초록 ▼

BRAF V600E 선택적 저해제인 PLX4032(vemurafenib)는 악성흑색종 환자에서 큰 종양 감소를 가져오지만 대부분의 환자에서 약제 내성이 발생함. 최근 전사조절 조인자 YAP/TAZ가 물리적 자극에 의해 민감하게 반응하며, 항암제 내성을 유발할 가능성이 제시됨.
연구자들은 본 연구를 통해 흑색종 암세포가 PLX4032에 노출되었을 때 액틴 세포골격의 리모델링에 의한 물리적 특성 변화가 일어나며, YAP/TAZ 활성화를 유도하고 PLX4032 내성을 유발함을 규명함. PLX4032 내성 흑색종 세포주에서 액틴 필라

BRAF V600E 선택적 저해제인 PLX4032(vemurafenib)는 악성흑색종 환자에서 큰 종양 감소를 가져오지만 대부분의 환자에서 약제 내성이 발생함. 최근 전사조절 조인자 YAP/TAZ가 물리적 자극에 의해 민감하게 반응하며, 항암제 내성을 유발할 가능성이 제시됨.
연구자들은 본 연구를 통해 흑색종 암세포가 PLX4032에 노출되었을 때 액틴 세포골격의 리모델링에 의한 물리적 특성 변화가 일어나며, YAP/TAZ 활성화를 유도하고 PLX4032 내성을 유발함을 규명함. PLX4032 내성 흑색종 세포주에서 액틴 필라멘트 증가와 세포 면적 증가가 일어나며 이에 동반된 YAP/TAZ 단백질의 활성화가 관찰됨. PLX4032 내성 세포주에 액틴 중합/수축 억제제 처리 시 YAP/TAZ의 활성이 감소되어, 액틴 세포골격에 영향 받음을 확인함. 암세포 증식 및 생존의 YAP/TAZ에 대한 의존도가 내성세포에서 유의하게 높음을 확인하였고, YAP을 과활성화 하면 내성이 유도됨을 관찰함. 또한 내성 세포주의 액틴 세포골격 리모델링을 억제할 타겟 유전자로 인산화효소인 TESK1을 발굴함.
상기 연구결과는 표적 항암제 발생하는 액틴 세포골격 변화/물리적 특성 변화를 타겟으로 하는 항암제 신약 개발의 근거가 될 것임.

Abstract ▼

Ⅳ. Results
Melanoma cells resistant to the BRAF inhibitor PLX4032 exhibit an increase in actin stress fiber formation, which appears to promote the nuclear accumulation of YAP/TAZ. Knockdown of YAP/TAZ reduces the viability of resistant melanoma cells, whereas overexpression of constitutively act

Ⅳ. Results
Melanoma cells resistant to the BRAF inhibitor PLX4032 exhibit an increase in actin stress fiber formation, which appears to promote the nuclear accumulation of YAP/TAZ. Knockdown of YAP/TAZ reduces the viability of resistant melanoma cells, whereas overexpression of constitutively active YAP induces resistance. Moreover, inhibition of actin polymerization and actomyosin tension in melanoma cells suppresses both YAP/TAZ activation and PLX4032 resistance. Our siRNA library screening identifies actin dynamics regulator TESK1 as a novel vulnerable point of the YAP/TAZ-dependent resistance pathway.

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 제출문 ... 2
• 보고서 초록 ... 3
• 요약문 ... 4
• SUMMARY ... 5
• CONTENTS ... 7
• 목차 ... 9
• 제 1 장 연구개발과제의 개요 ... 10
• 1절 암세포의 항암제 내성 문제 ... 10
• 1. 항암제 내성 문제 ... 10
• 2. BRAF 돌연변이 악성흑색종과 BRAF저해제 내성 문제 ... 10
• 2절 세포의 물리적 특성에 의한 생명 현상 조절 ... 11
• 1. Mechanotransduction ... 11
• 2. Hippo-YAP/TAZ pathway를 통한 Mechanotransduction ... 11
• 3절 암세포의 물리적 특성과 항암제 내성 핵심 연구 가설 및 연구 방향 ... 12
• 1. 암세포의 물리적 특성과 항암제 내성 ... 12
• 2. 핵심가설 및 연구방향 ... 13
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황 ... 14
• 1절 BRAF 저해제 내성 기전 및 신약 개발 현황 ... 14
• 2절 국내외 Hippo-YAP/TAZ pathway 연구 동향 ... 14
• 3절 본 연구의 의의 ... 15
• 제 3 장 연구개발수행 내용 및 결과 ... 16
• 1절 BRAF 저해제 내성 세포의 구축 ... 16
• 2절 BRAF저해제 내성 세포주의 액틴 리모델링 ... 18
• 3절 BRAF 저해제 내성 세포의 YAP/TAZ 유전자 활성화 ... 20
• 4절 YAP/TAZ 억제를 통한 BRAF 저해제 내성의 억제 ... 22
• 5절 활성화 YAP에 의한 BRAF저해제 내성 유도 ... 24
• 6절 마이크로어레이 분석을 통한 YAP/TAZ 하위 분자 경로 분석 ... 26
• 7절 액틴 세포골격 리모델링과 YAP/TAZ활성화의 인과관계 ... 28
• 8절 TESK1억제를 통한 액틴 리모델링 유도 BRAF 저해제 내성 억제 ... 31
• 제 4 장 목표달성도 및 관련분야에의 기여도 ... 35
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획 ... 37
• 1절 활용계획 ... 37
• 2절 본 연구 개발의 장래 전망 ... 37
• 제 6 장 참고문헌 ... 39
• 끝페이지 ... 42