초록 ▼

우리나라의 3대 호발성 식품병원균 3종(O157, 살모넬라, 황색포도상구균)에 대한 앱타머를 제조하고, 바이오링커 용도로 활용하기 위해 최적화하였다. 광학현미경용 유리 슬라이드를 기반으로 하여 나노급 금속박막을 형성한 후, 앱타머를 고정화하는 기술을 구축하였으며, 광학현미경을 통해 슬라이드 상에서 바이오링커 결합체를 인식하는 광학장치를 구축하였다. 이러한 장치를 통해 바이오링커 결합체를 자동인식하는 영상처리 프로그램을 개발하였다. 그리고 병원성 세균 3종을 검출하는 protocol을 구축하였다. 본 연구과제를 통해 개발한 원천기술은

우리나라의 3대 호발성 식품병원균 3종(O157, 살모넬라, 황색포도상구균)에 대한 앱타머를 제조하고, 바이오링커 용도로 활용하기 위해 최적화하였다. 광학현미경용 유리 슬라이드를 기반으로 하여 나노급 금속박막을 형성한 후, 앱타머를 고정화하는 기술을 구축하였으며, 광학현미경을 통해 슬라이드 상에서 바이오링커 결합체를 인식하는 광학장치를 구축하였다. 이러한 장치를 통해 바이오링커 결합체를 자동인식하는 영상처리 프로그램을 개발하였다. 그리고 병원성 세균 3종을 검출하는 protocol을 구축하였다. 본 연구과제를 통해 개발한 원천기술은 우리나라의 3대 호발성 식품병원균을 증균배양 없이 신속히 검출하는 기술을 실용화하는 데 활용될 수 있다.
한편, 원자힘현미경(AFM)의 tip 상에 Au의 증착을 통해 앱타머를 고정화하는 기술을 개발하였으며, AFM tip 상에 라이신(ricin)과 결합하는 DNA 앱타머를 고정화한 후 라이신 분자를 검출하는 사례연구를 하였다. 이러한 결과는 AFM을 활용하는 단일분자 검출기술의 기초자료로 활용 가능하다.

Abstract ▼

The purpose of this study was to develop a simple and rapid detection system for foodborne bacteria, which consisted of an optical microscope and its slide chip with artificial antibodies, or RNA aptamers. From an RNA pool, three each RNA aptamers were built by the method of SELEX (systematic evolut

The purpose of this study was to develop a simple and rapid detection system for foodborne bacteria, which consisted of an optical microscope and its slide chip with artificial antibodies, or RNA aptamers. From an RNA pool, three each RNA aptamers were built by the method of SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment) for components of cell wall, LPS (lipopolysaccharide) from E.coli O157:H7, teichoic acid from Staphylococcus aureus and a cell membrane protein of OmpC from Salmonella typhimurium, respectively. These aptamers were hybridized with thiol-conjugated 16dT-linker molecules in order to be immobilized on silver surface which was, in advance, fabricated on glass slide, using a spin-coating method. To confirm that each aptamer retained its specific binding activities to their antigenic live bacteria, microscopic view of bound cells immobilized on silver film were observed. Furthermore, the bacteria were detected by an image processing device which was developed in this study. Finally, a protocol to rapidly detect 3 kinds of food pathogens was suggested.