목표의 달성도 ... 148
• 제 2 절 관련분야의 기술발전에의 기여도 ... 149
• 제 5 장 연구개발 성과 및 성과활용 계획 ... 150
• 제 1 절 실용화․산업화 계획 ... 150
• 1. 산업화 계획 ... 150
• 제 2 절 교육․지도․홍보 등 기술확산 계획 ... 152
• 제 3 절 특허, 품종, 논문 등 지식재산권 확보계획 ... 152
• 1. 연구성과 (특허, 품종, 논문) ... 152
• 2. 특허 ... 153
• 3. 연구논문 ... 155
• 4. 학술발표 ... 155
• 제 4 절 추가연구, 타연구에 활용 계획 ... 156
• 1. 추가연구 ... 156
• 2. 타 연구의 활용계획 ... 157
• 제 6 장 연구개발과정에서 수집한 해외과학기술정보 ... 157
• 제 7 장 연구시설‧장비 현황 ... 157
• 제 8 장 연구실 안전관리 이행실적 ... 157
• 1. 연구실 안전 점검 체계 및 실시 ... 157
• 1) 실험실 안전 점검 체계 ... 157
• 2) 실험실 정밀안전진단 실시 ... 158
• 2. 교육 훈련 ... 158
• 1) 개요 ... 158
• 2) 교육대상 ... 158
• 3) 단계별 교육 이수과정 ... 158
• 4) 교육구분 ... 158
• 3. 보험 가입 현황 ... 158
• 4. 추가 이행 계획 ... 159
• 제 9 장 참고문헌 ... 160
• 끝페이지 ... 169