초록 ▼

□ 연구개요
Yes-associated protein (YAP)은 Hippo 종양억제경로의 핵심 물질이며, 세포성장과 사멸을 조절하는 데 관여하여, 최근 암치료에서 표적치료의 후보 유전자로 주목받고 있으나, 대표적 여성암인 난소암 및 자궁체부암에서의 연구는 현재까지 매우 부족한 실정이다. 난소암 및 자궁체부암에서 YAP 관련 신호체계가 관련되어 있는지를 밝히고, 이를 억제할 경우 치료적 효과가 있는 지와 그 분자생물학적 기전을 확인하는 것은 향후 난치성 부인암 치료법 개발에 매우 중요하리라 사료된다. 이를 위해 부인암에서 YA

□ 연구개요
Yes-associated protein (YAP)은 Hippo 종양억제경로의 핵심 물질이며, 세포성장과 사멸을 조절하는 데 관여하여, 최근 암치료에서 표적치료의 후보 유전자로 주목받고 있으나, 대표적 여성암인 난소암 및 자궁체부암에서의 연구는 현재까지 매우 부족한 실정이다. 난소암 및 자궁체부암에서 YAP 관련 신호체계가 관련되어 있는지를 밝히고, 이를 억제할 경우 치료적 효과가 있는 지와 그 분자생물학적 기전을 확인하는 것은 향후 난치성 부인암 치료법 개발에 매우 중요하리라 사료된다. 이를 위해 부인암에서 YAP의 과발현이 항암제 내성 및 예후와 관련되어 있는지를 확인하고, YAP의 억제하기 위한 siRNA와 화합물의 효과를 분자생물학적 실험기법을 통해 평가하였다. 또한, 생체에 대한 효과를 평가하기 위해 약물전달체로서 siRNA와 화합물을 동시에 탑재한 PLGA 다중 나노입자를 이용해 정위종양모델로 구축한 전임상 동물실험을 통해 치료적 효과를 평가하여, 향후 실제 임상에서 사용가능한 치료제로서의 개발 가능성을 확인하였다.

□ 연구 목표대비 연구결과
• 부인암 환자의 조직 검체를 이용해 YAP 유전자의 비정상적 발현유무와 그 임상적 의미 확인:난소암과 자궁체부암으로 진단되어 수술적 치료를 시행한 환자를 확인 후 의무기록과 조직병리에서의 YAP 발현정도를 확인함.
• YAP 발현과 siRNA를 이용한 YAP 유전자 억제를 위한 실험조건 수립:-부인암 세포주 Spec-2, Hec-1A, Ishikawa, KLE, HeyA8, HeyA8-MDR (multi-drug resistant), SKOV3, SKOV3-TR (paclitaxel-resistant) 이용 YAP 염기서열 분석을 통해 target siRNA를 검색하고 이를 이용하여 유전자억제를 유도하고, 억제효과의 시간에 따른 변화를 관찰하여, 향후 최적의 실험 조건을 확립함.
• YAP 발현억제의 효과 확인:siRNA를 이용한 YAP의 발현 억제에 의한 세포생존, 세포자멸사, 침습능력, 및 항암제에 대한 감수성의 변화를 확인하였다.
• Dobutamine에 의한 YAP 비활성화 효과확인:Dobutamine을 YAP의 비활성화과정을 확인하고, 이에 의한 세포생존, 세포자멸사, 침습능력, 및 항암제에 대한 감수성의 변화를 확인하였으며, 항암내성 세포주를 이용하여 항암내성 극복 효과를 확인
• Dobutamine과 siRNA를 병용한 효과확인: YAP 억제를 위해 siRNA와 dobutamine을 병합하였을 때의 효과를 in vitro 실험으로 확인
• 약물전달시스템의 개발: siRNA, dobutamine을 단독 또는 동시에 탑재한 PLGA 나노입자의 개발 및 효율성 확인함.
• siRNA 및 dobutamine를 이용한 YAP 억제효과의 전임상시험: 각 세포주를 이용하여 정위종양모델을 만들고 siRNA만 포함된 PLGA 나노입자, siRNA와 dobutamine이 탑재된 PLGA 다종 약물 나노입자 , 항암제 (paclitaxel, docetaxel or cisplatin사용), 항암제와 PLGA 다종 약물 나노입자 를 병합한 치료 시행후 항종양효과 확인함.
• YAP 유전자 억제의 항종양효과의 생물학적 기전 연구: 정위종양모델 연구를 통하여 얻은 조직을 이용하여 YAP 유전자 억제의 항종양효과의 생물학적 기전을 확인함.

□ 연구개발결과의 중요성
Dobutamine 은 현재 임상에서 혈관확장 및 혈압상승제로 흔하게 사용하는 약제로서, 기본적으로 안전성이 확보되어 있는 약제로 인정되며, 이의 항암효과가 입증이 된다면, drug repositioning 의 성공적인 예가 될 가능성이 높다. 또한 YAP은 간암, 뇌암 등 다른 종양과의 관련성도 보고되고 있는 후보물질로서, 이에 대한 새로운 치료제가 개발될 경우, 이는 난소암 뿐만 아니라, 다른 암종으로 확장되어 효과를 나타낼 가능성이 높다고 기대된다.

(출처 : 요약문 2p)

목차 Contents

• 표지 ... 1
• 연구결과 요약문 ... 2
• 목차 ... 3
• 1. 연구개발과제의 개요 ... 4
• 1. 연구의 필요성 및 연구 목표 ... 4
• 2. 연구수행내용 및 연구결과 ... 4
• 1. 부인암 환자의 조직 검체를 이용해 YAP 유전자의 비정상적 발현유무와 그 임상적 의미 확인 ... 4
• 2. YAP 발현과 siRNA를 이용한 YAP 유전자 억제를 위한 실험조건 수립 ... 5
• 3. YAP 발현억제의 효과 확인 ... 7
• 4. Dobutamine에 의한 YAP 비활성화 효과확인 ... 10
• 5. Dobutamine과 siRNA를 병용한 효과확인 ... 12
• 6. YAP 억제를 위한 약물전달시스템의 개발 ... 13
• 7. 정위종양모델 확립 ... 14
• 8. siRNA를 이용한 YAP 억제에 의한 항종양효과 확인을 위한 전임상 동물실험 ... 14
• 9. siRNA와 dobutamine을 포함한 PLGA 다종 약물 나노입자 를 이용한 YAP 억제에 의한 항종양효과 확인을 위한 전임상 동물실험 ... 15
• 3. 연구개발결과의 중요성 ... 18
• 4. 참고문헌 ... 19
• 5. 연구성과 ... 21
• 대표적 연구실적 ... 22
• 끝페이지 ... 25