초록 ▼

Ⅴ. 연구개발결과
1. 한우의 자궁 및 정액 내에는 무균상태이어야 함에도 불구하고 많은 개체에서 다양한 균이 검출되었다.게다가 미경산 한우, 정상 한우 그리고 번식장애 한우의 자궁 세척액과 인공수정용 정액 내 세균의 분포는 서로 다른 양상을 나타냈다.
2. 저수태우에서 발견된 12종의 균 중 병원성이 보고된 균은 5종이 발견되었다. 정액의 경우 13종의 균이 발견되었으며 병원성이 보고된 균은 4종으로 확인되었다. 발견된 균들의 생리학적 기능은 불분명하지만 일부 균은 수태율을 감소시키는 원인으로 작용할 수 있다. 예를 들면

Ⅴ. 연구개발결과
1. 한우의 자궁 및 정액 내에는 무균상태이어야 함에도 불구하고 많은 개체에서 다양한 균이 검출되었다.게다가 미경산 한우, 정상 한우 그리고 번식장애 한우의 자궁 세척액과 인공수정용 정액 내 세균의 분포는 서로 다른 양상을 나타냈다.
2. 저수태우에서 발견된 12종의 균 중 병원성이 보고된 균은 5종이 발견되었다. 정액의 경우 13종의 균이 발견되었으며 병원성이 보고된 균은 4종으로 확인되었다. 발견된 균들의 생리학적 기능은 불분명하지만 일부 균은 수태율을 감소시키는 원인으로 작용할 수 있다. 예를 들면 생식기를 통해 Escherichia coli와 같은 병원성 세균에 감염되면 자궁의 방어기전에 관여하는 다형핵 호중구(Polymorphonuclear neutrophils, PMNs)가 자궁 내로 유입되어 면역 체계 반응을 개시하게 되며, 염증 반응이 발생하면 사이토카인의 분비로 인해 정상적인 임신 관련 호르몬의 합성을 방해하여 수태율을 감소시킬 수 있다.
3. 항균성 시험 천연물질로 한약재 또는 야생초인 황백, 환삼덩굴, 제비꽃, 홍화, 백굴채를 사용하였으며,이 중 황백과 환삼덩굴의 항균효과가 가장 뛰어났다.
4. 황백은 한우의 자궁 세척액 및 정액에서 분리된 20종의 균 중 총 19종의 균에 대하여 항균효과를 보였다. 또한 항균효과가 가장 우수했으며, 농도가 높아짐에 따라 항균효과도 증가되는 양상을 나타냈다.
5. 환삼덩굴의 항균효과는 황백보다는 비교적 효과가 떨어졌지만 대부분의 균에 대해 항균효과를 나타냈고, 자궁 세척액과 정액 내 에서 가장 높은 빈도로 분리된 주요 3가지 균에 대해서 다른 추출물에 비해 높은 항균효과를 보였다.
6. 본 연구에서 우수한 항균효과를 보인 황백과 환삼덩굴 추출물은 특정 세균이 아니라 자궁 내 분리된 모든 세균총에서 우수한 항균효과를 나타내었고, 더욱이 자궁 내 분리 세균 중, 소에게 병원성을 나타낼 수 있는 S. uberis나 E. rhusiopathiae에 대해서도 황백은 우수한 항균효과가 있었고 환삼덩굴은 S.uberis에 우수한 항균효과를 보였다.
7. 황백과 환삼덩굴 추출물을 0.01 μg/ml 농도로 수정란에 첨가한 결과 난할율은 대조군과 비슷하였지만,배반포로의 발생율은 대조군보다 높게 나타남을 확인할 수 있었다. 또한 추출물 처리군에서 생산된 배반포의 총 세포 수는 증가하였고, 세포사멸지수는 감소하는 경향을 보여 주었다.
8. 조직학적 스코어를 통해 HCl을 먼저 자궁내 투여후 LPS를 자궁내 4회 투여하는 경우가 자궁내 염증를 더 유발하는 것으로 나타났으며 이 결과는 기존의 LPS를 자궁내 또는 복강내 투여하는 경우보다 HCl를 전투여 한 후 LPS를 자궁내 투여하는 경우가 자궁 염증 모델로써 적합하다는 것을 밝혔다.
9. HCl를 투여 후 2시간 간격으로 4회 LPS를 투여하여 임상적 소견을 스코어하였을 때 염증정도가 11정도를 나타났지만 황백(PC-PID)과 환삼덩굴(HJ-PID)를 전투여 하였을 경우 염증스코어가 5에서 6 또는 2에서 4정도로 감소하는 것으로 조사되었다.
10. HCl를 투여 후 2시간 간격으로 4회 LPS를 투여하면 자궁 내 염증 유도 단백질 IL-1β와 TNF-a의 발현이 유도되는 것을 확인하였으며 황백과 환삼덩굴을 전 처리 하였을 경우 IL-1β와 TNF-a의 발현이 감소하는 것으로 나타났다.
11. 체외배양 시 환삼덩굴과 황백 추출액을 각각 처리한 결과, 처리군에서의 난할율은 대조군과 비슷하였지만, 배반포로의 발달율은 대조군보다 유의하게 높게 나타남을 확인하였다. 또한 환삼덩굴과 황백을 함께 처리하였을 때에는 항산화제로 알려진 멜라토닌과 유사한 결과를 볼 수 있었다.
12. 체외배양 시 환삼덩굴과 황백 추출액을 처리한 뒤 세포사멸지수와 세포사멸 유전자의 발현이 감소함으로써 배반포의 질적 수준이 향상됨을 확인하였고, ROS의 생성이 감소하는 것을 대조군과 비교분석하여 확인하였음. 또한, 환삼덩굴과 황백 추출액을 함께 처리하였을 때, ROS 생성수준 및 세포사멸 지수가 가장 유의적으로 감소하였으며, 이는 항산화제인 멜라토닌 처리와 비슷한 효과를 확인하였다.
13. 한우 수정란의 체외발달과정 동안 천연물질인 황백과 환삼덩굴의 첨가는 배반포로의 발달 효율, 한우수정란의 난할율 및 생산된 배반포의 질적 수준의 향상시킨다는 것을 확인하였음. 따라서 황백과 환삼덩굴 추출액의 처리는 한우 수정란의 난 분할율 증가와 배반포로의 발달효율을 지속적으로 향상시키는데 있어서 긍정적인 효과를 보여주었다.

Abstract ▼

Ⅳ. Research results and outcomes utilization plan
1. Overcome the conception rate improvement effect of the uterus-microbial agents at the time of cattle reproductive disorders due to intrauterine microbial infection
2. Ensure the reduction and competitiveness of the production cost in concept

Ⅳ. Research results and outcomes utilization plan
1. Overcome the conception rate improvement effect of the uterus-microbial agents at the time of cattle reproductive disorders due to intrauterine microbial infection
2. Ensure the reduction and competitiveness of the production cost in conception rate improvement effect by improving the uterine microbial environment
3. Mass production and breeding to increase the embryo transfer efficiency by improving the uterine microbial environment
4. Effect of strengthening the competitiveness of Korean beef and dairy cows with beef import liberalization
5. In the process of production natural substance extract in vitro fertilized eggs using through the improvement of the culture environment to try to take advantage of the continuous and stable production of portable fertilized egg
6. Consider the ROS removal capability of the natural substance that utilizes an anti-oxidative effect, trying to take advantage of as a basic research for the causes in the improvement of production efficiency and quality of early embryo
7. Safety livestock products
: Antibiotic-free mesh with the needs of the consumer, organic livestock, environmentally friendly animal husbandry, from reality systems such as HACCP has been recommended, in this study, also in the human body and livestock to take advantage of the harmless herbal therapy, developed an antibiotic alternative substances that safety is ensured, to be applied in the field
8. Cow antibiotic-free
: Improve conception rate through the uterus cleaning, you can prevent the disease, such as fourth largest potential prevention, produced to date uterine cleaning agents, the treatment of endometriosis, which was using the antibiotic , by acquiring the lead oil negative effects such as authentication and antibiotic residues of antibiotic-free of crude oil, to reduce the income of farmers. The formulations of the present study is to take advantage of the herbal preparations such as antibiotic-free, to solve the problem as described above, and try to contribute to the dairy farmers of the income increase
9. Improve embryo transfer conception rate
: One of the reasons why national average conception rate can not exceed more than 50%, although implanted in the concept of intrauterine sterile were conducted to date, like the results of this study, different in utero It confirms that there are microorganisms have been. Is likely a side conception rate is not increased by the influence of microorganisms, to expect the conception rate improving breeding farms based on the result of conception rate was promoted by the products to be developed in this study
10. Take advantage of the supplements to improve conception rate at an affordable price
: After preparing this formulation, those artificial insemination, or to implement the intrauterine injected into fertilized egg transplant a couple of days ago, to increase about 10% to 15% than the current conception rate (about 60% or 40%) I expected to. Anyone get the easy product that can be used at 5,000 won of market price per head after the transfer of technology and to make it easier to use this formulation from farmers